纳米银体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用研究

【目的】 研究纳米银（silver nanoparticles,AgNPs）体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）的作用,并初步分析其抗病毒作用机制,为PRRSV的防控提供新思路。【方法】 使用0.1875、0.375、0.75、1.5、3、6、12 μg/mL AgNPs处理Marc145细胞,采用CCK-8试剂盒评估AgNPs对Marc145细胞毒性,确定其安全浓度。通过显微观察、间接免疫荧光试验、病毒滴度测定、实时荧光定量RT-PCR方法评估AgNPs体外抗PRRSV感染Marc145细胞的效果。通过间接免疫荧光试验和实时荧光定量RT-PCR方法评估AgNPs对PRRSV的直接灭活效果。通过实时荧光定量RT-PCR方法分析AgNPs对不同感染复数（multiplicity of infection,MOI） PRRSV （0.0001~0.1）黏附和入侵Marc145细胞的影响,以及PRRSV感染Marc145细胞3、6、12、18和24 h后加入AgNPs对Marc145细胞增殖的影响。【结果】 AgNPs对Marc145细胞的最大安全浓度为1.5 μg/mL,0.375、0.75、1.5 μg/mL AgNPs均具有良好的体外抗PRRSV活性,0.375、0.75、1.5 μg/mL AgNPs均对PRRSV起一定灭活作用。AgNPs对不同MOI的毒株黏附和入侵Marc145细胞均有一定抑制作用,且不同时间（3、6、12、18、24 h）加入AgNPs对PRRSV增殖均有一定抑制作用。【结论】 AgNPs具有良好的体外抗PRRSV活性,体外抗PRRSV的作用机制包括直接灭活以及抑制病毒的黏附、入侵和增殖过程。     

纳米银/丝素复合膜修饰电极对对苯二酚的电催化测定

以丝素蛋白质原位还原金属盐,制备出了对对苯二酚具有电催化作用的纳米银/丝素复合膜修饰电极。考察了不同酸度和扫速等因素对对苯二酚响应的影响,及对苯二酚在电极上的响应机制。结果表明:对苯二酚在该电极上有显著响应,在4×10~(-6)～1×10~(-3)mol/L浓度范围内,其氧化峰电流与浓度呈良好的线性关系,有好的检测限和灵敏度,用于实际样品分析结果令人满意。     

包裹BSA的线状银为基底探讨小檗碱的拉曼光谱

通过拉曼光谱技术测定了液体小檗碱(Berberine)的常规拉曼光谱(NRS)及表面增强拉曼光谱(SERS),归属了拉曼特征峰,并与固体小檗碱的NRS进行对比,发现特征峰位基本没变.研究小檗碱与纳米银(Ag-Berberine)、包裹牛血清白蛋白(BSA)的线状银(Ag@BSA-Berberine)的拉曼光谱,分析了线性纳米银(Ag)及包裹BSA的线状银(Ag@BSA)对小檗碱的吸附模型.结果显示,线性纳米银对小檗碱、牛血清白蛋白有明显的拉曼增强效应,增强效应主要在线性纳米银与氨基酸中N的孤电子对、甲氧基中的氧、苯环中的π电子及异喹啉中的N发生了吸附作用.对比Ag@BSA-Berberine和Ag-Berberine的特征峰,加了BSA后的拉曼光谱有明显的减弱,但峰位并没有移动,但是有BSA修饰的纳米银的小檗碱拉曼光谱有较高的稳定性,利于小檗碱的进一步研究.     

纳米银对黑麦草生长特性的影响

利用土壤盆栽试验,以硝酸银作对照,探讨了纳米银对黑麦草生长特性的影响。结果表明,纳米银和硝酸银对植株根系的抑制作用均大于对地上部的抑制作用,银浓度为20 mg·kg-1的纳米银与硝酸银处理根冠比最大,分别为2.43、2.33,说明低浓度银对植物生长有促进作用。当纳米银浓度大于20 mg·kg-1时,随浓度增加黑麦草生物量下降,根系长度减小,平均直径增加,根尖数减少,并且纳米银对黑麦草根系生态学特性的抑制作用强于同浓度普通银离子,说明纳米银对植物毒害的机理不只是因为纳米银能转化为离子态银,还与其粒径小、比表面活性高等纳米特性有关。     

纳米银对华南毛蕨切叶的保鲜效应研究

试验探讨了新型抗菌剂纳米银(nano-silver,NS)预处理对华南毛蕨(Cyclosorus parasiticus)切叶采后的保鲜效应。结果表明,用0.5、1.0、2.0 mg/L NS溶液预处理华南毛蕨切叶24 h后再瓶插于去离子水中,可显著延长该切叶的瓶插寿命。进一步研究发现,NS预处理可显著改善华南毛蕨切叶的水分代谢,并有效延缓其鲜重下降和叶片萎蔫。     

茶叶浸取液制备的纳米银对土壤微生物的影响

为探究茶叶浸取液制备的纳米银对土壤微生物的生物安全性的影响,本研究利用植物还原法制备纳米银抗菌材料,并将其制成1000 mg/L的纳米银喷雾,分析其对土壤微生物多样性及丰富度的影响。结果表明：空白对照组(CK)与实验组(Nano-Ag)的样本土壤中,所具有的微生物类别基本一致,但是不同类别微生物的丰度具有一定差异。实验组和对照组的Coverage数值均较高(Coverage>99.71%),香农指数均较大(Shannon>5.46),辛普森指数均较小(Simpson<0.02),两组间ACE指数和Chao指数差异均较小(ACE<2,Chao<6);同时,纳米银可抑制变形菌门下的α-变形菌纲和放线菌门下的嗜热油菌纲的生长,而能够促进绿弯菌门下纤线杆菌纲的生长。本文验证了纳米银具有一定程度的生物安全性,拓宽了纳米银材料的潜在应用范围,为纳米材料在环境及医疗等领域的深入应用奠定了基础。     

不同粒径银纳米颗粒在家蚕体内的转运·分布及代谢研究

以家蚕为模式生物,研究了2种不同粒径的银纳米颗粒[Ag NPs,直径分别为(23.2±2.8)nm和(47.6±5.2) nm,分别记为Ag NPs-23.2 nm及Ag NPs-47.6 nm]在家蚕体内的转运、分布和代谢。在家蚕5龄的第3天,将不同浓度的Ag NPs(60μg/头、120μg/头、180μg/头)通过腹足注射的方式导入家蚕体内,分别于注射后24、48、72 h解剖家蚕,获得家蚕血液、丝腺和中肠,同时收集蚕砂,结茧后收集蚕丝,然后用微波消解结合电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定各组织及蚕砂、蚕丝中Ag的浓度。结果表明,不同组织中Ag的浓度随时间的变化趋势差异较大。120μg/头Ag NPs注射24 h后,血液中Ag的浓度分别为(23.87±3.00)μg/mL(Ag NPs-23.2 nm)、6.54±0.33μg/mL(Ag NPs-47.6 nm),中肠对应的Ag浓度分别为(200.34±12.11)μg/g(Ag NPs-23.2 nm)、(20.12±1.60)μg/g(Ag NPs-47.6 nm)。血液中Ag的浓度随着时间的推移而降低,而中肠中Ag的浓度则持续升高;蚕砂中Ag浓度也随时间而降低。由此可见,注射进入血液中的Ag NPs会向中肠转运,再通过代谢进入蚕砂而被排出体外。小粒径的Ag NPs更容易被家蚕吸收并在体内富集,而大粒径的Ag NPs更容易被代谢进入蚕砂。通过对不同粒径Ag NPs在家蚕体内的转运、分布和代谢的研究,可为Ag NPs的毒理研究提供了一定的支持。     

纳米银对瓶插月季切花乙烯作用的拮抗效应

 以月季‘影星’（Rosa hybrida‘Movie Star’）切花为试材,用5、10和30 mg · L^-1纳米银（nano-silver,NS）溶液,0.5 mmol · L^-1硫代硫酸银（silver thiosulfate,STS）溶液和去离子水（对照）分别预处理花枝（长为25 cm）基端2 h后再移至去离子水中瓶插,之后用10 μL · L^-1外源乙烯处理24 h,观测切花瓶插期间的观赏品质,瓶插寿命,花径和花枝鲜样质量等指标的变化。结果表明：乙烯处理可加快切花失水凋萎及叶片脱落,并抑制花朵开放,而NS处理可显著减轻乙烯处理的不利影响,其中以30 mg · L^-1 NS处理效果最佳,该处理月季切花的瓶插寿命比乙烯处理延长7 d。另外,取月季切花的花朵（带5 cm花茎,无叶）进行上述试验,进一步证实乙烯处理可抑制花朵开放,而NS处理可显著减轻乙烯对花朵开放的抑制作用。     

纳米包装材料延长双孢蘑菇贮藏品质的作用

[目的]通过制备一种含纳米Ag、纳米TiO2和凹凸棒土的纳米包装聚乙烯(PE)包装薄膜,研究双孢蘑菇在4℃下贮藏10d期间,纳米包装材料对其感官品质、生理指标和营养指标变化的影响.[方法]跟踪检测贮藏过程中双孢蘑菇的失重率、白度、相对电导率、多酚氧化酶活性、丙二醛、总糖和可溶性蛋白含量等指标的变化,分析纳米包装材料和普通聚乙烯材料对双孢蘑菇感官品质、生理指标和营养指标的影响.[结果]与普通聚乙烯包装材料相比,添加纳米粒子的包装材料能够较好地抑制双孢蘑菇发生失水萎蔫和褐变现象,使其保持贮藏前洁白色的感官品质.贮藏10d后,纳米包装材料处理组双孢蘑菇的失重率、相对电导率、丙二醛含量和多酚氧化酶活性分别为1.46％、22.5％、3.50 μmol·kg-1、161.89 U·g-1·min-1,显著低于对照处理组的1.86％、30.2％、4.66μm01·kg-1和233.84 U.g-1·min-1,(P＜0.05),而总糖和可溶性蛋白等营养成分的保留量均显著高于对照组的含量.[结论]纳米包装材料能够有效抑制贮藏期间双孢蘑菇感官品质的劣变,降低营养价值的损失,提高综合贮藏品质,延长贮藏时间.     

以壳聚糖分子为稳定剂的银纳米颗粒的水热法合成研究

[目的]研究一种以壳聚糖作为还原剂及稳定剂、通过一步水热合成法制备纳米银颗粒的新方法.[方法]用水热法合成以壳聚糖为稳定剂的银纳米颗粒,利用水热法产生的较高温度和较高压力的条件来制备稳定的银纳米颗粒,并考察颗粒的稳定性.[结果]制备的纳米银溶胶具有较好的稳定性,可在室温下长期保存.通过改变反应初始pH值,可调控其大小和形貌.在酸性条件下,测得纳米银颗粒带正电,这非常有利于将其应用在抗菌研究中.[结论]该方法具有环保、简便、产量高等特点,有望应用到以壳聚糖分子为稳定剂的其他金属纳米材料的合成研究中.