白屈菜CmFAD2基因的克隆及植物转化载体构建

通过对白屈菜低温应答过程的转录组分析发现膜脂不饱和化相关基因的表达在一定过程中发生变化,脂肪酸去饱和酶基因FAD2在随温度的变化趋势为正"V"型,且表达量变化显著。利用NCBI等在线软件对序列进行相关生物学信息分析,并对白屈菜FAD家族成员FAD2基因的完整开放阅读框(ORF)进行克隆,并命名为CmFAD2。选用克隆载体pMD-19-T,转化大肠杆菌DH5α,测序验证序列正确性及完整性。将目的基因与植物表达载体pRI-201-AN连接构建重组DNA pRI-201-AN-Cm FAD2,电击法转化农杆菌LBA4404,利用菌液PCR法验证成功。该基因可作为药用植物抗寒品种创制的候选基因。     

博落回提取物猪耐受性评价及其抗结肠炎机制

将健康的50头长大白杂交猪均分为5组,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别按每千克饲料添加博落回散30、150、300、600 mg混饲给药,相当于推荐临床剂量的1、5、10、20倍,对照组(CK)饲料中不添加博落回散,连续饲喂60 d,研究不同剂量博落回散对猪的生长性能、血液学指标、血清生化指标及组织病理学的影响,基于网络药理学探讨博落回提取物(MCE)抗结肠炎的潜在机制。结果表明,与CK相比,饲料中添加30 mg/kg的博落回散可显著提高试验猪的平均日增质量,显著降低料肉比,其他所用剂量的博落回散对试验猪的生长性能均无显著影响;饲料中添加30~600 mg/kg的博落回散的试验猪血液学和血清生化指标均无显著变化,且各脏器组织未见异常病理性损害。可见,饲料中添加30~600 mg/kg博落回散连续饲喂60 d,试验猪具有较好的耐受性。通过SwissTargetPrediction、Genecards、STRING等工具和数据库初步揭示了MCE可能是通过作用于ESR1、BCL2L1、MTOR、MCL1、PTGS2、MAPK8、MMP9、MAPK1、ERBB2和PIK3CA等靶点,并通过ErbB和TNF等信号途径发挥抗炎作用的。     

白屈菜的药理作用及栽培技术

白屈菜(Chelidonium maius L. ),别名山黄连、土黄连、八步紧、断肠草,为罂粟科白屈菜属植物.主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、河北、山西、内蒙古、陕西、新疆、山东、江苏、江西、河南、四川等省(区).多野生于山谷的湿润地带、村边、路旁及水沟边.白屈菜分布广泛、适生性强、用途广、栽培繁殖容易,目前还未得到开发利用,因此极具开发价值.     

博落回的栽培

博落回[Macleaya cordata（Willd．）R．Brown]为罂粟科博落回属多年生草本植物，别名三钱三、翻白牛、号筒杆（梗）。主产于广西、广东、四川、河北等省区。以干燥的全草入药，具有祛风镇痛、散瘀消肿、杀虫、止痛之功效．常用于治疗跌打损伤、风湿关节痛、浊虫脚、皮肤癌痒、疥、恶疮、阴道滴虫等。主要化学成分为血根碱（sanguinarine）、白屈菜季铵碱（chelerthrine）、白屈菜碱（chelldonine），具有一定的抗癌活性。同属植物还有小果博落回[M．microcarpa（Maxim．）Fedde]     

药用花卉白屈菜

白屈菜(chelidonium majus L.)罂粟科白屈属.也称山黄连,土黄连,八步紧,断肠草,小人血七,雄黄草等.分布于欧洲至亚洲东部,在我国北方常见.遍布吉林省通化地区各市县.     

养兔忌喂的草料

有些草料有毒,不能用来喂兔,否则容易引起兔中毒。常见的不能或不宜用来喂兔的草料有：车前、牵牛子、断肠草、唐松草、灰菜、毛茛、毒芹、龙葵、苦参、白头翁、回回蒜、地枣儿、酸模、天南星、半夏、苍耳、白屈菜、石龙芮、芜花、夹竹桃、万年青、风仙花、蔓陀罗、樱桃叶、玉米苗、高粱苗、高梁叶、蓖麻叶、棉花叶、嫩桃树枝叶、发芽的马铃薯、落叶松、番茄枝叶、野葱、臭干菊、野亚麻、艾菊、猪秧秧、乌头草、野姜、狗舌草、毛地黄和大麻叶等。     

博落回中6种生物碱对大鼠和猪醌氧化还原酶2的作用研究

为了研究博落回中6种主要生物碱别隐品碱、原阿片碱、血根碱、白屈菜红碱、二氢血根碱和二氢白屈菜红碱对大鼠和猪肝胞液醌氧化还原酶2(NQO2)的影响,初步筛选出对大鼠或猪NQO2具有诱导或抑制作用的生物碱,探讨其在畜禽体内的代谢机制,建立了大鼠和猪NQO2体外孵育体系,以槲皮素为阳性对照,噻唑蓝(MTT)为底物,阳性对照物和待测化合物分别与空白组肝胞液孵育,初步筛选出具有诱导或抑制作用的生物碱。结果显示:博落回中的6种主要生物碱对大鼠和猪NQO2的抑制类型均是可逆性反竞争性抑制,其中原阿片碱和血根碱对大鼠和猪肝胞液NQO2具有较强的抑制作用;原阿片碱对雄性大鼠、雌性大鼠和猪NQO2的抑制常数分别为29.26、93.84和18.35μmol·L~(-1),半数抑制浓度(IC_(50))分别为(39.80±2.42)、(203.65±0.20)和(309.20±0.83)μmol·L~(-1);血根碱对雄性大鼠、雌性大鼠和猪NQO2的抑制常数分别为54.87、23.34和151.3μmol·L~(-1),IC_(50)分别为(160.67±5.77)、(148.00±6.62)和(118.25±0.11)μmol·L~(-1);别隐品碱和二氢白屈菜红碱对雌性大鼠NQO2无抑制作用,二氢血根碱对猪NQO2的抑制作用非常微弱。研究结果为博落回中原阿片碱和血根碱的临床应用提供了一定的理论基础。     

RP-HPLC法测定博落回总碱中白屈菜红碱含量的方法研究

建立博落回总碱中白屈菜红碱的RP—HPLC含量测定方法。采用日本资生堂ODS—MG C18液相色谱柱（4．6mm×150mm,5μm）;以乙腈-0．1％磷酸溶液（45：55）（每100mL加十二烷基磺酸钠0．1g）为流动相;检测波长270nm;流速为1．0mL／min。结果显示,白屈菜红碱峰形对称,拖尾因子低于1．5;在0．1μg～0．9μg范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系（r=0．9999,n=5）;在80％、100％、120％三种添加水平下的平均回收率分别为97．4％（RSD：0．7％,n=3）、98．6％（RSD=0．1％,n=3）、99．5％（RSD=0．8％,n=3）。利用该法测定博落回总碱中的白屈菜红碱,结果准确度高、精密度好,可作为博落回总碱的质量控制方法。     

白屈菜生物碱提取工艺研究

建立了反相HPLC法检测白屈菜碱含量的色谱条件,运用正交试验,分别以浸膏重量和白屈菜碱含量作为评价指标,考察了热浸和超声波两种醇提工艺的提取效果。运用SPSS14.0软件对结果进行分析,得到优化的提取工艺如下:以白屈菜浸膏为目标物质时,热浸提取法提取效率优于超声波提取法,且差异达到极显著水平,其提取条件为65%乙醇,料液比1:20,提取温度80℃,提取时间2h;以白屈菜碱为目标物质时,超声波提取法效果优于热浸提取法,差异极显著,其提取条件为95%乙醇,料液比1:10,提取温度50℃,提取时间0.5h,提取频率为85Hz。