橘色双冠丽鱼黑色素细胞和黄色素细胞的分离、培养与鉴定

为探讨橘色双冠丽鱼(Amphilophus citrinellus)黑色素细胞和黄色素细胞的分离、培养与鉴定方法，观察鱼类色素细胞生长特征，本研究以橘色双冠丽鱼的尾鳍、鳞片、皮肤组织为材料，在25℃~28℃条件下，分别在胰蛋白酶溶液和胶原酶溶液中消化6 h和12 h，可有效分离出色素细胞团，细胞悬液经气孔尼龙网过滤后，于35%-45%-55% Percoll试剂中梯度分离和收集黄色素细胞和黑色素细胞。采用K-SFM培养基进行细胞原代培养和细胞纯化，抑制成纤维细胞和角朊细胞的生长，用十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)、双抗、bFGF的DMEM培养基进行色素细胞传代培养；运用巴染色和透射电镜观察细胞形态，并用分子标记技术进行细胞鉴定。结果显示，细胞分离时，黑色素细胞位于Percoll试剂45%和35%浓度层之间，黄色素细胞位于Percoll试剂35%浓度层上，2种色素细胞均凝聚成絮状。透射电子显微镜观察发现，黑色素细胞内部含大量黑色素小体，而黄色素细胞内部含喋呤体和类胡萝卜素囊泡；黑色素细胞左旋多巴(L-DOPA)染色呈阳性；取第10代色素细胞进行体色相关基因黑皮素1受体(melanocortin receptor 1, MC1R)、酪氨酸酶(tyrosinase, TYR)和牛内皮素受体B(endothelin receptor B, EDNRB) PCR检测，显示基因扩增条带特异性强，表明获得的2种色素细胞具有良好的生物学活性。本研究建立了橘色双冠丽鱼黄色素细胞和黑色素细胞的分离培养与鉴定方法，为进一步开展鱼类体色细胞分化和体色形成的分子机理研究提供了细胞模型。     

牦牛源正呼肠孤病毒2型的检测和分离鉴定

旨在调查川西北牦牛哺乳动物正呼肠孤病毒（MRV）的感染情况并分离病毒。采用RT-PCR方法，对采自川西北15个牧场的72份牦牛腹泻粪便样本和其中5个牧场的15份腹泻牦牛血清样本进行MRV检测，阳性样本进一步用分型PCR确定其血清型。结果显示，粪便样本中MRV检出率为20.83%（15/72），血清2型的比例为60%（9/15）；血清样本中MRV检出率为40%（6/15），血清2型的比例为83.33%（5/6）；未检测到其他血清型。成功地从腹泻粪便中分离到1株MRV血清2型毒株（TCID₅₀为4×10^-8.56·mL^-1），并获得长度为23 587 bp的分离株全基因组，该分离株与中国猪源毒株的遗传关系最近；与GenBank中所有的MRV S1基因相比，该分离株有4个独特的氨基酸突变。本研究从牦牛中检测到MRV，并分离到1株牛源MRV血清2型毒株，为进一步研究MRV血清2型生物学特性奠定了基础。     

思茅松毛虫3龄幼虫肠道可培养细菌的多样性

采用纯培养法对采集自云南地区的思茅松毛虫(Dendrolimu kikuchii)3龄幼虫进行肠道细菌多样性的研究,这些研究资料与菌种数据为后研究思茅松毛虫发育奠定基础.对采自安宁市的150头思茅松毛虫3龄幼虫的肠道细菌进行分离与纯化,并且对所培养菌株的进行形态特征观察及生理生化指标测定,通过这种方法对菌株进行初步的鉴定,再结合16S rDNA分子鉴定技术进行分析,判定细菌多样性.结果显示,从3龄幼虫肠道中共分离到152株细菌,初步鉴定隶属于6个属9个类群,分别为62株芽孢杆菌属(Bacillus sp.)(3个类群)、35株微球菌属(Micrococcus sp.)(2个类群)、23株葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)(1个类群)、11株链霉菌属(Streptomyces sp.)(1个类群)、12株不动杆菌属(Acinetobacter sp.)(1个类群)、9株泛菌属(Pantoea sp.)(1个类群).其中,芽孢杆菌属具有最高的相对分离率为40.78％,为优势菌群.思茅松毛虫3龄幼虫肠道细菌的多样性丰富,通过分析细菌种类及各水平之间的相关性,为更深入研究细菌与思茅松毛虫的关系和为思茅松毛虫的防治奠定基础.     

一株鸡源荚膜A型多杀性巴氏杆菌分离鉴定及耐药性分析

从疑似禽霍乱病死鸡中分离一株细菌,采用16SrRNA方法鉴定为多杀性巴氏杆菌,PCR方法分析其血清型为A型,对其进行耐药性分析,结果显示分离株对氨苄青霉素、头孢噻肟、恩诺沙星、多粘菌素敏感,对青霉素、链霉素、四环素、氟苯尼考高度耐受.本研究结果为鸡源多杀性巴氏杆菌的防治提供参考.     

一种沙丁胺醇免疫磁珠分离富集试剂盒的研制

通过沙丁胺醇与对氨基苯甲酸反应,制备出沙丁胺醇免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中沙丁胺醇的捕获量为20 ng/mL,与沙丁胺醇结构或者功能相似的竞争药物:克仑特罗、莱克多巴胺、苯乙醇胺A、溴氯布特罗、溴布特罗、特布他林、羟甲基沙丁胺醇、西马特罗、妥布特罗、马喷特罗、赛布特罗、克仑潘特、奇帕特罗、喷布特罗、克仑丙罗、马布特罗、氯丙那林等17种药物进行特异性反应时,均无交叉反应。     

茶树内生真菌的分离及广谱抑菌菌株的筛选鉴定

为应用茶树内生真菌资源防治植物病害提供参考,对桂香18号茶树的根、茎、叶进行内生真菌分离纯化,对分离的内生真菌进行7种植物病原菌的抑菌活性测定,根据测定结果筛选出广谱抗性菌株应用于生产。结果表明:从茶树的根、茎、叶中共分离出24株内生真菌,其中,从茎中分离的编号为J-7的内生真菌抑菌效果较好且广谱性较强,其对芒果蒂腐病、香蕉枯萎病、芒果炭疽病、苹果轮纹病、火龙果黑斑病、番茄早疫病的抑制率分别为70.14%、75.76%、75.86%、80.16%、85.59%、93.18%,结合形态学鉴定和分子生物学鉴定,该菌株属于镰刀菌属(Fusarium.sp)。     

基于可持续理论视角下陕南脱贫移民搬迁生计研究——以白河县为例

脱贫攻坚移民搬迁同传统的人口自然流动相比是一种政府行为,由于搬迁公共基础设施建设规模效益要求,导致相当数量的农户出现了人地分离的现象。贫困山区农民自身文化素质偏低引发进城务工能力缺乏,导致出现"搬得出、留得住、难致富"的现实问题,随着我国移民搬迁人口规模越来越大,移民后的生计问题也引起了社会和诸多学者的广泛关注。生计问题事关农户能否摆脱贫困,这对于一个家庭一个社区的发展都有重大的影响,因此,运用可持续生计理论,研究移民搬迁的可持续生计问题寻求解决的途径具有十分重要的理论和现实意义。     

连翘叶精油微胶囊制备工艺优化及其对油脂抗氧化的影响

为探索制备连翘叶精油微胶囊的工艺条件及其对油脂的抗氧化效果，以包埋率为评价指标，在单因素试验的基础上，采用响应面法对连翘叶精油微胶囊的工艺条件进行了优化，同时采用测定过氧化值（POV）、脂肪氧化程度值（TBARS）的方法探索了微胶囊对油脂的抗氧化能力。结果表明，连翘叶精油微胶囊的最佳工艺参数为：壁芯比8∶1（g/mL），包埋温度60 ℃，包埋时间2.3 h，包埋功率400 W，在此条件下连翘叶精油微胶囊包埋率可达44%。油脂抗氧化研究结果表明，微胶囊组ML（0.20 g）、MM（0.10 g）、MS（0.05 g）的POV值高于阳性对照组（VC），但明显低于空白对照组；微胶囊ML、MM、MS三组的TBARS值低于空白对照组，且随着连翘叶精油微胶囊用量的增大，其对油脂氧化的抑制作用逐渐增强。     

肉仔鸡沙门氏菌的分离鉴定与防治

新时期下,随着我国社会与经济的蓬勃发展,居民生活质量获得显著改善,鸡肉成为居民日常餐桌上的重要食品,带动了肉鸡养殖行业的快速发展,但是在养殖过程中,鸡沙门氏菌作为一种常见疾病,其会对养殖户造成巨大经济损失,需要引起养殖户的高度重视,本文主要针对肉仔鸡沙门氏菌的分离鉴定与防治进行分析和探究,希望给予我国鸡养殖行业以些许参考和借鉴.     

副猪嗜血杆菌病免疫防治技术研究与应用

副猪嗜血杆菌病是流行于猪群的接触性呼吸道传染病,该病可以影响养猪生产的各个阶段,临床上以猪的纤维素性多发性浆膜炎、心包炎、关节炎、脑膜炎为特征。该项技术对副猪嗜血杆菌病的临床研究,并对我们地区病原菌株的分离鉴定、血清和基因分型,选择相对应的疫苗和药物进行对比试验确定良好效果。