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1.
康洁 《湖北农业科学》2011,50(2):353-357
为探讨马齿苋多糖(Portulaca oleracea polysaccharide,POP)对小鼠大脑神经细胞代谢损伤的修复保护机制,采用原代培养小鼠大脑神经细胞的方法,分别用20μmol/L的β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)处理原代培养细胞、20μmol/L的Aβ加10 mmol/L的POP共同处理原代培养细胞;对处理的原代细胞进行倒置相差显微镜观察与PI-Hochest双染色成活分析,用Western blotting检测处理后的原代细胞P35和P25条带的表达;pEGFP-tau-s3和pcDNA-GSK-3β转染原代培养细胞,pEGFP-tau-s3和pcD-NA-GSK-3β加POP共同转染原代培养细胞,48 h后荧光观察和Western blotting检测GSK-3β的表达。结果显示,倒置相差显微镜下经20μmol/L Aβ处理的原代培养细胞出现了皱缩,部分细胞死亡;经PI-Hochest双染色细胞成活分析,Aβ和POP共同处理的原代培养细胞成活率明显高于只用Aβ处理的原代培养细胞;Western blotting检测到Aβ处理的细胞出现了P25条带,而Aβ加POP共同处理的细胞P25条带明显减弱;Western blotting检测发现,pEGFP-tau-s3和pcDNA-GSK-3β与POP共转染的细胞中,其tau蛋白的迁移率高于只转染pEGFP-tau-s3和pcDNA-GSK-3β的细胞tau迁移率。所以POP对小鼠大脑原代培养细胞Aβ损伤有修复保护作用,并能减少P35到P25的裂解和GSK-3β对tau的磷酸化。  相似文献
2.
[目的]研究玫瑰花提取物对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的损伤PC12细胞的保护作用。[方法]PC12细胞加入Aβ25-35共同孵育后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PC12细胞活力,比色法检测细胞内丙二醛(MDA)含量,酶联免疫法检测细胞内Nf-κb水平。[结果]玫瑰花提取物对PC12无显著细胞毒性,可以显著抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞毒性。与模型组相比,添加玫瑰花乙酸乙酯萃取物的样品组能降低PC12细胞内MDA浓度和Nf-κb表达。[结论]玫瑰花提取物对β-淀粉样蛋白致PC12细胞损伤具有一定的抑制作用,其作用机理可能与降低Aβ25-35所致的PC12细胞内的氧化应激有关。  相似文献
3.
郭燕君 《现代农业科技》2011,(12):303-304,306
研究β淀粉样蛋白(25-35)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠海马自噬相关蛋白Beclin-1的表达和学习记忆功能的影响。通过行为学以及免疫组织化学检测,观察模型大鼠学习记忆功能以及海马Beclin-1表达的变化。行为学检测表明:模型组的学习记忆功能明显低于正常组,模型组Beclin-1表达明显降低(P<0.01)。海马CA1区注射β淀粉样蛋白(25-35)大鼠学习记忆力下降,Beclin-1表达下调,提示Beclin-1蛋白的表达降低很可能是β淀粉样蛋白(25-35)致神经元可塑性降低的关键环节。  相似文献
4.
通过构建斑马鱼(Danio rerio)SAA原核表达载体,在大肠杆菌(E.coli)TB1中诱导表达并纯化获得了斑马鱼SAA融合蛋白,将纯化的斑马鱼SAA蛋白免疫Balb/c小鼠,制备了特异性多克隆抗血清,并研究了斑马鱼SAA融合蛋白与细菌的结合能力及检测了抗体效价。结果表明,纯化的斑马鱼融合SAA蛋白能够与5种细菌直接结合,血清效价达到1∶2 000以上。  相似文献
5.
检测了转基因Alzheimer病(AD)模型小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、睾丸组织中Cu、Fe、Zn的含量.结果表明:除肾脏外,AD小鼠各组织中Fe的含量都比对照组的高;骨和脑中的Cu比对照组多,其他组织中的Cu比对照组少;脾、肺中的Zn比对照多,其余组织的Zn均少于对照组.AD对过渡元素分布的影响有性别差异:雄性个体中过渡元素含量异常的组织数目比雌性的多,与正常值偏离的程度也比雌性的严重.在脑切片中,AD个体Cu、Zn、Fe的平均含量均高于对照组.对于Cu与Zn,AD组除在顶皮层PtA、梨形-杏仁核皮层区低于对照组外,在皮层其他区域以及丘脑、下丘、海马中均高于对照;AD小鼠脑皮层、海马和下丘脑中的Fe多于对照.试验还发现,脑切片中Cu与Zn的分布地形图有相似性,Fe的分布与Cu、Zn的不同,揭示Cu、Zn有部分共同的运储载体与途径,而Fe的储运途径与之独立.AD诱发的淀粉样蛋白沉聚、血脑屏障通透增大及金属运储载体性能的改变对金属的异常分布起作用.  相似文献
6.
检测了转基因Alzheimer病(AD)模型小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、睾丸组织中Cu、Fe、Zn的含量.结果表明:除肾脏外,AD小鼠各组织中Fe的含量都比对照组的高;骨和脑中的Cu比对照组多,其他组织中的Cu比对照组少;脾、肺中的Zn比对照多,其余组织的Zn均少于对照组.AD对过渡元素分布的影响有性别差异:雄性个体中过渡元素含量异常的组织数目比雌性的多,与正常值偏离的程度也比雌性的严重.在脑切片中,AD个体Cu、Zn、Fe的平均含量均高于对照组.对于Cu与Zn,AD组除在顶皮层PtA、梨形-杏仁核皮层区低于对照组外,在皮层其他区域以及丘脑、下丘、海马中均高于对照;AD小鼠脑皮层、海马和下丘脑中的Fe多于对照.试验还发现,脑切片中Cu与Zn的分布地形图有相似性,Fe的分布与Cu、Zn的不同,揭示Cu、Zn有部分共同的运储载体与途径,而Fe的储运途径与之独立.AD诱发的淀粉样蛋白沉聚、血脑屏障通透增大及金属运储载体性能的改变对金属的异常分布起作用.  相似文献
7.
目的 探讨在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)病理早期采用回神颗粒对转基因AD小鼠的治疗作用。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)法鉴定淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因AD小鼠的基因表型后,选取3月龄雄性转基因阳性PAD小鼠和同龄、同背景的C57BL/6J野生型雌性小鼠作为实验对象。应用Morris水迷宫中逃避潜伏期、穿越平台的次数来评价小鼠的学习记忆能力,苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠脑组织形态学的改变,免疫组化法检测小鼠海马区β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)1-42的表达水平。结果 回神颗粒治疗组小鼠学习记忆能力提高,与模型组比较,小鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多(P<0.05);穿越平台次数与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组大脑海马区Aβ1-42表达阳性面积明显减少(P<0.05)。与正常组相比,模型组AD小鼠大脑海马区Aβ1-42表达阳性面积明显增高(P<0.05)。结论 回神颗粒可显著改善APP/PS1转基因AD小鼠的学习记忆能力,抑制Aβ1-42的过度表达、聚集。  相似文献
8.
阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是一种由脑内淀粉样蛋白(A()聚集引起的,以老年人记忆和认知功能丧失为临床表征的神经退行性疾病。研究表明,A(寡聚体是AD发生发展的主要因素。应用自行筛选出的能够特异识别淀粉样蛋白寡聚体的单链抗体W20基因,构建了以绿色荧光蛋白为报告基因的真核表达载体pSNAV2.0-W20-EGFP,并应用流式细胞分选、蛋白免疫印迹以及荧光显微镜等技术对该单链抗体融合蛋白在真核细胞中的表达进行了初步研究,为针对AD的抗体基因治疗奠定了基础。  相似文献
9.
利用Morris水迷宫探讨Aβ1-10特异性结合肽对Aβ1-42诱导的老年性痴呆大鼠模型空间学习记忆的影响。结果显示,在定位航行试验中,中剂量治疗组的潜伏期和游泳路程较模型组显著缩短(P<0.05);在空间探索任务中,中剂量治疗组在目标象限内游泳路程的百分比显著高于模型组(P<0.05)。表明合适剂量的Aβ1-10特异性结合肽可显著改善老年性痴呆大鼠的空间学习记忆能力。  相似文献
10.
阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种由脑内淀粉样蛋白(A)聚集引起的,以老年人记忆和认知功能丧失为临床表征的神经退行性疾病。研究表明,A寡聚体是AD发生发展的主要因素。应用自行筛选出的能够特异识别淀粉样蛋白寡聚体的单链抗体W20基因,构建了以绿色荧光蛋白为报告基因的真核表达载体pSNAV2.0-W20-EGFP,并应用流式细胞分选、蛋白免疫印迹以及荧光显微镜等技术对该单链抗体融合蛋白在真核细胞中的表达进行了初步研究,为针对AD的抗体基因治疗奠定了基础。  相似文献
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