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1.
牡丹ISSR-PCR反应体系正交优化设计   总被引:12,自引:1,他引:11  
王佳  胡永红  张启翔 《安徽农业科学》2006,34(24):6465-6466,6484
以“凤丹(”Paeonia ostii)基因组DNA为模板,采用正交试验设计方法,研究牡丹ISSR反应体系的影响因素,建立了适合牡丹的ISSR反应体系及程序。10 lμ反应体系为:1×反应缓冲液,2.5 mmo1/LMg2+,0.4 mmo1/LdNTPs,1.0 UTaq聚合酶,0.75μmol/L引物,10~20 ng模板DNA。反应程序为:94℃预变性3 min;94℃变性45 s,45~60(℃不同引物退火温度各异)复性45 s,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸7 min;4℃保存。通过梯度退火试验,确定不同引物的退火温度。  相似文献
2.
蔬菜中4种农药残留去除技术研究   总被引:11,自引:1,他引:10  
以黄瓜为介质,采用正交设计方法,研究了不同处理方法组合对毒死蜱、百菌清、三唑酮和农利灵等4种常用农药残留的去除效果.结果表明,各种处理对黄瓜中4种农药有一定的去除作用,去除率分别为毒死蜱26.61%~77.98%、三唑酮8.10%~62.86%、百菌清75.26%~95.25%和农利灵16.45%~79.45%.以4种农药平均去除率为评价依据,影响去除效果的因素大小依次为添加剂类型>浸泡时间>臭氧处理>漂洗次数,去除方法优化组合为将蔬菜放入2%食醋或食用碱水溶液,用臭氧处理20 min,继续浸泡25 min,用自来水漂洗2次,每次1 min.以该优化的处理组合,测定了不同蔬菜中4种残留农药的去除效果,结果表明,毒死蜱去除率为41.14%~75.71%、三唑酮为36.98%~67.08%、百菌清为22.59%~88.72%和农利灵为29.86%~90.17%;去除率大小为菜豆类>叶菜类>茄果类蔬菜.臭氧对4种农药去除效果的影响次序为农利灵>毒死蜱>三唑酮>百菌清,臭氧处理时密封,去除率均高于敞口的处理,处理方式对结果的影响次序为三唑酮>毒死蜱>农利灵>百菌清.  相似文献
3.
利用正交设计优化白桦的SSR-PCR反应体系   总被引:10,自引:0,他引:10  
利用正交设计L16(45)对白桦SSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶,Mg2 ,模板DNA,dNTP,引物)在4个水平上进行优化试验,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了白桦SSR-PCR反应的最佳体系(20μL):DNA100ng,Mg2 浓度为3mmol·L-1,Taq酶0.5U,dNTP浓度为0.5mmol·L-1,引物浓度为0.4μmol·L-1。对白桦SSR-PCR最佳反应体系进行了梯度退火温度,得到的最佳退火温度为59.9℃。  相似文献
4.
人参组织培养的多因子正交试验研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
采用L9(34)正交设计分析比较了2.4-D,BA,NAA,KT 4种激素浓度及其组合对人参组织培养的影响。经直观分析、方差分析和多重比较进行综合评价,确定人参愈伤组织诱导的最优培养基为MS 2.4-D3 mg/L BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L KT 0.5 mg/L,人参愈伤组织生长的最优培养基为MS 2.4-D 3 mg/L KT 1 mg/L,人参不定芽发生的最优培养基为MS BA 1 mg/L。  相似文献
5.
石榴皮黄酮类化合物的最佳提取工艺   总被引:8,自引:1,他引:7  
陈红梅  丁之恩 《安徽农业科学》2006,34(12):2639-2641
采用正交试验方法,以提取物得率为考察指标,对石榴皮总黄酮提取方法的影响因素进行探讨,并对石榴皮总黄酮提取工艺进行优化。结果表明,石榴皮总黄酮最佳的提取条件为乙醇浓度70%,提取温度80℃,提取时间3h,料液比1∶20,此时黄酮得率为7.525%。  相似文献
6.
芦笋花药培养胚状体诱导条件优化的初探   总被引:7,自引:0,他引:7  
为建立一种效率较高的芦笋花药培养诱导胚状体的机制,实验以TH IELIM F1为试材,利用正交实验设计L16(45)探讨以MS为基本培养基附加NAA、6-BA、2,4-D、蔗糖、谷氨酰胺等五种因素对芦笋花药培养诱导胚状体的影响。结果表明:NAA是影响芦笋花药培养中诱导胚状体的主要因素,其次是6-BA、蔗糖,而2,4-D、谷氨酰胺的影响较弱。芦笋花药培养诱导胚状体的最优组合是0.01 mg/L NAA、2.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L 2,4-D、50 g/L蔗糖、0 mg/L谷氨酰胺。  相似文献
7.
天女木兰组织培养中有效获得无菌外植体的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
为探讨天女木兰组织培养中无菌外植体的有效获得,将天女木兰外植体分为种子和其他3种(侧芽、带侧芽的茎段、顶芽)外植体进行研究.天女木兰种子分为3种不同类型消毒,进行材料污染率、萌发率及成苗率的统计.其他3种外植体(侧芽、带侧芽的茎段、项芽)采用L9(34)正交设计,统计无菌率.结果表明:天女木兰种子消毒时间为4 min的Ⅲ型试材为最适外植体,成苗率可达70%.采用正交设计的3种外植体的最优水平组合为A1B2C3,即外植体为侧芽,消毒剂为0.1%HgCl2,消毒时间为12 min.  相似文献
8.
蝴蝶兰组培不定芽增殖条件的优化   总被引:6,自引:0,他引:6  
以黄花蝴蝶兰的花梗腋芽诱导出的不定芽为外植体,利用正交设计法研究了培养基的无机营养、TDZ、有机添加物和蔗糖4种因素对不定芽增殖的影响。结果表明:蝴蝶兰不定芽增殖的最佳培养基配方为KC TDZ 0.20 mg/L 椰子水200 mL/L 蔗糖14 g/L 柠檬酸30 mg/L,其中有机添加物的种类和浓度对不定芽增殖的影响最大。  相似文献
9.
石蒜属植物种质资源ISSR-PCR反应体系的建立   总被引:5,自引:5,他引:8  
为进一步开展石蒜属Lycoris植物种质资源遗传多样性研究,利用正交试验设计的方法,从Taq酶、Mg2 、模板DNA、dNTP和引物等5因素4水平,对石蒜属植物ISSR(intersimple sequence repeats)反应体系进行优化,确立了石蒜属植物ISSR的最佳反应体系:在20μL反应体系中,含1×Buffer,模板DNA 50 ng,2.5 mmol.L-1氯化镁(MgCl2),0.15 mmol.L-1dNTP,25.05 nkatTaq聚合酶,0.5μmol.L-1引物。进一步进行梯度退火试验,确定最适宜退火温度为57℃。图7表2参23  相似文献
10.
甜槠ISSR-PCR反应体系的正交优化   总被引:4,自引:2,他引:2  
对甜槠Castanopsis eyrei进行遗传多样性研究的过程中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,利用正交设计对Mg2 ,dNTP,引物,Taq酶,牛血清蛋白(BSA)和模板DNA等6种因素5个水平进行筛选和优化。确定甜槠ISSR-PCR最适宜反应体系为:10μL反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol.L-1Tris-HCl,pH 9.0,50 mmol.L-1KCl,10 g.L-1TritonX-100),1.7 mmol.L-1Mg2 ,0.25 mmol.L-1dNTP,8.34 nkatTaqDNA聚合酶,1.5 g.L-1牛血清白蛋白,6 pmol引物,12 ng模板DNA。甜槠扩增时引物UBC846的最适退火温度为56.3℃。图2表1参23  相似文献
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