植物安全转基因技术研究现状与展望

转基因技术是进行基因功能研究和作物遗传改良的重要工具。根癌农杆菌介导转化法和基因枪轰击法是两种主要的遗传转化方法。从1996年首例转基因作物商业化种植以来，2012年全球有28个国家和地区种植转基因作物，种植面积已达1.7亿公顷。随着全球转基因作物的大面积商业化种植，转基因植物的安全性越来越多地受到公众关注。安全转基因技术的研发对于转基因植物的商业化生产具有重要意义。文章详细介绍了目前已报道的安全转基因技术原理及其应用现状。按其作用原理和目的将其分为4类：安全选择标记、标记基因删除及基因叠加、基因漂移防控法和基因定点编辑整合技术。其中，安全选择标记按其筛选原理分为糖代谢相关标记、氨基酸代谢相关标记、激素相关标记和抗逆相关标记。与抗生素和除草剂抗性标记相比，这类标记基因及其表达产物对人和其他生物更安全。标记基因删除及基因叠加技术包括共转化法、位点特异性重组法、转座子法、同源重组法以及基于位点特异性重组的基因叠加技术，其中共转化法又包括农杆菌介导的共转化法和基因枪介导的表达盒共转化法。基因叠加技术为复合性状转基因植物研发奠定了基础，有望成为未来多性状转基因植物研发的重要技术之一。基因漂流防控法包括叶绿体转化法和基因拆分法。基因定点编辑和整合技术包括锌指核酸酶、TALEN和CRISPR/Cas9系统介导的基因定点编辑和整合技术。其中，TALEN和CRISPR/Cas9技术，设计简单，成本低，易操作，靶点分布广泛，有望成为安全转基因研发和应用的重要技术。文章对这些技术原理及其应用现状进行了综述，讨论了其优缺点，并展望了安全转基因技术研发重点和发展趋势。  

R(-)-苄霜灵的合成研究

N (2 ,6二甲苯基 )丙氨酸甲酯经皂化反应后获得N (2 ,6二甲苯基 )丙氨酸。在甲苯和石油醚混合溶剂中 ,用R (+)或S (- )α甲基苄胺作为拆分剂与N (2 ,6二甲苯基 )丙氨酸反应 ,在不同的温度条件下 ,根据结晶速度不同 ,分别获得R (+)或S (- )N (2 ,6二甲苯基 )丙氨酸的非对映体盐。非对映体盐用 10 0g·L-1NaOH水解 ,10 0g·L-1HCl酸化 ,制得旋光性的N (2 ,6二甲苯基 )丙氨酸后用甲醇酯化 ,获得旋光性N (2 ,6二甲苯基 )丙氨酸甲酯。苯乙酰氯与旋光性N (2 ,6二甲苯基 )丙氨酸甲酯缩合 ,最终生成R (- )苄霜灵  

土壤中苯线磷及其转化产物对映体的同时分析

采用QuEChERS预处理技术,结合高效液相色谱拆分,建立了土壤中苯线磷及其转化产物对映体的同时分析方法。苯线磷及其转化产物亚砜和砜单独易于实现手性拆分,但三者手性拆分机制不同(依赖于流动相组成和温度),常规色谱参数优化难以实现它们的同时手性分离。通过向流动相(87%正己烷/13%异丙醇,V/V)中加入微量水(0.02%),实现了三种化合物对映体的基线分离。联合QuEChERS前处理技术,在该色谱条件下,苯线磷及其转化产物各对映体在土壤中[0.05(0.1)、0.5、5 mg·kg-1三个添加水平]的加标回收率和相对标准偏差分别为82.5%～97.4%和2.5%～6.1%,表明该方法可在对映体水平上直接分析土壤样品中的苯线磷及其转化产物。研究结果将为苯线磷的环境转化过程及残留风险评估研究提供测试技术。  

四种手性农药在CHIRALPAK AS-H柱上的直接拆分

采用高效液相色谱手性固定相在CHIRALPAK AS-H柱上对三唑醇、戊唑醇、烯唑醇和顺式高效氯氟氰菊酯4种手性农药进行了直接拆分,同时考察了流动相中极性改性剂醇的种类及含量对手性拆分的影响.结果表明:在室温及0.5mL·min-1流速下,4个手性农药样品均获得基线分离,其中三唑醇的最佳拆分条件为V正己烷:V乙醇=95:5,Rs=2.00;戊唑醇、烯唑醇和顺式高效氯氟氰菊酯的最佳拆分条件均为V正己烷:V异丙醇=90:10,Rs分别为1.40、2.76和1.80.  

用VBA实现医学文献计量中的预处理技术

以中国期刊全文数据库为例，通过VBA简单编程，在Excel文件中对网页检索数据进行行列转换，拆分并提取期刊论文作者、关键词及作者单位等数据，为医学文献计量统计分析做前期处理。  

需求可拆分的车辆路径问题的分段求解

将需求可拆分的车辆路径问题分成两阶段求解，针对单车场、单车型、无时间窗要求、纯装货或纯卸货情况，分别设计了先分组后路径及先路径后分组算法求解．通过实验表明，在成本上，先分组后路径求得的解好于先路径后分组求得的解，且比现有蚁群算法和禁忌搜索算法求得的成本更低，但先路径后分组的方法可以避免一个点的需求被拆分成两次以上满足，求解速度也更快．  

新型直链淀粉手性固定相拆分戊唑醇对映体

采用新型直链淀粉-三(5-氯-2-甲基苯基氨基甲酸酯)涂敷型手性固定相在反相色谱条件下拆分戊唑醇对映体,评价了流动相组成(甲醇/水,乙腈/水)及柱温(5~45℃)对对映体分离的影响。结果表明:以甲醇/水为流动相时,在甲醇含量100%至40%范围内,戊唑醇对映体均无分离趋势;而用乙腈/水为流动相时,在乙腈含量100%至40%范围内,戊唑醇对映体均可实现基线分离;在5~45℃,V(乙腈)∶V(水)=1∶1,对映体的保留因子(k)与分离因子(α)随温度升高而降低,分离度(RS)却先升后降,基于线性Van tHoff曲线的热力学参数证明戊唑醇对映体的分离受焓驱动。  

用Candida lipolytica脂肪酶手性转酯拆分农药中间体rac-1-苯乙醇

比较了不同来源脂肪酶拆分rac-1-苯乙醇的能力,使用Candida lipolytica脂肪酶手性转酯拆分rac-1-苯乙醇制备(S)-1-苯乙醇；优化了C.lipolytica脂肪酶在有机相中手性拆分1-苯乙醇的条件.结果表明,较优条件为以正庚烷为溶剂的反应体系5 mL中含20 mg脂肪酶、0.08 mol·L-1 rac-1-苯乙醇、0.4 mol·L-1乙酸乙烯酯及水活度0.35和反应温度45℃.经优化,转化率从15.97％上升到49.88％,(S)-1-苯乙醇e.e.值从19.00％上升到99.53％.  

脱氢枞胺衍生物及功能性研究

脱氢枞胺是松香重要的改性产品之一.脱氢枞胺及其衍生物在手性拆分、金属离子浮选、表面活性、杀菌、医药、催化等领域有着重要的用途.其特殊的性能和潜在的应用价值已引起广泛关注.对脱氢枞胺的结构、脱氢枞胺成盐衍生物以及脱氢枞胺改性成键衍生物的研究与应用进展进行了综述,并对脱氢枞胺及其衍生物的研究与应用前景进行了展望.  

O,O-二甲基-1-（4-甲氧基苯氧乙酰氧基）乙基膦酸酯对映体的高效液相色谱拆分研究

采用手性固定相高效液相色谱法研究了不同固定相类型、流动相中不同醇改性剂和不同异丙醇含量以及温度对O,O-二甲基-1-（4-甲氧基苯氧乙酰氧基）乙基膦酸酯拆分效果的影响,并初步讨论了它的热力学机理。结果表明：在25℃的直链淀粉-三（-3,5-二甲基氨基甲酸酯）（Chiralpak AD-H）手性柱中,以正已烷∶异丙醇体积90∶10为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长220 nm时,对映体可得到基线分离。