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1.
兔抗甲胺磷多克隆抗体的制备   总被引:14,自引:2,他引:12  
采用水溶性碳化二亚胺法(EDC),将MTR与牛血清蛋白(BSA)、人血清蛋白(HSA)和鸡卵清蛋白(OVA)共价偶联,分别合成免疫抗原MTP-BSA、MTP-HSA和包被抗原甲胺磷-鸡卵清蛋白(MTP-OVA),用合成的免疫抗原对新西兰大白兔进行免疫,制得抗血清经鉴定确证为兔抗MTP多克隆抗体(polyclonal antibody,PAB),效价分别为1:15000和1:12000。  相似文献
2.
六种不同蛋白质载体制备克伦特罗抗血清的比较   总被引:9,自引:0,他引:9  
以偶氮法将β激动剂克伦特罗(CL)连接小鼠血清白蛋白,小鼠IgM(MIM),小鼠全血清(MWS),牛血清白蛋白(BSA),嗜水气单胞菌(AHJ),虾全血清(SWS)。各连接物分别免疫6组小鼠免疫4次后用间接抑制ELISA,间接ELISA检测各组血清特异性和抗CL的效价。结果表明,各组鼠血清均含有抗CL的特异性的抗体;AHJ,SWS,MWS,MSA组血清效价显著高于MIM,BSA组,提示组分复杂的蛋  相似文献
3.
苹果茎沟病毒的分离纯化及血清学检测   总被引:9,自引:0,他引:9       下载免费PDF全文
 从苹果样品中分离到苹果茎沟病毒(ASGV),汁液摩擦接种该病毒可侵染昆诺藜(Chenopodium quinoa)、苋色藜(C.amaranticolor)、心叶烟(Nicotiana glutinosa)、灰藜(C.niurale)、菜豆(Phaseolus vulgaris "pinto")和西方烟(N.accidentalis"37B")。在昆诺藜叶片汁液中,该病毒体外存活期为3d左右(25℃),热钝化点60~65℃(10min),稀释限点10#+(-4)。提纯病毒在-20℃下,存活期为6个月以上。提纯病毒液A260/A280=1.18。病毒粒子呈线状,大小为620~680nm×11~12nm。衣壳蛋白分子量为31.0kD。用提纯病毒免疫大耳白兔,所获抗血清用于检测提纯病毒样品和感染ASGV的昆诺藜叶片,其效价毛细管微量沉淀反应法为1:512,酶联免疫吸附法为1:10#+4以上。用该抗血清可检测出感染ASGV的苹果试管苗和田间生长植株叶片。  相似文献
4.
检测棉花黄萎病菌的间接ELISA法建立与应用   总被引:8,自引:0,他引:8  
棉花黄萎病菌(大丽轮枝菌-VD8)培养液中产生的毒素经纯化后获得电泳纯毒素PLPs,制备PLPs的抗血清,建立了检测棉花黄萎病菌毒素的间接ELISA方法。研究结果显示,PLPs抗血清的效价为1:102400,最低检测为1.56ng。间接ELISA法检测显示,PLPs的免疫抗血清可以与多种棉花黄萎病菌菌株体外培养液,带菌棉籽的培养液,以及病棉的叶脉、叶柄及茎杆的榨取液发生特异性的反应,而与其他致病菌  相似文献
5.
柑桔黄龙病诊断法的研究进展   总被引:8,自引:3,他引:5  
研究柑桔黄龙病的困难,在于它的病原无法人工培养。因此,长期以来对黄龙病的诊断,主要依据典型的黄梢和叶斑驳症状。在柑桔园管理不良,缺乏营养或其它病虫混合为害时,便难依据症状作出正确的诊断。这是造成对黄龙病认识上病的重要手段。但因病原在病树体我较低,分布又不均匀,致电镜的检出率偏低。80年年代,应用兔丝子将黄龙病BLO转到长春花上增殖、提纯、作为抗原、制备了多抗和单抗的血甭,由于多因清的效价很低和单抗  相似文献
6.
用西葫芦作为罗汉果花叶病毒(WMV-2-Luo)的繁殖寄主,通过差速离心和PEG二次沉淀法得到WMV-2-Luo的提纯液,用该病毒提纯液免疫日本大白兔,获得了WMV-2-Luo兔抗血清。经ELISA测定,其效价为1/5 120,以0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.8,含1.5%NaDIECA)作为样品制备缓冲液,用间接ELISA法检测WMV-2-Luo的灵敏度为1/3 200。用此方法检测罗汉果组培苗带毒情况和田间株均获得成功。  相似文献
7.
草鱼肠道内分泌细胞中肽激素的免疫组织化学定位   总被引:6,自引:0,他引:6  
通过过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)免疫组织化学染色方法,用10种哺乳动物激素培育出的抗血清对三尾草鱼肠道中免疫活性内分泌细胞进行了鉴别。与其中6种抗血清起反应的分别是:胃泌素、胰高血糖素样免疫反应物、抑胃肽、亮氨酸脑啡肽,P物质和牛胰多肽免疫活性内分泌细胞。其它4种抗血清在三尾草鱼肠道中没有发现免疫活性反应。草鱼肠道中各种免疫活性内分泌细胞的形态,大多数为开放型,少数为封闭型或兼有两种类型的特点。对6种免疫活性内分泌细胞的分布特点及其在肠道各段的密度进行了比较和讨论。  相似文献
8.
原核表达牦牛朊蛋白的纯化及其活性测定   总被引:5,自引:5,他引:0  
以原核表达的GST-BoPrP(23~242)融合蛋白为抗原,免疫BALB/C小鼠,制备抗牦牛朊蛋白的特异性抗血清。经Western blotting和间接ELISA鉴定,该抗血清可与牦牛重组成熟PrP(23~242)和牛脑组织提取物发生反应,蛋白酶K消化各抗原可消除免疫反应,但不与GST蛋白和E.coli BL21(DE3)的菌体蛋白发生反应,表明该抗血清为抗牦牛重组成熟PrP(23~242)的抗血清,其效价高达1∶12800,并能识别黄牛脑组织中的天然朊蛋白。原核表达的GST-BoPrP(23~242)融合蛋白能有效地刺激免疫动物产生PrP特异性抗体,所制备的抗血清可适用于天然朊蛋白的检测。  相似文献
9.
K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备   总被引:5,自引:1,他引:4  
利用PCR技术,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的K88菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到E.coli表达载体pET28a(+)中,构建了该基因的原核表达载体p8828,导入E.coliBL21(DE3),得到工程菌株。DSD-PAGE分析结果显示,经IPTG诱导,该亚基基因高效表达出重组K88菌毛蛋白,约占菌体总蛋白的30%。用含重组蛋白的凝胶作为抗原,免疫新西兰大白兔,首次制备K88菌毛  相似文献
10.
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