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1.
意大利蜜蜂蛹超氧化物歧化酶提取技术研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
以意大利蜜蜂蛹冻干粉为研究材料,经提取、盐析、浓缩、透析和DEAE纤维素离子交换柱层析等纯化步骤,获得了一种超氧化物歧化酶(SOD)。该酶蛋白结晶呈菱形,PAGE法显示为均一的蛋白谱带。在相同时间内,测定了pH值、温度对该酶活力的影响。结果表明:意大利蜜蜂蛹中SOD在pH值为8.3时,酶活力最高,pH值高于或低于8.3时,酶活力均有明显下降;温度在25℃左右时,该酶活力最高,40℃时保持活力在80%以上,到90℃时没有活力,说明意大利蜜蜂蛹SOD是一种比较耐热的酶,这为SOD的提取提供了新酶源。  相似文献
2.
中华蜜蜂和意大利蜜蜂耐寒性能差异比较   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
【目的】研究中华蜜蜂(Apis cerana cerana,简称中蜂)和意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)体内抗寒系统的组成,为探究中蜂和意蜂耐寒性能的差异提供理论依据。【方法】试验选取室外相同环境条件越冬的中蜂和意蜂各5群,于2015年12月20日每群随机选取蜜蜂立即测定两者的过冷却点、冰点,比较其耐寒性能差异。然后分别测定蜂体游离水、结合水、脂肪、糖原和蛋白质含量以及海藻糖酶的活性。利用高效液相色谱测定血淋巴中山梨醇、海藻糖、甘露醇的含量。在海藻糖的生物合成通路中确定4个重要调控基因,选择β-action和β-肌动蛋白分别作为中蜂和意蜂的内参基因,采用实时荧光定量PCR检测中蜂和意蜂海藻糖4个相关调控基因在越冬期时mRNA相对表达量的差异。【结果】越冬期中蜂和意蜂过冷却点差异显著,中蜂的过冷却点显著低于意蜂(P能。<0.05),但二者冰点没有显著性差异(P>0.05);越冬期中蜂和意蜂蜂体含水量存在显著差异,中蜂体内游离水含量显著低于意蜂(P<0.05),而结合水含量显著高于意蜂(P<0.05);越冬中期蜂体脂肪含量在两蜂种间差异不显著(P>0.05);中蜂和意蜂蜂体和血淋巴蛋白质含量差异不显著(P>0.05);意蜂在越冬期时体内糖原含量明显低于中蜂,并且差异显著(P<0.05);中蜂血淋巴中甘露醇、山梨醇含量接近于意蜂的两倍,海藻糖含量也相对高于意蜂,差异显著(P<0.05);中蜂蜂体和血淋巴的海藻糖酶活性均显著低于意蜂(P>0.05);以中蜂为对照组,实时荧光定量PCR检测意蜂的海藻糖酶基因(Tre-2)和尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGP)表达量明显高于中蜂(P<0.05);而基因Tre-1表达情况相反;海藻糖合成酶基因(TPS)表达量在中蜂和意蜂体内无显著差异(P>0.05)。【结论】与意蜂相比,中蜂能够通过降低体内游离水含量,提高糖原和小分子糖含量,调节海藻糖酶活性和相关基因表达等方式降低体内过冷却点,提高自身耐寒性。  相似文献
3.
意蜂来源的微孢子虫感染对中蜂工蜂血淋巴蛋白的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
为探讨微孢子虫交叉感染对中蜂工蜂血淋巴蛋白的影响,用意蜂来源的微孢子虫经口侵染不同日龄的中蜂和意蜂工蜂,在(30±0.5)℃、60%-80%RH的温箱内,用蔗糖液隔离饲养8 d后,提取工蜂血淋巴,测量其蛋白含量,并对其进行了SDS-PAGE.结果表明:(1)感染微孢子虫的8日龄中蜂及意蜂工蜂的血淋巴蛋白含量均比对照组高;而11、14日龄中蜂工蜂血淋巴蛋白含量均比对照组低.(2)无论感染与否,8日龄中蜂工蜂血淋巴蛋白含量均比同龄意蜂工蜂的高.(3)SDS-PAGE图谱显示,微孢子虫感染主要造成一些蛋白量上的差异.其中47、38、35 ku蛋白可能是8日龄意蜂工蜂感染微孢子虫后出现的特征条带.  相似文献
4.
 【目的】对王浆高产蜜蜂(浆蜂)(A. m. ligustica)和原种意大利蜜蜂(原意)(A. m. ligustica)1、3、6日龄工蜂咽下腺进行蛋白质组研究,揭示咽下腺在此阶段的发育特征。【方法】采用双向电泳方法对浆蜂和原意咽下腺进行蛋白质组研究,通过与已鉴定蛋白功能的咽下腺和蜂王浆蛋白质组图谱比较,推断部分蛋白的功能。【结果】浆蜂咽下腺在3个日龄表达的蛋白数(210、192、230)分别显著的高于原意(169、188、212),两蜂种均在6日龄表达蛋白最多(P<0.05)。浆蜂咽下腺3个日龄表达的共有蛋白数为119个,其中21个蛋白表达量随咽下腺的发育显著上调,14个蛋白显著下调;原意咽下腺3个日龄表达的共有蛋白数为107个,其中15个蛋白表达量随咽下腺的发育显著上调,19个蛋白显著下调(P<0.05)。1日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为145个,其中28个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意,14个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂,浆蜂特有蛋白为65个,原意为24个;3日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为138个,其中31个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意,19个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂,浆蜂特有蛋白为54个,原意为50个;6日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为175个,其中44个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意,25个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂,浆蜂特有蛋白为55个,原意为37个(P<0.05)。与原意相比,浆蜂咽下腺发育3个日龄特有蛋白点总数为72个。从3日龄开始在浆蜂和原意咽下腺的蛋白表达谱中出现大量的王浆主蛋白点。【结论】从工蜂羽化到6日龄这一阶段内,浆蜂咽下腺蛋白表达明显比原意活跃,6日龄是2蜂种表达最为活跃的阶段。咽下腺发育过程中的共有蛋白为咽下腺发育所必需的管家蛋白,但它们的表达模式存在较大差异。不同日龄的特异蛋白表明咽下腺在不同的发育阶段需要不同的蛋白来调控。两蜂种工蜂咽下腺都从3日龄就开始分泌蜂王浆。  相似文献
5.
房宇  李建科 《中国农业科学》2009,42(7):2552-2563
 【目的】比较王浆高产蜜蜂(Apis mellifera L.浆蜂)与原种意大利蜜蜂(Apis mellifera L. 原意)雄蜂卵期3 d发育阶段蛋白质组的特点。【方法】根据双向电泳所得表达谱,对两个蜂种雄蜂卵期发育的蛋白质的种类、等电点、分子量和表达量进行分析。【结果】浆蜂雄蜂卵期所表达的蛋白数(332、377和339)显著的高于相应日龄原意雄蜂卵期3个日龄所表达的蛋白数(283、305和293)(P<0.05),其中在两蜂种3个日龄共同表达的蛋白数为254个。通过雄蜂卵期3 d发育过程蛋白质表达谱的比较,两个蜂种分别检测到274、298 和285个共有蛋白。在这些共有蛋白中,浆蜂雄蜂分别有54、42和47个蛋白的表达量显著高于(P<0.05)原意,18、75和61个蛋白显著低于(P<0.05)原意。同时,浆蜂还检测到58、79和54个特异蛋白,而原种意大利蜜蜂也分别检测到9、7、8个特异蛋白。【结论】浆蜂和原意雄蜂卵期发育的蛋白质组表达谱存在显著差异,但都在2日龄蛋白表达最活跃;两个蜂种雄蜂卵期发育所表达的共有蛋白可能是其发育所必须的管家蛋白,但它们的表达模式存在较大差异,不同日龄的特异蛋白表明雄蜂卵在不同的发育阶段需要不同的蛋白来调控;浆蜂和原意雄蜂卵期表达的特异蛋白是否是与王浆高产相关的功能蛋白,有待进一步的研究。  相似文献
6.
 【目的】对原种意大利蜜蜂(意蜂)和原种意大利蜜蜂的王浆高产品系(浆蜂)工蜂蛹期头部的蛋白质组进行比较,以探明浆蜂和意蜂3个日龄(13、15、17日龄)蛋白质表达调控方面的差异,为阐明蜜蜂发育生物学提供一定理论基础。【方法】采用双向电泳建立浆蜂和意蜂3个日龄蛹期头部蛋白质组表达谱,获得图谱中蛋白质的种类、表达量、等电点和分子量等信息,并通过质谱分析、数据库检索,鉴定部分差异蛋白。【结果】在13日龄蛹头部,浆蜂表达279个蛋白,意蜂表达268个蛋白,浆蜂和意蜂共有蛋白为212个,而浆蜂和意蜂的特异蛋白分别为67个和56个;到15日龄时,浆蜂表达296个蛋白,意蜂为277个,浆蜂和意蜂共有蛋白点为203个,浆蜂特异蛋白点为93个,意蜂特异蛋白点为74个;到17日龄蛹时,浆蜂蛋白质组有340个蛋白点,而意蜂则有279个蛋白点,浆蜂和意蜂共有蛋白点为246个,浆蜂的特异蛋白点为94个,意蜂特异蛋白点为33个。对部分差异蛋白质进行质谱分析后,鉴定出11个蛋白质。对已鉴定蛋白质表达量聚类分析,结果聚为2类:表达量上调的分别是微管蛋白、肌动蛋白88F、ATP合成酶、谷胱甘肽S-转移酶S1、精氨酸激酶、热激蛋白、蛋白酶体2亚基、泡液ATP合成酶催化亚基和转录起始因子5A;表达量下调的蛋白质为过氧化物氧化还原酶2 540。【结论】浆蜂经过蜂王浆高产的选育,表达的蛋白质种类比意蜂增加。随着日龄的增长,大多数与细胞骨架、抗氧化相关和代谢相关的蛋白质显著上调表达,表明工蜂蛹头部的王浆腺和唾液腺等组织在生长发育,新陈代谢加强以及神经系统逐渐重塑。这将对全面理解浆蜂和意蜂蛹期发育规律奠定基础。  相似文献
7.
An investigation on the proteome of drone egg development of native Italian bee (Apis mellifera ligustica Spinola,1806) was carried out in order to prove up the characteristics in protein expression and regulation at egg stage and open out the molecular mechanism of the development. The experiment was carried out by two-dimensional gel electrophoresis. The results showed that there were 200, 242 and 233 proteins in a wide rang of molecular weight (12.42-169.60 kDa) and in a relatively narrow scope of pI (4.50-9.00) detected on day 1, day 2 and day 3, respectively, during the developmental process of the drone egg. Meanwhile, 164 protein spots were resolved at all the images (i.e., the protein was consistently expressed) along with the egg development, among which 7 were significantly up-expressed (P 〈 0.05) and 4 were significantly down-expressed (P 〈 0.05) while 79 had no significant differences (P 〉 0.05). In addition, the specific proteins expressing proteins on day 1, day 2 and day 3 were 11, 18 and 18, respectively. Besides, 17 proteins expressed both on day 1 and day 2 but silenced on day 3, and 43 proteins expressed both on day 2 and day 3 but silenced on day 1, while only 8 proteins expressed both on day 1 and day 3 but silenced on day 2. The results indicate that 2-d-old eggs are at the most active expressional stage in the development of drone egg. The protein expressing at all images suggests that it should be indispensable for drone egg development, but their expression pattern is different. The proteins expressing at a specific age of egg suggest that specific proteins are needed in different developmental stages to regulate. And there are more house-keeping proteins in the developmental process of the drone egg than that of worker egg, and it will provide more targets for gene improvement.  相似文献
8.
Many species of insect egg can be targeted individually or (and) collectively for cryopreservation by vitrification. However, there has been no report on cryopreservation of honeybee eggs by vitrification. In an attempt to define a preliminary procedure of cryopreservation of honeybee eggs by vitrification, queen honeybee born worker eggs (worker eggs) were stored through vitrification in liquid nitrogen up to 1 h, and then post-vitrification survival of the vitrified worker eggs in vitro and their hatching rates during maturation in vivo were observed using microscopic and close visual inspections. The procedure of cryopreservation by vitrification included dechorionation with sodium hypochlorite and permeabilization with isopropyl alcohol; equilibration by addition of loading solution (i.e., 25% vitrification storage solution) and dehydration by gradual replacement of loading solution with vitrification storage solution; cooling in liquid nitrogen vapor right before droplet vitrification in liquid nitrogen; and recovery in liquid nitrogen vapor right after storage in liquid nitrogen, thawing at temperature of thawing medium (5% sucrose in TC 100-insect medium) and rehydration by gradual replacement of vitrification storage solution with rehydration solution (5% fetal bovine serum in TC 100-insect medium). It was found that among the worker eggs experiencing cyropreservation by vitrification, 1.25% of them were successfully passed through the four life stages, viz., egg, larva, pupa, and adult. In summary, it can be inferred that although a majority of worker eggs were dead after cyropreservation by vitrification, a few of them were developed into larvae, pupae, and finally emerged as adults.  相似文献
9.
从越夏期意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)工蜂成虫肠道中分离、纯化、培养,获得9株细菌.通过形态学观察和生理生化特性研究,从9株细菌中鉴定出芽孢杆菌属(Bacillus)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、泛生菌属(Pantoea)、肠杆菌属(Enterobacter).  相似文献
10.
通过人工添加中华蜜蜂王浆来培育江山2号意蜂与法国意蜂的杂交蜂王,并检测了敌敌畏对江山2号意蜂、高加索蜜蜂、营养杂交子一代(F1)和子四代(F4)群势的影响,同时检测了江山2号意蜂、中华蜜蜂、F1代和F4代工蜂对敌百虫、啶虫脒和桃病康的抗性.结果表明:营养杂交意蜂敌敌畏中毒后群势削减率显著低于江山2号意蜂与高加索蜜蜂;营养杂交意蜂F4代对敌百虫的抗性均显著强于中蜂与江山2号.营养杂交意蜂F1代和F4代工蜂对啶虫脒和高剂量的桃病康抗性均显著强于中蜂与江山2号,且F4代显著强于F1代.中意蜂营养杂交的意蜂对敌敌畏、敌百虫、啶虫脒和桃病康等农药的抗性显著增强.  相似文献
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