恩诺沙星曝露下企鹅珍珠贝肠道微生物多样性及优势菌变化规律

【目的】明确恩诺沙星曝露下企鹅珍珠贝肠道微生物群落结构尤其是优势菌的变化规律,为企鹅珍珠贝养殖过程中恩诺沙星的科学用药提供参考依据。【方法】针对3个恩诺沙星浓度(0、5和10 mg/L)共9个企鹅珍珠贝肠道样本中的细菌构建16S rRNA文库,再采用Illlumina高通量测序技术从门和属水平上比较分析各处理组间肠道微生物群落结构和多样性的差异。【结果】从9个企鹅珍珠贝肠道样本中共检测到10个菌门,其优势菌门分别是变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)、螺旋体门(Spirochaetae)、蓝藻门(Cyanobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes);共检测到79个菌属,优势菌属主要包括弧菌属(Vibrio)、发光杆菌属(Photobacterium)、嗜冷菌属(Psychrilyobacter)、假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)、疏螺旋体属(Borrelia)、交替单胞菌属(Alteromonas)、微拟球藻属(Nannochioropsis-oceanica)、弓形杆菌属(Arcobacter)、Thalassotalea、Amphritea、Tenacibaculum和微小杆菌属(Exiguobacterium)等。不同恩诺沙星浓度处理下,企鹅珍珠贝肠道的优势菌门与菌属种类丰度差异明显。经恩诺沙星处理后,企鹅珍珠贝肠道变形菌门相对丰度显著升高(P0.05,下同)、拟杆菌门相对丰度显著降低;弧菌属相对丰度显著升高,微拟球藻属、Aquibacter、BD1-7_clade及希瓦氏菌属(Shewanella)相对丰度则显著降低;此外,弓形杆菌属相对丰度经10 mg/L恩诺沙星处理后显著升高,Psychrobium相对丰度经5 mg/L恩诺沙星处理后显著升高。【结论】经恩诺沙星处理后企鹅珍珠贝肠道微生物的多样性与丰度发生明显变化,且肠道微生物中一些具有特殊功能的优势菌群结构比例也发生变化,该变化规律可为企鹅珍珠贝养殖过程中科学使用恩诺沙星提供参考依据。     

恩诺沙星对肉仔鸡胫骨发育的影响

为了探究氟喹诺酮类药物恩诺沙星对禽类胫骨发育的影响,以恩诺沙星为研究对象,选取雄性肉鸡鸡雏,随机分成5组,分别为空白组、10 mg/kg体重组、30 mg/kg体重组、60 mg/kg体重组、100 mg/kg体重组,每组36只,于1日龄和7日龄进行相应的给药处理,在7、14、21、28、35、42 d每组随机抽取6只肉鸡,称取胫骨鲜重,量取胫骨长度,骨密度仪测量胫骨密度,胫骨干重,茂福炉550℃高温灰化后得灰分含量,紫外分光光度法测胫骨磷含量,EDTA钙滴定法测胫骨钙含量,评价胫骨发育情况。结果表明,至出栏前恩诺沙星对于肉仔鸡胫骨发育的影响各组之间差异不显著。     

恩诺沙星对大肠杆菌突变耐药菌产生和富增影响的研究

耐药性是细菌适应性进化的结果,不合理的给药方案将导致耐药菌的过快增长,为了明确给药方案在突变耐药菌产生和富增上所发挥的作用,本试验利用体外药动模型研究了恩诺沙星不同给药方案对大肠杆菌突变耐药菌产生和富增的影响,结果表明,在药物消除半衰期和给药间隔相同的情况下,如果药物不能杀灭全部的病原菌,则给药浓度越高,耐药菌出现越早,且耐药强度越高。在药物浓度和给药间隔相同的情况下,药物消除越快,就更早地富集出耐药菌。耐药菌的耐药强度随着用药时间的延长而增强,且有阶梯增强的表现。在药物浓度高到一定值时,细菌会被全部杀死。且即使再提高药物浓度,也不能再加快杀灭细菌的速度。分析认为,给药方案和药动学特征对耐药菌的产生和富集都可能产生影响,这可能涉及很多复杂的细菌进化机制,需要进一步研究。     

黄河鲤嗜水气单胞菌的分离、毒力及用药分析

自发病黄河鲤4种组织中分离致病菌,结合形态学和16SrDNA序列分析,发现分离到的细菌属气单胞菌属。回归感染试验发现,患病鱼体出现鳃盖等多处组织出血且伴随肠炎等症状,表明引起黄河鲤发病的致病菌为嗜水气单胞菌,命名为HNAh01。半致死密度测定发现,嗜水气单胞菌HNAh01的半致死密度为1.38×10~7 cfu/mL。药敏结果表明,该致病性嗜水气单胞菌是典型的多重耐药嗜水气单胞菌,但对恩诺沙星极为敏感。因此,选择恩诺沙星对分离菌株进行体外药效学和用药分析试验。药效学试验表明,恩诺沙星对嗜水气单胞菌HNAh01的最小抑菌质量浓度为1.56ng/mL,最小杀菌质量浓度为3.12ng/mL,防耐药突变质量浓度为12.5ng/mL,耐药选择窗的范围为1.56~12.5ng/mL。用药分析结果显示,黄河鲤口服剂量为10mg/kg时对嗜水气单胞菌HNAh01的相对保护率达83%。本文研究为嗜水气单胞菌的防治提供了理论基础与实践依据。     

抗生素恩诺沙星及其浓度对猪精液品质的影响

恩诺沙星为广谱抗生素,具有较强的杀菌作用。将其加到猪精液常温保存稀释液中,能延长精子的存活时间,对猪精液的保存效果优于青霉素等抗生素。试验还考察了其浓度对猪精液品质的影响。     

抗恩诺沙星噬菌体单链抗体库的构建及鉴定

本研究以兽药恩诺沙星为对象,构建噬菌体抗体库,为低成本、快速制备目的抗体提供新的途径。以恩诺沙星-鸡卵清蛋白(ENR-OVA)为免疫原对Balb/c小鼠进行免疫,取其脾细胞提取总RNA,并分别扩增全套抗体轻、重链基因,通过重叠延伸PCR技术,以编码柔性多肽(Gly3Ser)4的基因为接头,将轻重链基因组装为完整的scFv基因,将之克隆入pCANTAB5E载体,转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体M13KO7对其进行超感染,构建噬菌体抗体库并进行富集、筛选和鉴定;构建了库容量约为2.2×106的抗恩诺沙星噬菌体单链抗体库,并筛选出26株阳性克隆,为表达单链抗体、建立免疫检测方法奠定基础。     

2010年苏北地区淡水养殖主要病害防治方法

2010年的低温阴雨天气相比往年的时间较长,从3月份到6月底之前,天气一直处于低温阴雨的状况,气温始终低于25℃,很少有阳光。由于长期的低温阴雨天     

鹅副黏病毒病防治技术

湖南省宁乡县黄材镇范某,分2批从外省共引进了鹅苗3000羽,第1批鹅苗生长好,但第2批鹅苗引进后的第34天,鹅苗便出现了减食,饮水增加,拉灰白色稀便,后期拉水样血便和绿色稀便,并感染了第1批鹅苗。乡村兽医诊断为大肠杆菌引发的腹泻,先后采取肌肉注射恩诺沙星、拌饲硫酸安普霉素等,没有收到效果,反而出现了成批死亡。后来经笔者仔细剖检和试剂诊断为鹅副黏病毒病,采取饮服诺感素(主要成分为金丝桃素、绿原酸等)和对症治疗,1周后病鹅逐渐恢复。鹅副黏病毒病是近年来新发现的一种以拉灰白色稀便、肠道     

酶联免疫吸附法测定畜禽组织中恩诺沙星的残留量

利用抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合,测定畜禽组织中恩诺沙星的残留量。结果表明,该检测方法简便、快速、灵敏。     

中草药延缓嗜水气单胞菌对恩诺沙星耐药性的研究

为了延缓主要淡水养殖病原菌——嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的耐药性,以嗜水气单胞菌ATCC 7966为出发菌株,评价了其对恩诺沙星、氟苯尼考、盐酸多西环素、复方硫磺间甲氧嘧啶钠和硫酸新霉素等抗菌药物的敏感性;并以恩诺沙星为受试药物,对ATCC7966进行低浓度耐药性诱导,获得最小抑菌浓度(MIC)提高了256倍的耐药性菌株。测定了茉莉花、薄荷叶、连翘等26种中草药对嗜水气单胞菌耐药性的延缓作用,结果表明:板蓝根、射干、苦参、大青叶、车前草、连翘、黄芩及艾草8种中草药均具有延缓嗜水气单胞菌对恩诺沙星耐药性的作用,其中,连翘延缓耐药性的作用最为明显。复筛实验结果表明,经过20代接种后,连翘实验组的耐药性只上升了2倍(对照组上升了16倍)。