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1.
构建具有EGFP标签的抑癌基因p53表达载体,并验证其对肺癌细胞A549的影响。以质粒pcDNA3.1-p53为模板,设计引物并进行PCR扩增获得目的基因p53,将获得的目的基因克隆至载体pcDNA3.1-EGFP上,用琼脂糖凝胶电泳检测目的条带,双酶切以及测序验证。将克隆好的载体,利用脂质体法转染A549细胞,荧光显微镜下观察,同时用MTT法测不同时间段细胞OD值。结果表明,琼脂糖凝胶电泳结果显示,目的基因扩增成功。双酶切及DNA测序结果均证实,成功构建了载体pcDNA3.1-EGFP-p53。转染A549细胞后,荧光显微镜下观察到绿色荧光。MTT法测定结果表明,目的基因转染的A549细胞组所测得的OD值明显低于对照组(p0.01)。因此,具有EGFP标签的抑癌基因p53表达载体pcDNA3.1-EGFP-p53构建成功,转染A549细胞后,对A549细胞具有一定抑制作用。为后续继续研究p53-MDM2生物发光能量共振转移作用奠定了基础。 相似文献
2.
为筛选出适于红禾麻扦插繁殖的外源性生长调节剂类型与处理方法,提高红禾麻扦插成活率。以红禾麻新鲜中部茎条为试材,研究了3种生长调节剂(IAA、IBA、NAA),4种浓度梯度(0(CK)、50、100、150、200mg·L~(-1))与4个时长梯度(1、2、3、4h)对其扦插繁殖的影响。处理后经45d生长,观察记录其生根率、根数、根长、根系效果指数、叶片数、新茎数、新茎长等生长指标,并进行多重比较与主成分分析。结果表明:3种生长调节剂的不同浓度对红禾麻扦插繁殖的各指标均显著优于CK。但3种生长调节剂的不同浓度处理对红禾麻扦插繁殖的影响有一定差异。生根数随处理时间的增加而上升,但各处理间差异较小,生根数表现为NAA 200mg·L~(-1) 4hIAA 200mg·L~(-1) 4hIBA 200mg·L~(-1) 4h;根系效果指数随3种生长调节剂浓度(50~200mg·L~(-1))增加均呈显著上升趋势;主成分分析结果显示,NAA 200mg·L~(-1) 4h综合得分最高,为1.583 8,排序第一,CK综合得分最低,为-2.915 5。因此,NAA 200mg·L~(-1) 4h较利于红禾麻扦插繁殖。 相似文献
3.
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9.
目的 探讨不同浓度碘乙酸钠对家兔早期膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)模型的诱导及病理改变,确定建立OA模型的最小有效药物浓度。方法 将36只新西兰大白兔随机分为正常(A)组、模型(B~F)组,共6组,每组6只。A组左膝关节腔注射0.2 mL无菌生理盐水;B~E组左膝关节腔按照2.5、5、7.5、10 mg/kg剂量各注射0.2 mL的碘乙酸钠溶液,F组注射剂量与E组相同,同时以30 min/d分2次驱赶运动为干预因素。建模14 d后,采用HE染色及骨性关节炎组织病理学评分(Mankin评分)观察各组软骨的病理改变。结果 Mankin评分与A组相比,B、C组差异无统计学意义(P>0.05),D、E、F组差异有统计学意义(P<0.05);与E组比较,F组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 模型D组药物浓度7.5 mg/kg为建立OA模型的最小有效药物剂量,且模型建立方法操作简单、创伤小,能够保证膝关节稳定性及实验动物的成活率。 相似文献
10.
[目的]对黑骨藤不同极性部位进行急性毒性试验及抗氧化研究,确定其临床用药安全性及活性部位。[方法]急性经口毒性试验采用SD(180~220 g)大鼠,连续灌胃给药7 d(9.75 g/kg)后,测定血清中的肝功能和肾功能等相关指标,观察其肝脏、肾脏毒性反应,采用ABTS(agreement of basic telecommunications services)法测定肝脏中的总抗氧化能力。[结果]黑骨藤不同极性部位给药7 d后,大鼠未出现死亡,石油醚部位、氯仿部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位组对肝脏和肾脏生化指标均无显著性影响(P>0.05),水部位组大鼠血清中的ALP和BUN显著升高(P<0.05)。[结论]黑骨藤的不同极性部位中的石油醚部位、氯仿部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位未出现毒性反应,水部位中的ALP和BUN升高,可能表现出微低毒性。氯仿部位和正丁醇部位表现出较强的抗氧化能力。 相似文献