具杀虫活性雷公藤内生菌的分离与筛选

以卫矛科植物雷公藤的根、茎、叶为材料分离得到内生菌183株,其中真菌111株,放线菌23株,细菌49株。雷公藤植株的不同组织部位的内生菌数量有较大的差异,雷公藤根中分离得到的内生菌最多(89株),占总数的48.63%,叶部次之(72株),占总数的39.35%,茎部分离得到的内生菌最少(22株),占总数的12.02%。以卤虫、蚊幼及蚜虫为试虫,对183株内生菌的杀虫活性进行筛选,得到3株对蚜虫具有较高毒杀活性的菌株。其中菌株11-6-76的胞内和胞外代谢物均具有较高的杀蚜活性,蚜虫的死亡率分别为78.64%和70.75%;菌株11-3-37和12-2-47的胞内代谢产物提取物对蚜虫的毒杀活性较高,蚜虫死亡率分别为82.74%和76.97%。菌株11-3-37、11-6-76和12-2-47胞内代谢产物粗提物对蚜虫的LC_(50)分别为34.8mg/mL、31.2mg/mL和46.4mg/mL。     

渗透压对嗜线虫致病杆菌YL001生长及抑菌活性物质产生的影响

【目的】研究渗透压对嗜线虫致病杆菌（Xenorhabdus nematophila）YL001菌体生长、抑菌活性及抑菌活性物质产生的影响，为进一步提高YL001抑菌活性及开发利用奠定基础。【方法】以NaCl为渗透压调节剂，分别测定NaCl质量浓度为0，5，10，20，30和40 g/L条件下，X.nematophila YL001不同时间段细胞生长量、pH、还原糖变化；采用琼脂扩散法、生长速率法及活体组织法测定了YL001发酵液的抑菌活性；同时采用HPLC及LC-MS分析了甲醇提取物中酰胺类化合物（Nematophin）与水溶性苯并芘类化合物（Xenocoumacins，包括XCN1和XCN2)含量差异。【结果】在NaCl质量浓度为0，5 g/L时，YL001细胞生长最适且无显著差异，吸光值分别达0.63，0.62，随着NaCl质量浓度的进一步增大细胞生长量显著下降；在NaCl质量浓度为0，5，10 g/L时，YL001发酵液对苏云金芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、猕猴桃溃疡病菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用较好且无显著差异，随着NaCl质量浓度的进一步增大抑菌作用显著降低；在NaCl质量浓度为0，5 g/L时，YL001发酵液对水稻稻瘟病菌、番茄灰霉病菌、苹果树腐烂病菌、苹果轮纹病菌、苹果炭疽病菌、水稻纹枯病菌、油菜菌核病菌的抑制率均高于80%且均无显著差异，明显优于其他较高NaCl质量浓度的处理；在NaCl质量浓度为0，5，10 g/L时，YL001发酵液对番茄灰霉病的治疗作用较好且无显著差异，在NaCl质量浓度为0，5 g/L时，对番茄灰霉病的保护作用较好且无显著差异，治疗作用和保护作用均随着NaCl质量浓度的进一步增大而显著下降；甲醇提取物中抑菌活性物质Nematophin含量、XCN1的相对含量随NaCl质量浓度的增大显著下降，如NaCl质量浓度为0 g/L时，甲醇提取物中抑菌活性物质Nematophin含量、XCN1的相对含量较NaCl质量浓度为40 g/L时分别提高7.82和27.55倍；XCN2的相对含量在NaCl质量浓度为5 g/L时最高，显著高于其他处理。【结论】低渗透压时有利于X.nematophila YL001菌体生长、抑菌活性提高及抑菌活性代谢产物Nematophin、Xenocoumacins的产生。     

柠檬油微乳剂研制及对圣女果的采后保鲜效果研究

以圣女果为试材,研究了15%柠檬油微乳剂对圣女果浸泡处理后常温贮藏下的保鲜效果。通过对表面活性剂和助表面活性剂的筛选,确定了15%柠檬油微乳剂的配方。经冷、热贮稳定性,稀释稳定性检测,其质量检测结果合格,符合国家有关农药加工标准。效果评价结果显示,柠檬油微乳剂对圣女果有明显的保鲜作用,处理15d后,坏果率为14.13%,分别比1-MCP和空白对照处理下降了40.56%和62.89%,可显著延缓圣女果可溶性固形物、有机酸和维C含量的下降,货架期可达到7d。柠檬油微乳剂有进一步开发为商品果蔬保鲜剂的潜力。     

金合欢醇和烟碱对苹果黄蚜联合毒杀作用

以苹果黄蚜Aphis citricolavander Goot为试虫，对金合欢醇和烟碱的联合杀蚜活性进行了测定，以期为开发植物源杀蚜剂产品奠定基础。室内毒力测定采用微量点滴法；田间药效试验参照国家标准进行。金合欢醇和烟碱混用具有明显的杀蚜增效作用，在最佳质量配比（金合欢醇:烟碱=4.82:1）下，共毒系数（CTC）达151.63；经过对溶剂、表面活性剂等助剂的筛选，研制出6%烟碱·金合欢醇可溶液剂，配方为金合欢醇（5%）、烟碱（1%）、表面活性剂（10%）、溶剂（84%），质量检测符合可溶液剂国家质量标准；田间药效试验表明，以126.0 g a.i./hm²常量喷雾，药后7 d对小麦上的麦长管蚜Sitobion avenae Fabricius和麦二叉蚜Schizaphis graminum（Rondani）混合种群的防效达87.80%，以115.5 g a.i./hm²常量喷雾，药后7 d对苹果黄蚜的防效在81%以上。可见，金合欢醇和烟碱复配具有显著的杀蚜增效作用，具有进一步开发潜力。     

3种植物精油熏蒸处理对油桃保鲜效果的影响

为探明香榧假种皮精油、枇杷叶精油和佛手精油熏蒸处理对采后油桃的保鲜效果,以中油四号油桃为试材,采用密闭容器熏蒸法研究3种植物精油对油桃采后主要致病菌的抑制作用及对其感官品质、生理生化的影响。结果表明,香榧假种皮精油可有效抑制灰霉病菌、根霉病菌菌丝的生长,其EC50值均低于枇杷叶精油和佛手精油处理,分别为81.672μL·L~(-1)和209.131μL·L~(-1)。在200μL·L~(-1)浓度下,与枇杷叶精油和佛手精油处理相比,香榧假种皮精油熏蒸处理可有效降低油桃采后的腐烂,于25℃贮藏10 d后腐烂指数较对照降低了63.73%,并且仍能较好地维持失重率和硬度,诱导果实中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)活性的升高,抑制丙二醛(MDA)含量的积累,对果实可溶性固形物(SSC)、可滴定酸(TA)和抗坏血酸(Vc)含量等指标均无明显影响。综上所述,香榧假种皮精油熏蒸处理能够抑制采后油桃品质的下降,延缓后熟衰老和腐烂发生,具有进一步开发成果蔬保鲜剂的潜力。     

5种植物源农药对假眼小绿叶蝉的田间药效

假眼小绿叶蝉是小绿叶蝉的优势种群,也是陕西茶叶主要的害虫之一。笔者研究了0.6%苦参碱水剂、1.3%苦参碱水剂、1.5%除虫菊素水乳剂、茶蝉净和0.5%藜芦碱可溶性液剂等5种植物源农药对假眼小绿叶蝉的田间防效。结果表明,0.6%苦参碱水剂、1.3%苦参碱水剂和1.5%除虫菊素水乳剂3种药剂对假眼小绿叶蝉几乎无防治效果。茶蝉净和0.5%藜芦碱可溶性液剂对假眼小绿叶蝉表现出了良好的防效,施药1 d后的防效分别为57.0%和32.4%,施药3 d后的防效分别为63.2%和60.2%,施药7 d后的防效分别为86.9%和70.6%。研究结果为田间防治茶叶主要虫害假眼小绿叶蝉提供了新的药剂选择。     

初始pH对嗜线虫致病杆菌YL001菌株抑菌活性及代谢的影响

【目的】研究初始培养pH对Xenorhabdus neamatophila YL001发酵液抑菌活性的影响,为进一步提高YL001的抑菌活性提供理论依据。【方法】采用生长速率法、琼脂扩散法、活体组织法,分别测定了初始pH 4.5,5.5,6.5,7.0,7.5和8.5培养条件下,X.neamatophila YL001发酵液及其乙酸乙酯提取物的抑菌活性;同时采用HPLC、LC-MS分析了乙酸乙酯提取物中代谢物的差异。【结果】随着初始pH的升高,共生菌发酵液及其乙酸乙酯提取物的抑菌活性也逐步提高。pH8.5时,YL001发酵液对水稻瘟疫病菌(Magnaporthe grisea)、辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甘蓝黑斑病菌(Alternaria brassicae)以及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)均具有最强的抑制作用,发酵液乙酸乙酯提取物对番茄灰霉病的EC50为1.29mg/mL,对枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径为14.65mm。随着初始培养pH的升高,YL001发酵液及乙酸乙酯提取物对番茄灰霉病的治疗和保护作用也逐渐提高,保护作用明显优于治疗作用。HPLC和LC-MS代谢分析表明,pH8.5、pH 7.0及pH 4.5培养条件下发酵液乙酸乙酯提取物中代谢物含量存在显著差异。【结论】初始培养pH可以显著影响X.neamatophila YL001的抑菌活性及代谢能力,碱性条件更有利于活性物质的产生及其稳定性的保持。     

苦杏仁精油对家蝇的触杀活性研究

[目的]研究含HCN和去HCN的苦杏仁精油对家蝇的触杀活性，为苦杏仁精油作为卫生害虫杀虫剂提供依据。[方法]采用“点滴法”测定含HCN和去HCN的苦杏仁精油对家蝇的触杀活性。[结果]2种苦杏仁精油对家蝇有很强的触杀活性，触杀活性随着处理时间的延长而增强，且去HCN的苦杏仁精油的杀虫活性高于含HCN的苦杏仁精油。[结论]苦杏仁精油对家蝇具有很强的触杀活性．可作为卫生害虫杀虫剂加以开发利用。     

雷公藤中雷公藤甲素、雷公藤吉碱和次碱的高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析方法

建立了一种高效液相色谱-电喷雾串联质谱法 (HPLC-ESI-MS/MS) 测定雷公藤提取物中雷公藤甲素 (triptolide)、雷公藤吉碱 (wilforgine) 和雷公藤次碱 (wilforine) 3种活性物质的分析方法，比较了雷公藤不同植株部位和不同组织培养产物中3种活性物质的含量差异。分别采用回流和超声两种方法提取。回流提取中，样品经V (甲醇) : V (乙腈) = 1:1溶液回流，采用Supelclean LC-Si固相萃取小柱净化；超声提取中，样品经乙醇超声，用OASIS HLB固相萃取柱净化。采用C₁₈色谱柱分离，乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱，采用HPLC-ESI-MS/MS测定。结果显示:在雷公藤植株中，雷公藤甲素含量最高的是不定根，发状根、根皮中含量次之，茎、叶中含量很少；雷公藤次碱含量最高的是发状根，其次是根皮，叶中未检测出；发状根和根皮中雷公藤吉碱的含量相当。在0.01~2 mg/kg添加水平下，3种活性物质的回收率在81%~109%之间，相对标准偏差 (RSD) 为0.4%~1.8% (n = 5)。检出限在0.08~0.12 μg/mL之间。该方法可以准确、快速地对雷公藤提取物及其产品进行质量监控。     

高效液相色谱法检测苦参碱在小白菜及土壤中的残留与消解动态

通过一年两季(春季和冬季)的田间试验,采用C18固相萃取-高效液相色谱分析方法,研究了苦参碱在小白菜及土壤中的残留和消解动态。方法验证试验表明:在0.02~0.5mg/kg添加水平下,苦参碱在小白菜和土壤中的平均回收率为71%~87%,相对标准偏差为5.7%~14%,在小白菜与土壤中的定量限(LOQ)均为0.02mg/kg。消解动态试验结果表明:苦参碱在小白菜及土壤中的消解过程均符合一级动力学方程,消解半衰期分别为1.0d(春季,小白菜)、1.5d(冬季,小白菜)、1.4d(春季,土壤)和1.6d(冬季,土壤)。最终残留结果显示:距最后一次施药7d后,高浓度(有效成分6.71g/hm2)和低浓度(有效成分4.47g/hm2)苦参碱在春季和冬季小白菜中的最终残留量在0.061~0.074mg/kg之间;在土壤中的最终残留量在未检出~0.075mg/kg之间。可见,苦参碱在小白菜及土壤中易消解,为保障小白菜食用安全,建议可将0.1mg/kg作为其最大残留限量,安全间隔期不小于3d。