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本研究采用农杆菌侵染法成功实现玄参花叶病毒(FMV)34S启动子控制下的氧物歧化酶基因对巴西橡胶树(Hevea Brasiliensis Muell.Arg)的遗传转化。来自巴西橡胶无性系RRⅡ105未成熟花药的愈伤组织用含有双元质粒载体的根癌农杆菌菌株EHA 101进行转化。该双元载体带有用作选择标记的新霉素磷酸转移酶(nptⅡ)基因及β-葡糖醛酸酶(GUS)报告基因,同时含有带FMV 34S启动子的Mn-超氧物歧化酶(Mn-SOD)目的基因。试验中采用含4.5μM 2,4-D,2.2μM BAP,以及1.1μM NAA的MS培养基筛选并增殖抗卡那霉素的GUS阳性愈伤组织,并利用附加1.5μM BAP,1.4μM KIN,1.1μM NAA,以及2.0μM GA_3的MS培养基诱导高频体胚发生。用于胚胎成熟的培养基为附加1.2μM GA_3及1.5μM TDZ(噻苯隆)的改良MS培养基。试验结果显示,成熟的转化胚胎中有20%发育成小植株。这些小植株经健化之后被移植到营养袋中并置于温室中继续培育生长。最后,本研究通过用SOD及nptⅡ特异性引物作PCR扩增以及用nptⅡ特异性探针与分离自转化植株的DNA模板进行Southern杂交进一步证实了转化事件的发生。 相似文献
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采用离心、层析和电泳等方法研究了多粘芽胞杆菌T1163在红麻干皮、鲜皮和鲜茎三种材料和振荡、静置两种发酵体系中分泌的脱胶酶种类,结果表明红麻专用脱胶菌株T1163在脱胶过程中至少产生9种脱胶酶(和亚基),其中分子量为70800D、61600D、60000D、51200D、43000D、41700D和33500D的七种酶在两种体系中共同存在,分子量为56300D和28800D的两种酶分别只存在于振荡、静置系。不同酶在脱胶过程中产生的时间、速度和数量随红麻材料和发酵方式的不同存在不同程度的差别。 相似文献
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采用离心、层析和电泳等方法研究了多粘芽胞杆菌 T1 1 6 3在红麻干皮、鲜皮和鲜茎三种材料和振荡、静置两种发酵体系中分泌的脱胶酶种类 ,结果表明 :红麻专用脱胶菌株 T1 1 6 3在脱胶过程中至少产生 9种脱胶酶 (和亚基 ) ,其中分子量为 70 80 0 D、6 1 6 0 0 D、6 0 0 0 0 D、5 1 2 0 0 D、430 0 0 D、41 70 0 D和 335 0 0 D的七种酶在两种体系中共同存在 ,分子量为5 6 30 0 D和 2 880 0 D的两种酶分别只存在于振荡、静置系。不同酶在脱胶过程中产生的时间、速度和数量随红麻材料和发酵方式的不同存在不同程度的差别。 相似文献
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橡胶树新种质抗寒性综合评价 总被引:1,自引:0,他引:1
受抗寒种质材料缺乏的影响,我国橡胶树抗寒高产新品种选育工作进展缓慢。为了深入全面地鉴定橡胶树新种质的抗寒性,加速新种质在抗寒高产新品种选育工作的利用,采用人工气候室模拟低温胁迫下测定53份橡胶树新种质的超氧化物歧化酶(SOD)活性、可溶性糖含量、丙二醛(MDA)含量、自由水/束缚水比值、电解质渗出率,结合田间鉴定寒害平均级等6个指标,运用隶属函数法对其抗寒性进行综合评价。结果表明,2853号等48份种质的平均隶属函数值超过对照93-114,表现出了较强的抗寒性,抗寒性低于对照的只有116号等5份种质。 相似文献
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