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1.
以振荡摇瓶培养法培养17株球孢白僵菌(Beauveriabassiana),分析其总胞外蛋白酶和几丁质酶的产生水平,同时用这些菌株的分生孢子粉作为样品,用人工饲养的亚洲玉米螟5d龄幼虫作为试虫,作毒力生物测定。并分析各个因素之间的相关性,验证各个酶活性指标作为毒力的生物测定的替代或者补充指标的可能性。结果表明,菌株间同代毒力、酶活之间的差异比较大,LT50的变化范围为4.82~10.06d,胞外蛋白酶活性的变化范围是0.86×10-2~3.66×10-2IU/mL,胞外几丁质酶活性的变化范围是0.012~1.47IU/mL。将后二者分别与各个菌株对玉米螟的LT50进行回归分析,结果发现胞外蛋白酶活性和胞外几丁质酶活性以及测定胞外蛋白酶活性时的干物质增重3个指标,与感染的亚洲玉米螟幼虫的死亡率及LT50的相关性都不显著,不能作为对亚洲玉米螟毒力的生物测定的替代或补充指标。  相似文献
2.
以从水稻根部分离到的1株解淀粉芽孢杆菌WH1为材料,通过红外吸收光谱对其发酵液中的抗菌活性物质进行了鉴定,并通过平板抑制试验和离体叶片防治试验,研究其发酵液对油茶炭疽病的抑制作用.结果表明:WH1发酵液中的抗菌活性物质为脂肽,该成分能够使油茶炭疽病菌丝畸形,高稀释倍数的发酵液对离体油茶叶片上的炭疽病仍然有显著的防效.以WH1作为防治油茶炭疽病的生物农药,通过Plackett-Burman设计和田口设计对WHH1的发酵条件进行了优化,使抗菌脂肽产量大幅上升.在3、20、500 L的发酵罐上进行放大,控制溶氧在30%以上,成功的完成250mL摇瓶到500 L罐的放大.500 L罐上培养48 h后发酵液10倍稀释液在PDA平板上的抑菌率为50.8%,对发酵液进行喷雾干燥后药效存留率为86.2%.  相似文献
3.
以豆科植物百脉根为材料,构建了AD-cDNA表达文库。其库容量达到每3μg DNA 2×106酵母转化子,空载率为12.5%,平均片段长度为1.5 kb。以百脉根结瘤因子受体激酶基因1(nod factor receptor kinase,NFR1)蛋白激酶结构域的DNA片段(NFR1-PK)为诱饵,利用酵母双杂技术,筛选与NFR1相互作用的基因。结果在含X-gal的四缺选择性培养基上筛选到120个克隆。经质粒抽取、PCR鉴定、回转酵母验证得到80个阳性克隆。对26个确定阳性克隆的外源片段进行测序和同源性分析,通过NCBI数据库比对分析鉴定含有JAB1、AT-RICH结构域等4个与NFR1-PK相互作用的不同基因。通过半定量RT-PCR观察在百脉根中这些基因的表达情况,其结果可为进一步研究NFR1基因的功能和调控机制提供材料。  相似文献
4.
泉古菌Sulfolobus islandicus中PCNA有3个同源类似蛋白,本研究选取PCNA1作为研究对象,为获得可溶性表达的PCNA1蛋白,制备多克隆抗体,深入了解PCNA1基因的功能,将PCNA1基因片段克隆到组氨酸标签融合的表达载体pET30a中,利用IPTG诱导,金属螯合亲和层析进行纯化分析表明,融合蛋白大部分可溶。紫外分光光度法测定纯化蛋白的纯度可达90%以上,浓度约为2 mg/mL。免疫家兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗血清效价可达1∶10 000以上,Western印迹检测证明抗体特异性良好。  相似文献
5.
油菜花粉黄酮的提取与纯化   总被引:2,自引:0,他引:2  
对油菜花粉黄酮的提取与纯化工艺进行了系统的研究.结果表明,在95℃水浴条件下,按1∶35的固液比加入95%乙醇提取2 h为最佳,破壁花粉黄酮得率3.167%,较未破壁花粉提高了50.6%;8种大孔树脂中DM-130型树脂为纯化的最适树脂,在最佳上样量16.78 mg,并用最佳洗脱液50 mL 50%乙醇洗脱的情况下,产品黄酮纯度达到60.5%.  相似文献
6.
在苏云金芽胞杆菌中高效和稳定表达AiiA蛋白   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
 【目的】摸索提高AiiA蛋白对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力的方法。【方法】苏云金芽胞杆菌的AiiA蛋白是一种胞内蛋白,能降解参与诱导调控多种植物病原菌致病基因表达的N-乙酰高丝氨酸内酯信号分子。本文采用两种方式来提高AiiA蛋白的活性,即利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白在细胞表面表达该蛋白以及利用苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry3Aa启动子来提高aiiA基因的表达量。为此构建该蛋白基因与细胞表面S-层蛋白的锚定区结合而成的融合蛋白基因slh-aiiA以及带有基因cry3Aa启动子的融合基因pro3A-aiiA。为了提高表达的稳定性以及去掉重组菌中非苏云金芽胞杆菌片段,本文构建了解离载体pBMB5401,并将上述两个融合基因单独或同时装入解离载体pBMB5401,分别得到重组质粒pBMBcaiiA,pBMB3aiiA和pBMB3439。转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171,随后导入温度敏感型辅助质粒pEG922,重组质粒在整合酶的作用下发生体内重组,消除了抗性基因等非必需片段。【结果】得到3个重组菌BMBcaiiAR,BMB3aiiAR和BMB3439R,在无抗性选择压力下的稳定性均在90%以上。融合蛋白SLH-AiiA及pro3A-AiiA在解离后的重组菌中得到表达,具有对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力。【结论】在苏云金芽胞杆菌中高效和稳定表达AiiA蛋白,可增强其对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力,当同时结合两种方式来表达AiiA蛋白时效果最好。  相似文献
7.
豆油对藤仓赤霉菌978菌株产赤霉素GA3发酵的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
在藤仓赤霉菌(Gibberella fujikuroi)978菌株产赤霉素GA3的发酵前期,研究了发酵初始培养基中添加不同浓度豆油对发酵过程脂肪酶活性的影响,结果表明:添加1.0%(W/V)的豆油,在发酵48~60h仍能对脂肪酶进行诱导,从而维持较高的脂肪酶活性,有利于菌体利用补加的豆油合成赤霉素GA3。在此基础上进一步探讨了补油发酵过程中豆油补加时间和补加浓度对赤霉素GA3合成的影响,试验表明:补油发酵起始培养基中添加豆油1.0%(W/V)、发酵60h补加4.0%(W/V)豆油能显著提高赤霉素GA3产量,与全淀粉发酵培养基发酵相比,在摇瓶发酵水平上赤霉素GA3的产量提高了23%,在10L发酵罐上产量提高了40%。  相似文献
8.
内生成团泛菌HAUM1对宿主水稻的定殖及促生作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
刘佳  林会  赵斌 《湖北农业科学》2011,(23):4820-4824
从水稻中分离出一株具有解磷能力的内生成团泛菌HAUM1,将菌株HAUM1进行gfp基因标记后,结合激光共聚焦扫描技术与平板计数法,研究其对宿主水稻的侵染、定殖及分布规律,结果表明大量菌体以特殊的Symplasmata结构由根部侵入宿主,并逐渐扩散到茎、叶组织中。在对HAUM1促生作用的研究中,将HAUM1与两株解磷菌PA10(Agrobacterium sp.)、P11(Pantoea agglomerans)同时进行接种处理,结果证明前者在提高宿主水稻的生物量、叶绿素及磷含量方面都具有显著优势,且HAUM1的吲哚乙酸生产能力高达23.9 mg/L。表明HAUM1对生态型农业具有重要的应用潜力。  相似文献
9.
油菜内生真菌的分离鉴定及抑菌作用   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
从油菜幼苗中通过PDA培养基分离出9株内生真菌,通过形态观察和18S rRNA基因序列分析,其中6株鉴定为链格孢菌(Ahernaria alternata),1株鉴定为球毛壳菌(Chaetomium globosum),1株属于镰刀菌属(Fusarium),1株属于炭角菌目(Xylariales).从鉴定出的油菜内生真菌中,筛选出l株有抑菌活性的生防真菌--球毛壳菌(Chaetomium globosum)YY-11,此菌株对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、油菜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、小麦赤霉菌(Fusarium graminearum)等有不同程度的抑制作用.球毛壳菌YY-11对立枯丝核菌的玻片对峙镜检结果显示:在对立枯丝核菌的抑制过程中,球毛壳的拮抗机理主要是重寄生作用.  相似文献
10.
以水稻和油菜为试验材料,对内生菌YY-23和SJ-10进行定殖范围的测定、促生长及抗虫试验,结果表明:2株内生菌YY-23和SJ-10均能在水稻、油菜、小麦、玉米、红菜薹、萝卜等植物体内定殖;菌液浸种24 h后播种,20 d后经YY-23和SJ-10浸种后的油菜鲜质量分别比对照增加了113.5%、52.5%;SJ-10在饲喂第6天时存活率比对照明显降低,差异显著(P<0.05),而YY-23无抗虫活性.  相似文献
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