人参根际土壤微生物PCR-DGGE反应体系优化

[目的]优选人参根际土壤微生物的PCR-DGGE反应体系。[方法]以种植1年的人参土壤为材料,利用PCR-DGGE技术,对反应体系中的几种重要参数不同梯度进行了优化研究,包括模板、dNTPs、引物及Mg2+的用量。[结果]最适宜的反应体系为:模板DNA浓度为0.8μg/μl,dNTPs浓度为0.2 mmol/L,引物浓度为0.4μmol/L,Mg2+浓度为1.5 mmol/L。[结论]该方法简便快捷,为进一步研究人参根际土壤微生物多样性奠定了基础。     

大豆种子7S球蛋白变异系统的含硫氨基酸分析

本研究以大豆种子７Ｓ球蛋白变异系统的含硫氨基酸含量提高效果为目的，对４１个７Ｓ球蛋白变异系统的氨基酸、蛋白质含量进行分析。结果在４１个７Ｓ球蛋白变异系统中有、１３个系统的含硫氨基酸含量超过了联合国粮农组织制定的标准，占７Ｓ球蛋自变异系统的３１．７％。平均数显著性测验结果，７Ｓ球蛋白变异系统的含硫氨基酸、蛋氨酸、就氨酸含量都极显著高于正常品系，而其蛋白质含量没有显著差异。相关分析结果，７Ｓ球蛋白变异系统的蛋氨酸与优氨酸含量间，蛋氨酸及胱氨酸与含硫氨基酸含量间均为极显著正相关；蛋氨酸含量与蛋白质含量间呈显著负相关；胱氨酸及台硫氨基酸含量与蛋白质含量间无显著相关。     

均匀设计法优化人参单芽诱导生根培养基

为建立完整的人参组培体系,以人参叶片为外植体,MS为基本培养基,利用2,4-D、KT、NAA 3种生长调节剂配制的培养基诱导出愈伤组织,之后利用IBA、6-BA、NAA 3种生长调节剂配制的培养基诱导出不定芽,然后采用均匀设计和DPS软件分析的方法,研究了NO_3~-、NH_4~+与NAA、KT、IBA、6-BA、IAA、GA_3 6种生长调节剂不同组合配制的培养基对根诱导的影响,以期筛选出诱导人参生根的最佳生长调节剂组合。结果表明:人参愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+KT 1 mg/L+NAA 0.66 mg/L+1%琼脂,诱导率为93%;人参不定芽诱导的最佳培养基为MS+IBA 3 mg/L+6-BA 3 mg/L+NAA 3 mg/L+1%琼脂,诱导率为86%;人参根诱导的最佳培养基为NO_3~- 3 mg/L+NH_4~+7 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L+IBA 8 mg/L+6-BA 0.125 mg/L+IAA 0.15 mg/L+GA_(3 )6 mg/L+8%琼脂+3%蔗糖,诱导率达95%,接种前不定芽茎粗的平均值为0.15 cm,茎长的平均值为2.65 cm,生根后茎粗、茎长的平均增长值分别为0.09和0.07 cm。且生根后根粗和根长的平均长度分别为0.32和1.03 cm。本研究为人参今后的育种工作提供参考依据。     

不同铁利用效率大豆品种在石灰性土壤中抗氧化酶活性的差异

为探明不同铁利用效率大豆品种抗氧化酶活性的差异,以铁效率差异显著的铁高效品种(‘吉育99’、‘吉育75’、‘长农15’、‘长农20’)和铁低效品种(‘吉农27’、‘吉育87’、‘吉育92’、‘吉育93’)大豆为材料,采用盆栽方式,种植在石灰性土壤中,测定不同铁利用效率的大豆农艺性状、籽粒含铁量、不同发育时期的叶绿素含量(SPAD)和抗氧化酶活性等指标。结果表明,铁高效与铁低效大豆品种株高、单株荚重、单株粒重、单株生物量和籽粒含铁量均存在显著差异;在石灰性土壤中,在三叶期和四叶期时铁高效品种大豆叶片的SPAD和SOD活性显著高于铁低效品种;在一叶期、二叶期,铁高效大豆品种叶片中的CAT活性显著高于铁低效品种;而POD活性各时期(V1～R2)无显著差异。铁高效大豆品种(‘吉育99’、‘吉育75’、‘长农15’、‘长农20’)在缺铁条件下通过维持较高的抗氧化酶活性来避免膜质过氧化导致的光合能力下降。     

番茄游离小孢子培养及胚状体诱导研究

[目的]探讨基因型、花粉发育时期对诱导胚状体的影响和胚状体形成过程中花粉粒的变化特性。[方法]以市场购买的"贼不偷""大黄888""中蔬四号""黄香蕉""顶心红""粉宝莲""宝石"7个番茄品种的花粉粒为材料,以B5为基本培养基,液体培养诱导胚状体。[结果]基因型是影响诱导胚状体的关键因素。供试的7个番茄品种中只有"贼不偷"品种的花粉粒对花粉培养有响应,其余品种无响应;花粉发育时期又是影响诱导胚状体的关键因素。"贼不偷"品种不同发育时期花粉粒对花粉培养的响应有差异,最佳时期是单核中期及单核靠边期;诱导出来的胚状体呈现带有胚柄、多细胞、球形或心形。[结论]试验结果为建立番茄游离小孢子培养体系及其相关机理研究提供了理论依据。     

吉林省延边地区田间杂草初步调查

据初步调查,吉林省延边地区田间杂草约有280余种,分属52科160属.笔者在文后附一名录,对调查所获田间杂草逐一笔录了中文名称、学名(拉丁文)、朝文名称、生培以及生物学特性等项.     

利用RAPD分子标记分析东北地区杂草稻的亲缘关系

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对东北地区杂草稻生态型以及普通水稻共15个样品进行亲缘关系的分析.所分析的10个随机引物共扩增出了93条DNA片段,其中多态性条带为36条,多态性比例为38.71%,利用93个RAPD标记,在MEGA2.1软件中,计算遗传距离,建立UPGMA聚类图.结果表明:RAPD分子标记可以将杂草稻与普通稻、杂草稻不同生态型之间分开;杂草稻之间形态相似、地理分布相近的物种聚类在一起.     

赤松根际土壤微生物PCR—DGGE反应体系优化

为建立赤松根际土壤微生物的PCR-DGGE反应体系,以赤松根际土壤为材料,利用PCR—DGGE技术,对反应体系中的几个重要因素不同梯度进行优化,包括模板DNA、dNTPs、引物及Mg2＋的用量。在25μL PCR反应体系中,模板DNA浓度为10ng,dNTPs浓度为0．15mM,引物浓度为0．32μM,Mg2＋浓度为1．0mM时,其PCR效果最佳。用该反应体系扩增出来的PCR产物,在DGGE凝胶上能够清晰地分辨出赤松根际土壤细菌和真菌多样性。这为进一步研究赤松根际土壤微生物,特别是研究赤松外生菌根奠定了基础。     

人参BBM基因全长cDNA的克隆及生物信息学分析

BBM(BABY BOOM)基因是属于植物AP2/EREBP基因家族的AP2亚族的转录因子,已有很多研究表明,过量表达BBM基因能够诱导植物体细胞胚,是植物体细胞胚诱导研究中应用潜力大的重要基因之一。为利用BBM基因诱导人参体细胞胚,该试验采用RACE方法克隆了2 291 bp的人参BBM基因全长cDNA,包含1 998 bp的开放阅读框(ORF),编码665个氨基酸。用其推测的编码蛋白序列与拟南芥等植物的BBM基因序列比对结果,人参BBM基因中包含euANT2-euANT6、bbm-1等基序,还包含由Linker连起来的2个AP2结构域(AP2-R1和AP2-R2),说明PgBBM是属于AP2亚族的转录因子。与其它植物已知BBM基因构建的系统发育树显示,人参BBM基因与烟草、大豆、苜蓿的BBM基因亲缘关系较近,与其它植物的BBM基因的亲缘关系较远。