武汉市东湖不同区域水体水质和富营养化分析

以武汉市东湖为对象,通过定点定时采样、水质分析等方法,对武汉市东湖不同区域不同月份水体水质和富营养化进行了研究。结果表明,10月东湖水体总磷、总氮、氨氮和化学需氧量最大,分别为0.18、1.08、0.46、39.30 mg/L。东湖水体综合营养指数随月份呈现规律性变化趋势,即10月8月12月2月4月,4月和2月属于轻度富营养,10月、8月和12月属于中度富营养。东湖4个区域水体综合营养指数变化趋势为D区域A区域B区域C区域,东湖D区域和A区域水体属于中度富营养,东湖B区域和C区域水体属于轻度富营养。东湖4个区域湖水细菌总数与湖水富营养化程度呈现正相关,D区域湖水富营养化程度最重,湖水细菌总数也最多、湖水富营养化程度最轻,湖水细菌总数也最少。     

根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnH基因的克隆表达与纯化

对从湖北省襄阳市烟草种植土壤中分离筛选得到的尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnH基因进行克隆表达,并对AgnH蛋白的表达和纯化条件进行优化,为解析agnH基因的功能和揭示根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解的分子机制提供理论依据。通过PCR扩增获得agnH全长基因(585bp),构建重组质粒pET28a(+)-agnH,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,研究不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对重组质粒pET28a(+)-agnH诱导表达的影响,用不同浓度的咪唑洗脱液洗脱重组蛋白,采用SDS-PAGE检测重组蛋白。结果表明:在IPTG浓度为0.4mmol/L、诱导温度为25℃且诱导时间为25h条件下,AgnH蛋白表达量较高;在250mmol/L的咪唑洗脱液洗脱下,得到浓度较高的AgnH蛋白。     

菌株尼古丁降解代谢中agnH基因的克隆表达与纯化

对从湖北省襄阳市烟草种植土壤中分离筛选得到的尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnH基因进行克隆表达，并对AgnH蛋白的表达和纯化条件进行优化，为解析agnH基因的功能和揭示根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解的分子机制提供理论依据。通过PCR扩增获得agnH全长基因(585 bp)，构建重组质粒pET28a(+)agnH，转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达，研究不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对重组质粒pET28a(+)agnH诱导表达的影响，用不同浓度的咪唑洗脱液洗脱重组蛋白，采用SDS-PAGE检测重组蛋白。结果表明：在IPTG浓度为0.4 mmol/L、诱导温度为25℃且诱导时间为25 h条件下，AgnH蛋白表达量较高；在250 mmol/L的咪唑洗脱液洗脱下，得到浓度较高的AgnH蛋白。