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旨在鉴定牦牛Smad4基因与bta-miR-146a的靶向关系,为探究它们在牦牛卵巢卵泡发育过程中的可能分子调控机制提供理论基础。利用miRBase数据库和MEGA 6.0软件分析miR-146a在不同物种中的保守性,同时利用TargetScan软件预测其潜在靶基因,通过构建psiCHECK2双荧光素酶报告基因载体进行靶向验证。生物信息学分析结果显示,miR-146a成熟序列在脊椎动物中具有高度的保守性,并预测到178个与卵巢卵泡发育相关的潜在靶基因,从中选取Smad4基因分析发现其3′非编码区域(3′UTR)与bta-miR-146a存在结合位点;进一步成功构建牦牛Smad4基因3′UTR野生型及突变型psiCHECK2双荧光素酶报告质粒,荧光素酶活性检测结果显示,bta-miR-146amimic对牦牛Smad4基因3′UTR野生型报告质粒荧光活性有明显的下调作用,分别与突变型及NC对照组差异显著(P0.05)。本研究初步证实,牦牛Smad4基因是bta-miR-146a的靶基因,从而提示btamiR-146a可能通过调控Smad4基因在牦牛卵巢卵泡发育过程中的表达发挥作用。 相似文献
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为了建立高品质的犬肾(MDCK)单克隆细胞系,使用CRISPR/Cas9技术实现MDCK细胞IFN-β1基因的敲除,构建细胞培养禽流感病毒(AIV)增殖体系。首先,根据CRISPR/Cas9系统的技术要求构建了Cas9表达载体和sgRNA载体;然后,用3种载体共转染MDCK细胞,通过GFP阳性特征分选单细胞克隆,单细胞克隆培养在96孔板中。通过PCR扩增和对IFN-β1靶序列进行测序,确定了阳性MDCK单细胞克隆中IFN-β1的敲除。结果成功构建了具有IFN-β1敲除的MDCK单细胞克隆细胞系,与原始细胞相比,该细胞系的病毒增殖能力提高。 相似文献
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鸡新城疫(newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,鸡群一旦传入该病常呈毁灭性流行,在短期内可使未免疫鸡全部感染发病而死亡,该病一年四季均可发生,危害极大,其主要特征是呼吸困难,严重腹泻,全身呈败血症变化,黏膜和浆膜出血,病程稍长的伴有神经症状[1-2].接种疫苗是有效预防本病的有力措施,由于受多种因素影响,疫苗免疫有时不能取得理想的保护水平. 相似文献
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林芝地区养猪业发展很快 ,每年主要从四川长途贩运大批仔猪入藏 ,以解决本地区仔猪不足的问题 ,这就给当地疫病防治带来困难。 1998年5月 ,林芝地区畜牧局猪场饲养的 4月龄左右的仔猪突然发生以体温升高、顽固下痢为主要症状的急性传染病。现将诊治情况报告如下。1 发病情况 该养猪场从贩猪个体户处购进一批新到的荣昌仔猪 5 4头 ,集中在 1栋猪舍内饲养。饲养 4天后开始发病 ,第 6天共发病 40头 ,发病率达 74%,死亡 15头 ,病死率达 37.5 %。病猪以下痢、体温升高为主征 ,部分猪耳尖呈乌紫色。但该猪场另一栋猪舍内自繁自养且经过副伤寒疫… 相似文献
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通过对藏北高寒牧区草地和牛羊越冬情况进行调查与测定分析,结果显示:随着藏北海拔高度的差异,草地生境不同,生态环境持续恶化,草地退化严重,退化面积占草地总面积的50.8%.牧草生产季节不平衡,区域差异明显,生产波动性较大,天然草地产草量300~750 kg.鼠虫害较为严重,分别达到45~60只/ hm2和20~30条/m2.适宜于藏北种植的人工种植牧草量高质优,营养价值较高,产草量比天然未退化草地、退化草地分别提高10~15倍和50倍以上.冷季牛羊体重损失达20%~25%,不同饲养方式生产效果差异较大. 相似文献
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三批禽脑脊髓炎(AE)油佐剂灭活疫苗免疫开产前种鸡,种鸡免疫2~3个月后所产种蛋对禽脑脊髓炎病毒(AEV)鸡胚易感性试验的受保护率达100%,而同期所产种蛋孵出的仔代雏鸡,在出雏后3周内对AEV VR株攻毒的受保护率亦达100%; 种鸡免疫6~7个月后所产种蛋对AEV VR鸡胚易感性试验的受保护率达75%~80%,而同期所产种蛋孵出的仔代雏鸡,在出雏后3周内对AEVVR株攻毒的受保护率达70%~90%。试验结果表明,AE灭活疫苗AEV鸡胚易感性试验的鸡胚保护率与同期雏鸡对AEV VR肌肉途径攻毒的保护率基本相同。 相似文献
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在高海拔地区对西藏青稞秸秆进行氨化(A)、碱化(B)、复合(C)和微贮(D)处理,与未处理秸秆组(对照组)比较,评定其物理特性、测定处理前后营养成分及饲喂藏绵羊的效果.试验结果表明:4个处理组秸秆色泽、气味、质地和温度等物理特性均较好.氨化和复合处理组粗蛋白质含量较其他2个处理组和对照组均显著提高,碱化和微贮处理组与对照组无显著差异;中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和灰分含量各组间均差异不显著.酸性洗涤木质素(ADL)含量除了微贮组,其余各组间及与对照组均差异不显著.4个处理组比未处理组藏绵羊对粗饲料采食量分别提高22.12 %、20.19 %、25 %和35.58 % (P<0.05),各处理组间差异不显著;平均日增质量分别提高36.60 %、29.28 %、41.58 %和63.54 %.其中,以微贮处理组最高,与对照组差异显著,与碱化处理组及各处理组与对照组均有显著差异.粗饲料效率分别提高0.78 %、0.49 %、0.87 %和1.35 %.经济效益以微贮处理组明显,每天纯收入2.14元. 相似文献
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