雪山草鸡感染传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定

传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在我国广泛蔓延,给商品肉鸡群和蛋鸡群带来了新的威胁。本研究对一个疑似发生非典型传染性法氏囊病的地方品种雪山草鸡群进行了RT-PCR检测,并对分离的3株毒株进行了基因测序及序列分析。结果显示,引起该鸡群发病的病原是IBDV新型变异株,属于A2dB1基因型;这3个毒株的VP2高变区编码蛋白上含有IBDV变异株的特征性氨基酸,也具有IBDV新型变异株的独特氨基酸。结果提示,我国地方品种鸡群中也有IBDV新型变异株的流行,现有的部分商品化IBDV疫苗已不能有效预防IBDV新型变异株的流行。     

防残装置在“梭子蟹—日本对虾”养殖中的应用

<正>梭子蟹自相残杀的习性是成活率低下的主要原因之一,其养殖成活率一直在5%以下,甚至3%以下,如此低的养殖成活率是对池塘资源的极大浪费。浙江舟山登步岛、宁波象山莲花等海水池塘在养殖中规模化应用防残装置,实现了蟹虾高产高效。近年来,在浙江舟山登步岛、宁波象山莲花等海水池塘兴起"梭子蟹—日本对虾"养殖中     

校企合作模式在技能型高职人才培养中的实践与探索

通过校企技术合作,为企业解决了技术难题,提高了教师的工程技术水平,提高了学生的实践能力;同时优化课程体系,建立优秀教师团队,培养飞机机电维修专业急需的高素质、高技能人才。     

白斑综合证病毒胶体金免疫层析试剂板的研制

将胶体金免疫层析技术应用于对虾白斑综合征的诊断,研制了一种检测对虾中白斑综合征病毒的胶体金免疫层析试剂板.将胶体金标记的抗白斑综合征病毒单克隆抗体包被在金标垫上,将抗白斑综合征病毒多克隆抗体和羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线和质控线上.通过双抗体夹心法检测样品中自斑综合征病毒含量.结果表明,该试剂板对白斑综合征病毒的最低检出限为1.0 mg/kg,特异性好,稳定性高,整个检测所需时间为8～10 min,适合现场快速检测.     

表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及生物学特性分析

鸡传染性法氏囊病（IBD）是一种严重危害养禽业的高度致死性和免疫抑制性传染病。为研制IBD重组火鸡疱疹病毒（HVT）活载体疫苗,本研究构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）保护性抗原VP2基因的重组HVT并对其体外生物学特性进行了分析。通过RT-PCR扩增IBDV超强毒株VP2基因并克隆入pCI载体,获得重组真核表达质粒pCI-VP2。用限制性内切酶将携带CMV启动子的VP2基因表达框架切下,连接于入门质粒pENTR,构建获得重组入门质粒pENTR-VP2。将pENTR-VP2与HVT重组黏粒H3-Kan/ccdB进行LR重组反应,构建重组表达黏粒H3-VP2。用H3-VP2与其他4个相互重叠并覆盖HVT全基因组的黏粒共同转染鸡胚成纤维细胞（CEF）,拯救获得重组病毒rHVT-VP2。将重组病毒在CEF中连续传至20代后用PCR、间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行检测,并绘制重组病毒体外生长曲线,分析其体外复制特性。结果表明,重组病毒rHVT-VP2能够稳定表达VP2蛋白,rHVT-VP2在CEF中的复制能力与亲本病毒无明显差异。重组病毒rHVT-VP2免疫鸡后能够诱导产生IBDV中和抗体,并对IBDV强毒株攻击引起的死亡提供90%免疫保护。重组病毒rHVT-VP2的构建为研制IBD重组HVT活载体疫苗奠定了基础,对IBD的防控具有重要意义。     

植物乳杆菌对尼罗罗非鱼的肠道黏膜免疫调节及生长性能的影响

探讨植物乳杆菌对尼罗罗非鱼的肠道黏膜免疫、生长性能及抗病力的影响及作用机制。将植物乳杆菌饲喂尼罗罗非鱼后通过测定平均增重、增重率、特定生长率和饵料系数评价生长性能,通过PAS染色反应检测肠道杯状细胞的分泌黏多糖性能,通过荧光定量PCR的方法检测肠道细胞因子IL-1β、NFκB、TNF-α和IL-10的表达量,并用嗜水气单胞菌NJ-1攻毒后计算尼罗罗非鱼的累计死亡率。结果表明,植物乳杆菌组的平均增重、增重率和特定生长率显著高于对照组(P0.05);低浓度嗜水气单胞菌NJ-1攻毒后肠道分泌的中性黏多糖明显减少,而在植物乳杆菌组使杯状细胞分泌的中性黏多糖显著增多;在低浓度攻毒后第1 d,饲喂L.plantarum 08.923组的细胞因子IL-1β的表达量比对照组显著提高(P0.001),但是随着攻毒后时间的延长,植物乳杆菌组的表达量逐渐与对照组接近,而对于TNF-α和IL-10的表达,在攻毒后的第1 d,饲喂L.plantarum 08.923比对照组都显著升高(P0.01),在攻毒后第1 d到第2 d,两组细胞因子NFκB的表达量均显著升高,且两组间差异不明显,但在攻毒后的第3 d,对照组NFκB的表达量急剧回落,而植物乳杆菌组仍保持较高水平,两组间差异显著(P0.01);嗜水气单胞菌腹腔注射攻毒实验中,添加植物乳杆菌后尼罗罗非鱼的累积死亡率显著降低。研究表明,植物乳杆菌08.923对尼罗罗非鱼有显著的黏膜免疫调节能力,在一定程度上能抑制炎症反应,增强机体的免疫应答,因而能显著提高生长性能及抗病力。植物乳杆菌08.923可作为预防水产动物疾病和促进生长的理想选择,本研究结果也为阐明益生菌先天性免疫调节作用机理提供证据。     

酒泉市黄瓜双根高位嫁接技术

从砧木选择处理、接穗种子、播种、定植、嫁接、嫁接后管理及采收等方面总结了酒泉市温室黄瓜双根高位嫁接技术。     

沂水县渔业发展调研报告

去年5～7月，沂水县渔业局组织全体干部职T，利用两个半月的时间，借助GPS卫星定位测量仪器，通过实地测量、现场拍照、走访了解渔户、信息建档登记等手段，对全县19个乡镇139座小[一]、[二]型水库的渔业水域资源，进行了一次全面系统的调查。调查发现，沂水县小型水库闲置水面较多，苗种投放不足，经营管理粗放，渔业资源养殖开发潜力巨大。     

鸭肠炎病毒UL41基因缺失株的构建及其体外增殖能力分析

旨在构建鸭肠炎病毒（DEV）UL41基因缺失毒株,并对其生物学特性进行分析,本研究以克隆有DEV UL41基因的重组黏粒D1为骨架,利用Red/ET重组技术构建缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41;将UL41基因缺失重组黏粒D1 dUL41与其他4个克隆有DEV基因组片段的亲本黏粒共转染鸭胚成纤维细胞（DEF）,拯救获得UL41基因缺失毒株rDEV-SD19/dUL41。将该基因缺失病毒感染DEF后,提取病毒基因组进行PCR鉴定及测序,并利用间接免疫荧光试验检测该病毒感染细胞中UL41基因表达情况;绘制拯救的基因缺失病毒的生长曲线,分析其体外复制特性。PCR及测序结果显示,本研究成功构建了缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41。将该基因缺失黏粒与其他含有DEV基因组的亲本黏粒共转染DEF后能够产生典型的蚀斑病变。PCR及测序结果显示,UL41基因成功从DEV基因组中缺失;间接免疫荧光试验发现,基因缺失病毒rDEV-SD19/dUL41感染DEF后,未见UL41蛋白表达。综上表明,本研究成功构建了DEV UL41基因缺失病毒。体外生长曲线显示,rDEV-SD19/dUL41在DEF中的复制能力明显低于亲本病毒,提示UL41蛋白在DEV复制中发挥重要作用。UL41基因缺失DEV的构建为进一步研究UL41基因在DEV感染和致病中的作用机制奠定了基础。     

马立克氏病病毒感染鸡羽髓上皮细胞差异蛋白质组学研究

为鉴定鸡羽髓上皮细胞感染马立克氏病病毒(MDV)前后差异表达的蛋白,本研究以MDV强毒GA株人工感染SPF鸡,并通过双向电泳技术进行分析.结果显示:在病毒感染后4 d、7 d、14 d和21 d显著差异表达的蛋白点分别有2个、8个、25个和9个;而通过质谱技术鉴定出29种蛋白质,其中包括能量代谢相关蛋白、增殖和凋亡相关蛋白、细胞骨架蛋白、信号传导蛋白、转录相关蛋白、免疫相关蛋白和其他功能蛋白质.本实验首次对鸡羽髓上皮细胞感染MDV后各时期蛋白表达水平的变化进行研究,鉴定了多种差异表达蛋白质,为进一步揭示MDV与宿主的相互关系、感染性病毒粒子的成熟和致病机制提供了依据.