无核柚新品种‘华柚2号’

‘华柚2号’是将‘国庆1号’温州蜜柑愈伤组织原生质体与‘华柚1号’叶肉原生质体融合创制的二倍体雄性不育胞质杂种。树势中等，花瓣短而退化，雄蕊败育，雌蕊正常。果实扁圆形，隔离种植下完全无核，平均单果质量1 232.47 g，果皮中等厚，可食率57.03%。果肉粉红色，囊壁薄，果肉化渣多汁，风味浓，可溶性固形物12.37% ~ 13.33%，总酸0.90% ~ 1.20%，固酸比10.42 ~ 14.13，维生素C 24.26 mL • L-1。在湖北武汉地区种植，果实11—12月成熟，5年生嫁接树单株产量约50 kg。     

以雄性不育胞质杂种‘华柚2号’为母本创制柚有性群体

【目的】以具有胞质雄性不育特性的‘华柚2号’为母本与有核柚品种有性杂交,以期转移其不育胞质进而实现二倍体水平的无核柚改良。【方法】以‘华柚2号’为母本‘,沙田柚’和‘鸡尾’葡萄柚为父本分别配置杂交组合,并对其子代遗传来源和单/多胚性早期鉴定。【结果】分别从‘沙田柚’和‘鸡尾’葡萄柚为父本的杂交组合获得实生苗1 018和687株;用3对多态性SSR标记对实生苗的遗传鉴定表明均为父母本有性后代。以单/多胚性分子标记进行的早期胚性鉴定表明‘,沙田柚’为父本的有性后代均为单胚性;而‘鸡尾’葡萄柚为父本的后代,单胚与多胚性比例为2.86∶1。【结论】以‘华柚2号’为母本创制的有性后代为无核柚改良以及柑橘雄性不育恢复基因定位和克隆奠定了种质基础。     

柑橘6个地方品种资源四倍体高效发掘及分子鉴定

[目的]基于柑橘多胚种子存在珠心细胞自然加倍的特点,发掘我国柑橘6个地方特色品种资源四倍体新种质.[方法]采摘柑橘成熟果实,剥取种子后催芽播种;待实生幼苗长至2～3片真叶大小时,采用"观根辨叶看油胞"形态初选法从实生幼苗群体筛选疑似多倍体;采用流式细胞仪鉴定疑似多倍体倍性并以SSR分子标记鉴定其遗传来源.[结果]基于幼...     

‘纽荷尔’脐橙与‘尤力克’柠檬种间体细胞杂种的代谢特征分析

利用GC–MS(气相色谱—质谱)测定柑橘种间体细胞杂种——‘纽荷尔’脐橙(Citrus sinensis Osbeck)+‘尤力克’柠檬[Citrus limon(L.)Burm. F.]和其两个融合亲本果实的初生代谢物含量,包括可溶性糖、有机酸、氨基酸和脂肪酸;利用LC–MS(液相色谱—质谱)测定果实类黄酮含量,综合评估体细胞杂种果实的代谢特征。结果表明,体细胞杂种初生代谢物组成总体偏向‘尤力克’柠檬,苹果酸、柠檬酸和脂肪酸含量均高于两亲本,大多数氨基酸含量介于两亲本之间。体细胞杂种中共检测到48种类黄酮,整体偏向柠檬亲本;其中有33种物质含量介于两亲本之间,15种高于或低于两亲本。     

国庆1号温州蜜柑珠心胚苗培育及四倍体发掘

【目的】温州蜜柑一般表现为雄性不育、果实无核，收集国庆1号温州蜜柑（Citrus unshiu Marc.，简称G1）种子，用于培育珠心胚苗并发掘多倍体新种质，为其提纯复壮和珠心胚变异育种提供基础材料。【方法】从G1成熟果实剥取种子，浸泡消毒后离体播种至播种培养基；待幼苗长至有3～5枚真叶时，采用流式细胞仪分析倍性和SSR分子标记鉴定遗传来源。【结果】从约12 500个果实中剥取获得106粒种子，离体播种后41粒种子萌发，经培养获得62株实生幼苗；对所有幼苗进行倍性检测，获得四倍体1株，其余61株均为二倍体；用4对多态性SSR引物对获得的四倍体和随机筛选的38株二倍体植株进行分子鉴定，表明发掘的四倍体和35株二倍体的带型与亲本G1完全一致，推测其均为珠心胚来源，且四倍体为G1珠心细胞自然加倍而形成；其余3株二倍体在部分SSR位点与G1带型不一致，推测由G1与周边其他品种杂交而来。【结论】这些珠心胚苗二倍体及四倍体种质为国庆1号温州蜜柑提纯复壮、珠心胚变异育种及相关基础研究提供了珍贵的种质资源。     

补锌对靠接枳砧的缺锌纽荷尔脐橙锌营养吸收的影响

为研究补锌对靠接枳砧的缺锌纽荷尔脐橙生长及锌营养吸收的影响,以已经缺锌12个月的枳橙砧纽荷尔脐橙(N/C)、靠接枳砧的纽荷尔脐橙(N/Ct)为试材,采用砂培法对缺锌苗木进行缺锌(0.001 mg/L)和补锌(0.05 mg/L)处理5个月。结果显示:无论补锌还是缺锌,靠接苗木新叶和接穗茎的干质量与未靠接苗木相比有所增加;在缺锌条件下,靠接枳砧未能增加苗木叶中的锌含量和锌累积量;在补锌条件下,靠接苗木叶和根的锌含量显著高于未靠接苗木,其新叶的锌累积量显著高于未靠接苗木;补锌明显增加靠接苗木叶的锌含量和累积量,仅显著增加未靠接苗木新叶的锌累积量;在缺锌条件下,靠接苗木新叶的钾含量显著高于未靠接苗木,其原始砧木根中的钙含量显著高于未靠接苗木。在补锌条件下,2种苗木新叶对钾的吸收无显著性差异,靠接苗木新叶的钙含量显著低于未靠接苗木,但2种苗木原始砧木根的钙含量无显著性差异。补锌使2种苗木新叶和根对硼的吸收明显减少。     

5种砧木对‘华农本地早’橘和‘国庆1号’温州蜜柑营养生长及果实品质的影响

本研究对武汉地区嫁接于枳、枳橙、枳柚、资阳香橙和红橘的‘华农本地早’橘（BDZ）和‘国庆1号’温州蜜柑（G1）的树冠体积、砧穗亲和性等营养生长参数,以及TSS、TA及TSS/TA等果实品质指标进行了测定和评价。5种砧木对G1和BDZ营养生长及果实品质的影响差异显著。营养生长方面,比较G1和BDZ的树冠大小发现枳柚、红橘>枳橙、香橙>枳;嫁接于枳柚的BDZ的树冠体积2018年达24.5 m3,树势较强;而枳仅为枳柚的1/3,矮化效果明显,树势较弱。BDZ与枳柚的亲和性较差,G1与红橘的亲和性较差,BDZ和G1与枳橙、枳、香橙的亲和性均较好。果实品质方面,嫁接于枳及枳橙的G1和BDZ果实TSS相比嫁接于枳柚、红橘和香橙的较高,2018年BDZ果实TSS分别为枳13.0%、枳橙12.2%、枳柚11.6%、红橘10.8%和香橙10.3%。果实TA在枳柚砧上较高,红橘砧上较低,另3种砧木居中;2016年嫁接于枳柚的BDZ果实TA高达1.1%,红橘上仅为0.7%。嫁接于枳、枳橙、红橘的果实TSS/TA相比香橙、枳柚高,2018年BDZ果实TSS/TA分别为枳14.9、枳橙14.9、红橘14.1、香橙13.6和枳柚10.9。综合评价表明,枳、枳橙和香橙砧木可以使接穗品种果实品质优良、树体矮化或树势中庸,且与接穗嫁接亲和性较好,是武汉地区宽皮橘的适宜砧木。     

依据多倍体形态特征快速高效发掘柑橘四倍体

基于柑橘多胚性品种存在珠心细胞自然加倍的特点，建立了基于种子催芽、生长室实生播种、幼苗“观根辨叶看油胞”形态初选和流式细胞仪倍性鉴定的发掘柑橘四倍体的快速方法。采用该方法，分别从无酸甜橙、红江橙、贡柑、年橘、新会柑、滑皮金柑的432、506、1 356、1 870、2 749和685株实生苗中，发掘出疑似四倍体5、6、5、17、45、7株；通过倍性检测，从上述6个品种分别获得四倍体4、5、5、14、39、5株，形态初选准确率分别为80.0%、83.3%、100.0%、82.4%、86.7%和71.4%。与之前的四倍体发掘方法相比，本方法四倍体初选准确率高，并且从种子播种到获得四倍体植株耗时不超过40 d。SSR分子鉴定表明，所鉴定的四倍体均来自其二倍体品种珠心细胞自然加倍形成的双二倍体，为柑橘三倍体无核育种提供了珍贵的四倍体亲本资源。     

以本地早橘和槾橘为母本倍性杂交创制柑橘三倍体

【目的】基于二倍体与四倍体倍性杂交策略创制柑橘三倍体新种质。【方法】以二倍体为母本,四倍体为父本进行人工授粉,授粉后85 d采摘幼果并对未成熟种子实施幼胚离体挽救培养;再生植株后,用流式细胞仪和根尖染色体计数法对再生植株进行倍性鉴定;并用SSR标记对三倍体后代进行分子鉴定。【结果】以本地早橘和槾橘为母本,8个异源四倍体体细胞杂种和1个双二倍体为父本,配置9个倍性杂交组合,共授粉2 749朵花,坐果489个,平均坐果率17.8%;培养幼嫩种子2 239粒,经幼胚离体挽救培养,共再生植株260株;用流式细胞仪和根尖染色体计数检测再生植株倍性,获得三倍体141株;SSR分子鉴定表明从槾橘×NS组合随机选取的50株三倍体后代全部为双亲的有性后代;三倍体后代在温室生长一年后,采用嫁接（枳砧）将这些三倍体定植于田间。【结论】这些三倍体新种质为本地早橘和槾橘无核新品种培育奠定了宝贵的材料基础。