广西玉林地方鸡种适宜能量和蛋白质需要的研究

玉林三黄鸡属广西地方优质鸡种之一 ,本试验旨在研究其母鸡全期日粮适宜能量 (ME)和粗蛋白质 (CP)的需要水平。试验设 4 (ME)× 4(CP)共 1 6个处理 ,每个处理 4 0～ 6 0只母鸡。结果表明 :以增重和经济效益为综合衡量指标 ,0～5周龄适宜ME和CP分别为 1 2 1 3兆焦 (MJ) /千克和 2 1 % ,6～ 8周龄分别为 1 2 1 3兆焦 (MJ) /千克和 1 8% ,9～ 1 1周龄分别为 1 2 1 3兆焦(MJ) /千克和 1 5%～ 1 6 % ,1 2周龄至出栏分别为1 3 39兆焦 (MJ) /千克和 1 5%。     

动物生产性状免疫调控技术的研究进展和应用前景

免疫调控技术是一项以自身激素或细胞蛋白调控对象为主的动物生产性能调控技术,在促进动物生长、提高动物繁殖性能和应用于免疫去势等畜牧业生产实践中显示出广阔的应用前景。本文就提高繁殖性能的免疫类固醇激素和抑制素,抑制繁殖活动的免疫促性腺素释放激素;促生长的免疫生长抑素、肌肉生成抑制因子、瘦素、儿茶酚胺、脂肪细胞膜蛋白等免疫调控技术作用作一综述,并评价其在动物生产中的应用前景和未来的研究方向。     

鸡催乳素受体胞外域的分子克隆及原核表达

根据家鸡催乳素受体基因胞外域序列（GenBank号：D13154）设计并合成1对覆盖编码区58～1249位核苷酸的引物，以家鸡垂体总RNA为模板，经反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法获得了特异性片断，将该片断克隆入pMD18-T载体并转化感受态细菌Ecoli DH5α永久保存．通过设计第2对引物扩增PRLR胞外域cDNA片段，该片段经酶切后克隆到表达载体pRSETA的EcoRⅠ和HindⅢ两酶切位点之间，构建重组质粒pR-PRLR．该质粒在转化感受态细菌E．coli B121（DF．3）后，在IPTG诱导下促使重组菌表达了相对分子质量为53640左右的重组融合蛋白，表达量在0．1mmol／L IPTG诱导5h时达到最高，约占总菌体蛋白的17．6％左右．表达产物可经体积分数为50％的Ni-NTA凝胶纯化，说明重组蛋白中具有正确的His-tag标签及之后的鸡催乳素受体编码区胞外域序列．     

调控畜禽繁殖的激素免疫技术

回顾近30年来国内外畜禽生殖活动的内分泌免疫调控技术的发展,从早期的免疫类固醇激素和抑制素使动物提前进入初情期,促进更多的卵泡发育和提高排卵数,对公畜则提高其精子生成数量;到现在根据携带Inverdale基因母羊具有高繁殖力的原理发展的免疫BMP15或GDF9提高羊排卵数和产羔数的技术。对禽类免疫催乳素或免疫血管活性肠肽VIP抑制催乳素的分泌,可以解决易就巢禽类的就巢性,提高其产蛋性能。而免疫促性腺素释放激素则可以抑制性腺的发育进行“免疫去势”,提高畜禽的生长速度、瘦肉率、饲料报酬并改善肉质。今后内分泌免疫调控技术的研究应该开发具有更高免疫原性的新型基因工程疫苗和简单实用的免疫程序,以便更好地应用于生产实际。     

猪抑制素α亚基基因克隆及其原核表达

为了克隆猪抑制素α亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期蓝塘猪卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据猪抑制素α亚基基因编码区序列(GenBank号:NM214189)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了猪抑制素α亚基基因编码区全长序列。另外,再设计1对特异性引物以扩增抑制素α亚基成熟肽cDNA,并将扩增产物克隆到表达载体pRSET A的BglⅡ和EcoR I酶切位点之间,构建重组质粒pINH-SCAU并转化Escherichia.coli BL21(DE3)株。转化重组质粒pINH-SCAU的重组菌经IPTG诱导后表达的重组蛋白质分子量为20 000,经Ni-NTA凝胶纯化和兔抗牛抑制素α亚基抗体的特异性免疫反应,证明为抑制素α亚基重组融合蛋白质。对蛋白质表达条件的比较,结果显示重组菌经常规诱导剂0.05 mmol/L IPTG诱导5 h后的细菌生长密度OD600值为2,抑制素α亚基重组融合蛋白质的最高表达量为总菌体蛋白质量的32.00%。采用自动诱导培养基替代IPTG,在诱导18 h后能使菌液的OD600达13,同时自动诱导的抑制素融合蛋白质表达量占菌体总蛋白质的32.57%。因此利用自动诱导培养基可以获得较佳的抑制素重组整合蛋白质。     

免疫抑制素和卵泡抑素阻止夏季热应激导致的猪精液品质下降的研究

[目的]通过免疫抑制素和卵泡抑素促进精子发生,在夏季热应激状态下保持公猪精液品质.[方法]在夏季热应激状态下对精液品质出现下降的成年种公猪单独免疫抑制素、或联合免疫抑制素α亚基和卵泡抑素重组蛋白(n=6)3次,每次间隔21 d;然后在9周试验期间定期采血测定血液抗体效价、FSH和睾酮浓度,每周采精观察精子活力和精子密度作为精液品质指标.[结果]抑制素单独免疫、抑制素和卵泡抑素联合免疫都使猪血液中抗抑制素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01),联合免疫也使猪血液中抗卵泡抑素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01).单独免疫或联合免疫都显著升高了血液FSH浓度;联合免疫还升高了血液睾酮水平.在试验期间对照组中猪的精子活力持续下降,而两免疫组的精子活力都上升,其中联合免疫猪的精子活力显著高于对照组猪.试验开始时对照组猪精子密度显著高于两免疫组,但在试验期间持续下降;而免疫组中猪精子密度在试验期间未下降,特辑是在联合免疫组于试验后期还显著高于对照组猪.[结论]免疫抑制素和卵泡抑素可以促进公猪FSH和睾酮分泌,克服夏季热应激的不良影响,促进猪精子发生,并提高精液精子活力和密度,有望用于热应激状态下保持种用公猪的繁殖性能.