转基因小麦Puroindoline蛋白SDS-PAGE 方法的研究与应用

小麦嘌呤吲哚蛋白(Puroindoline)是优质遗传特性硬度的生化标记,对小麦磨粉品质起决定性作用.对目前分析此类蛋白的两类Triton-X-114和Tricine-SDS-PAGE系统进行了优化和比较,建立了详细的适合半子粒分离Pin蛋白的电泳方法.采用此法检测转pinA基因的硬粒小麦P34的后代以及转基因硬粒小麦之间杂交子代的外源基因pinA的表达情况,取得了良好的效果.该方法为Puroindoline蛋白的进一步研究奠定了基础,为小麦品质生化和分子标记辅助育种提供了方法.     

粘果山羊草(Aegilops kotschyi) puroindoline b基因的克隆与表达分析

籽粒硬度是小麦加工品质的重要影响因素。puroindoline a（Pin a）和puroindoline b（Pin b）是控制小麦籽粒硬度的主效基因。根据已报导的小麦Pin b基因的保守序列，设计合成了一对特异性引物ForB1与RevB1，对粘果山羊草（Aegilops kotschyi，C^uM^k）的三个材料的基因组DNA和胚乳cDNA进行Pin b基因扩增、克隆、序列测定和表达分析，发现了4个新型Pin b等位基因，基因序列与六倍体小麦的同源基因存在较大的差异。与软粒小麦品种Capitole的Pinb—D1a相比较，其核苷酸同源性分别为93．3％、94．6％、94．6％、94．4％,氨基酸同源性分别为90．5％、93．2％、93．2％、92．6％。其ORF长447bp，编码148个氨基酸残基，都具有麦类作物Pinb基因特有的19个氨基酸的信号肽序列和WPTKWWK的色氨酸结构城。等位基因Pin b-11-1含有1个紧邻色氨酸结构城的突变位点（Val66Phe）。RT—PCR证实了Pin b基因在籽粒胚乳中的表达。Southern blot分析结果显示，三种材料均含有两个拷贝的Pin b基因。研究结果表明，粘果山羊草中包含与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因，为栽培小麦的品质改良提供了丰富的基因资源。     

牡山羊草puroindoline a基因的克隆与表达分析

puroindoline a （Pin a）和puroindoline b（Pin b）是控制小麦籽粒硬度的主效基因。根据已报道的小麦Pin a基因的保守序列，设计合成了1对特异性引物ForA1和RevA1，对六倍体牡山羊草Aegilops juvenalis（UUMMDD）的基因组DNA和胚乳cDNA进行Pin a基因扩增、克隆、序列测定和表达分析，发现了1个新型Pin a（Pin a～allele），其ORF长4／17bp，编码148个氨基酸残基，具有麦类作物Pin a基因特有的28个氨基酸的信号肽序列和WRWWKWWK的色氨酸结构域基因序列，与软粒小麦cv.capilole的Pina—Dla相比较，其核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为98．7％与96．6％。Pin a～allele含有1个紧邻色氨酸结构域的突变位点（Gln 77Leu）。RT～PCR证实了Pin a在籽粒胚乳中的表达。Soulhern Blot分析结果表明，牡山羊草中Pin a基因含有1个拷贝。研究结果表明，山羊草中包含着与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因。     

磁性负载型光催化材料TiO2/Fe3O4的制备、改性及表征

采用溶胶-凝胶法制备核-壳式结构的TiO2/Fe3O4负载型光催化剂,并对其进行中间层改性,制备出TiO2/SiO2/Fe3O4光催化材料.研究了pH等制备条件对TiO2/Fe3O4材料光催化性能的影响,并对比了改性前后降解甲基橙的光催化性能,通过X射线衍射仪(XRD)、红外光谱仪(FT-IR)、振动样品磁强计(VSM)和透射电子显微镜(TEM)对改性前后颗粒的磁性能、晶相和形貌进行了表征.研究表明:磁性负载光催化剂TiO2/Fe3O4和TiO2/SiO2/Fe3O4均为超顺磁性,且光催化性能较高,在1 h内甲基橙脱色率达90%以上,其降解反应均属于一级动力学反应;SiO2中间层的引入可显著提高材料的饱和磁化强度、光催化速率和循环使用的光催化活性.     

桐柏大枣矮化密植栽培技术

桐柏大枣是 1982年在桐柏县果园乡发现大枣变异品种的基础上 ,选育出的枣树新品种 ,1983年定名。桐柏大枣是一种巨型鲜食性品种 ,1995年 9月荣获“中国科技精品展览会金奖” ,1996年被国家林业部确定为 10 0项新成果推广项目。1　桐柏大枣的生物学特性桐柏大枣对气候、土壤适应性较强。桐柏县年平均气温 15℃ ,七月份气温 2 1～ 2 7.8℃ ,一月份气温 - 2 .8～ 1.6℃。年平均日照时数为 2 0 2 7小时 ,≥10℃的活动积温 4 811℃ ,无霜期 2 2 6天。年降水量933～ 1181ｍｍ。土壤主要为黄棕壤、黄褐土、潮土等。1 1　对气象条件的要求温度 :据观…     

粘果山羊草(Aegilops kotschyi)puroindoline基因的克隆与表达分析

籽粒硬度是小麦加工品质的重要影响因素.籽粒硬度生化标记Friabilin蛋白主要由Puroindoline A（PinA）和Puroindoline B（PinB）构成,它们的编码基因puroindoline a（Pina）和puroindoline b（Pinb）紧密连锁,位于Ha（hardness）位点,是控制籽粒硬度的主效基因.根据小麦Pina、Pinb的保守序列,设计合成了2对特异性引物,对粘果山羊草Aegilops kotschyi（UUSS）3个材料的基因组DNA和胚乳RNA进行Pina、Pinb基因克隆、序列测定和表达分析,发现了3个新型Pina等位基因和4个新型Pinb等位基因.新型puroindoline等位基因全长447bp,编码148个氨基酸残基,具有麦类作物puroindoline基因特有的信号肽序列和色氨酸结构域.与Pina-D1a相比较,新型Pina等位基因核苷酸同源性分别为98.7%、98.4%、97.5%,氨基酸同源性分别为96.6%、95.9%、93.9%.等位基因Pina-allele-2包含一个位于色氨酸结构域内的突变位点（Lys70Arg）.新型Pinb等位基因与Pinb-D1a相比较,其核苷酸同源性分别为93.3%、94.6%、94.6%、94.4%,氨基酸同源性分别为90.5%、93.2%、93.2%、92.6%.等位基因Pinb-allele-1含有一个紧邻色氨酸结构域的突变位点（Val66Phe）.Southern blot分析结果表明,3个材料中Pina和Pinb基因都含有2个拷贝.RT-PCR和Western blot都证实了Pina、Pinb基因在籽粒胚乳中的表达.研究结果显示山羊草中包含着与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因,为小麦分子育种提供了丰富的的遗传资源.