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荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌方法的建立及初步应用 总被引:20,自引:0,他引:20
根据编码鼠伤寒沙门氏菌肠毒素stn基因的核苷酸序列设计1对引物和荧光探针,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测沙门氏菌的核酸荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示,该方法检测沙门氏菌结果均为阳性,而非沙门氏菌均为阴性;对带有沙门氏菌肠毒素stn基因的阳性质粒的检测敏感性为4个/μL。用该方法对人工污染沙门氏菌的鲜猪肉和鲜鸡蛋进行检测,当检样中沙门氏菌初始含菌量分别为1CFU/g(鲜猪肉)和1CFU/g(鲜鸡蛋),经过12h的增菌后,检测结果均为阳性。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。此研究为食品中沙门氏菌快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。 相似文献
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为从动物饲料中快速检测所含牛源组织成分以有效防止疯牛病传入,根据牛线粒体基因核苷酸序列设计1对引物,应用CheleX法分离饲料中牛源组织成分的DNA.对分离的DNA进行PCR扩增、基因克隆及核苷酸序列分析,并建立饲料中牛源组织成分的PCR检测方法.用建立的PCR方法对羊、猪、鸡、兔和鱼组织基因组DNA进行扩增,均无特异条带;将牛组织基因组DNA倍比稀释,分别对各个稀释度的DNA进行PCR扩增,结果表明,该方法对牛组织DNA检测的敏感度可达25.2pg/μL.用该研究建立的方法对含不同量牛肉粉的鱼粉进行检测,其最小检测量达0.05%(质量分数),整个过程约需3h. 相似文献
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