藏猪妊娠期乳腺形态和乳腺发育的标志蛋白表达、相关激素及信号通路的变化

目的 研究藏猪妊娠期乳腺形态和乳腺发育标志蛋白、相关激素及信号通路的变化。方法 选取妊娠33、50、75和90 d的藏猪,屠宰后采集血清和第3、4对乳腺。利用HE染色观察乳腺形态变化;使用ELISA试剂盒检测血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)和催乳素(PRL)等乳腺发育相关激素的水平;利用Western blot方法检测乳腺发育标志蛋白[包括ETS相关的转录因子5 (Elf-5)和脂滴包被蛋白2 (PLIN2)],以及激素受体[包括雌激素受体(ERα)、催乳素受体(PRLR)和孕酮受体(PR)]的表达,并检测乳腺发育相关信号通路PI3K/AKT和Jak2/STAT5的激活情况。结果 从乳腺形态观察可知,妊娠33 d时乳腺中主要是导管结构,50 d时出现少量腺泡结构,75 d时腺泡快速发育、腺泡增多,90 d时乳腺中主要是腺泡结构;乳腺发育标志蛋白Elf-5和PLIN2在妊娠50 d蛋白表达开始升高,75和90 d时均具有很高的表达量;血清中E2、P和PRL质量浓度随着妊娠的进行而升高,90 d时E2达到42.82 ng/L,P达到36.76 μg/L,PRL达到66.53 μg/L;ERα和PRLR在妊娠50 d时表达量升高,PR在75 d时表达量升高。此外,Jak2/STAT5和PI3K/AKT信号通路在妊娠75和90 d时被显著激活。结论 藏猪妊娠过程中,乳腺在50 d时开始腺泡发育、75 d时乳腺进入腺泡快速发育期、90 d时发育程度更高,同时,伴随着血清中乳腺发育相关激素和乳腺中激素受体表达的显著升高,以及乳腺发育相关通路PI3K/AKT和Jak2/STAT5的激活。     

限饲对初情期小鼠乳腺发育的影响及机制

【目的】研究限饲对初情期小鼠乳腺发育的影响及机制,为动物乳腺发育的营养调控提供科学依据。【方法】选用24只4周龄C57BL/6雌性小鼠,分为对照组和限饲组。试验为期4周,每周称体质量并统计采食量和饮水量,在试验结束前对小鼠进行体成像和体组成检测。试验结束后采集小鼠乳腺并称质量。采集血液,测定血清中胰岛素样生长因子(IGF-1)和雌二醇(E2)的水平。采用Whole-mount染色观察小鼠乳腺发育情况,统计小鼠乳腺终末乳芽(TEB)和导管分支数量。利用免疫荧光染色检测乳腺组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。【结果】限饲组小鼠体质量、体增质量、平均日采食量、平均日能量摄入均极显著低于对照组(P0.001),但其饮水量显著高于对照组(P0.05)。限饲对小鼠肌肉含量和脂肪含量无显著影响。限饲使小鼠的乳腺质量降低了29%(P0.05),对乳腺指数无显著影响。Whole-mount染色结果表明,限饲显著抑制初情期小鼠的乳腺发育,其乳腺组织的TEB数量和导管分支数量均显著低于对照组(P0.05)。此外,限饲对血清中E2水平无显著影响,但使血清中IGF-1水平降低了34%(P0.05)。限饲显著抑制了小鼠乳腺组织中PCNA蛋白的表达。【结论】限饲可显著抑制初情期小鼠乳腺发育,这可能与限饲可降低血清中IGF-1水平和乳腺组织中增殖相关蛋白PCNA表达有关。     

牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)对热暴露小鼠下丘脑GnRH表达和分泌的影响

本试验旨在探讨日粮添加牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)对热暴露小鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)表达和分泌的影响。选用36只3周龄雌性C57BL/6J小鼠,按体重将小鼠分为3组(每组12只),即对照组(25℃,饲喂基础日粮),热暴露组(10:00-18:00,35℃;18:00-10:00,30℃;饲喂基础日粮),TUDCA组(10:00-18:00,35℃;18:00-10:00,30℃;饲喂添加0.25%TUDCA的基础日粮),试验周期为5周。每周记录小鼠的体重、采食量、饮水量。试验结束后分离血清,用ELISA方法检测血清GnRH的水平,采集下丘脑,利用qPCR和Western blot方法分别检测下丘脑中GnRH的mRNA和蛋白表达。结果显示:热暴露能显著降低小鼠的采食量,提高饮水量,TUDCA能一定程度恢复热暴露对小鼠采食量和饮水量的影响;热暴露显著降低小鼠下丘脑GnRH表达和血清中GnRH的水平,TUDCA能逆转热暴露对小鼠下丘脑GnRH表达和分泌的影响。综上,日粮添加TUDCA可缓解热暴露导致的小鼠下丘脑GnRH的表达和分泌的降低,研究结果为动物热暴露的营养调控提供了理论基础和试验依据。