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猪瘟病毒RT-LAMP-LFD检测方法的建立与应用 总被引:2,自引:0,他引:2
【目的】建立一种新型的、能在基层场地进行实时便捷诊断的猪瘟病毒检测方法。【方法】环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)NS5B基因设计一套特异性引物及生物素标记探针,结合异硫氰酸荧光素标记的扩增产物,建立RT-LAMP-LFD检测方法。【结果】所建立的方法能够特异地检测出CSFV的存在,检测PRRSV、JEV、PCV-2等其他病毒均为阴性;所建立的CSFV-RT-LAMP方法对RNA的最低检测限为50 pg;反应快速,整个扩增反应可在1 h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察。【结论】应用RTLAMP-LFD检测CSFV特异性强、灵敏度高,并且操作安全、简便、快捷,可以满足基层检疫的需要。 相似文献
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试验通过对适合副猪嗜血杆菌生长的4种固体培养基(巧克力琼脂、1%NAD巧克力琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂和1%NAD胰蛋白胨大豆琼脂)筛选,采用分光光度计即时测定细菌数量,并以Bliss-LD50软件计算副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)对昆明小鼠的半数致死量。结果HPS在0.1%NAD的巧克力琼脂培养基生长最佳,以16~18h对数生长期细菌OD600值计算活菌量较准,HPS对昆明小鼠LD50为3.4291×109。 相似文献
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从湖南五个地市流行的疑似猪败血性链球病例中分离到一株病菌株,生化和兰氏分群法鉴定及基因序列分析,证明此菌为C型链球菌。以该菌回归健康猪,感染猪临床表现为高热稽留、两耳发紫、皮肤出血;病理学观察脾被膜上有红色丘状突起、胆囊水肿及胆汁浓稠、肺炎性水肿和小叶肝变、心冠脂肪粘液样变性。人工感染猪的临床表现及病理变化与临床病例基本一致。 相似文献
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