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试验旨在构建一个能够定点整合且无筛选标记基因的半乳糖苷酶基因LacS表达载体.本研究以pEGFP-N1质粒为原始框架,通过PCR及限制性酶切位点在pEGFP-N1质粒的标记基因两端添加两个同向LoxP序列,在多克隆位点上游添加能够定点整合的attB序列,最后再将目的基因BC promoter-LacS-PolyA通过限制性酶切位点插入多克隆位点.每一步都进行PCR、酶切及测序鉴定.PCR产物及酶切片段大小符合预期结果,测序结果也与相应寡核苷酸序列一致,证明各个基因片段正确地连接到载体相应位置.本试验成功构建了可定点整合的无筛选标记半乳糖苷酶基因表达载体pEGFP-N1-LacS. 相似文献
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利用气相色谱法-氢火焰离子化检测器(GC/FID)快速测定麝香中麝香酮含量。样品经乙醇-超声波提取、过滤后,直接利用GC/FID测定,外标法定量。实验测定麝香酮回收率大于95%;定量限为0.80μg.mL-1;校准曲线线性范围为0-320μg.mL-1,线性相关系数r为0.9995;三次高、中、低浓度(50、150、300μg.mL-1)测定峰面积RSD%分别为1.08、0.89、0.55。本实验表明,乙醇超声波提取-GC/FID测定麝香中的麝香酮含量是一种简单、快速、准确的方法。 相似文献
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为探讨人参皂苷Rb3 对糖尿病治疗的作用及机理,以链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠模型为材料,系统分析了人参皂苷Rb3 对糖尿病小鼠在降血糖、降血脂、胰岛素调节及抗氧化机能方面的作用.对小鼠禁食血糖浓度的测定显示,人参皂苷Rb3 灌胃给药14 d后对糖尿病小鼠具有极显著的降血糖作用(P<0.01),其中剂量为30 mg·kg-1的人参皂苷Rb3具有更好的降糖效果.人参皂苷Rb3 的降糖效果与糖尿病治疗药物盐酸二甲双胍相近.对小鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及胰岛素(INS)的含量测定发现,人参皂苷Rb3 在降低糖尿病小鼠的血脂浓度和提高胰岛素含量方面均具有显著的调节作用,其中剂量为30 mg·kg-1 的人参皂苷Rb3 具有更好的疗效,各项治疗指标均优于盐酸二甲双胍.对小鼠抗氧化机能的分析表明,人参皂苷Rb3 在提高糖尿病小鼠血液中超氧化物歧化酶(SOD)活力方面具有显著作用,同时可以有效降低糖尿病小鼠血清中丙二醛(MDA)的含量,这对于改善糖尿病小鼠的抗氧化能力和缓解并发症的发生具有重要意义. 相似文献
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红豆越橘果实中3-半乳糖-矢车菊色素的提取、分离及结构鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
红豆越橘经压榨处理以后,在恒温水浴(60℃)条件下用体积分数为85%的乙醇浸提、浓缩。将所得浓缩液进行梯度洗脱提纯,然后从30%乙醇的浓缩液中荻单体化合物Ⅰ。经过薄层层析、反相高效液相色谱、质谱^13C核磁共振对化合物Ⅰ进行结构鉴定,确定此物质为3-半乳糖-矢车菊色素。 相似文献
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顶岗实训是农业高职人才培养方案中的重要环节,为客观评价顶岗实训教学,提高顶岗实训质量,在分析高职顶岗实训存在问题的基础上,依据全面系统性、科学性、可操作性、导向性、多元性和改进功能等原则,结合多年顶岗实训教学运行管理实践,对农业高职学生企业顶岗实训评价进行探索和实践。 相似文献
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[目的]优选苯酚-硫酸法测定人参茎叶多糖含量的因素条件。[方法]采用紫外分光光度法测定人参茎叶多糖的含量,并采用正交试验优选测定的条件。[结果]苯酚-硫酸法测定人参茎叶多糖含量的最佳测定波长为485 nm;苯酚-硫酸法的最佳显色条件为A1B2C1,即:浓度6%苯酚的体积为1.0 ml,浓硫酸的体积为6.0 ml,反应时间为25 min;粗多糖含量在10~70μg/ml之间与吸光度有很好的线性关系,回归方程为Y=0.013 2X-0.085 7,相关系数R为0.999 6;试验方法的回收率为100.36%,RSD为1.26%,显色液在120min内稳定性良好。[结论]该方法准确可靠,为人参茎叶的进一步开发利用提供了依据。 相似文献