转基因大豆对雄性鼠生殖系统的安全性评估

以含转基因豆粕饲料喂食小鼠,观察对雄性小鼠生殖系统的影响。喂食小鼠120d后,通过PCR方法检测外源基因在睾丸中的存在情况;对睾丸组织制作石蜡切片,观察睾丸组织的病理损伤情况;通过流式细胞术检测睾丸组织中各生殖周期细胞比例;通过彗星电泳检测小鼠精子DNA损伤情况。结果表明:在睾丸组织中未检测到外源基因;睾丸组织切片未发现明显的病理学变化;试验组与对照组小鼠睾丸组织中各生殖周期精细胞比例无显著差异;未检测到精子DNA损伤。说明喂食转基因饲料对小鼠的生殖系统无显著影响。     

喂食转基因大豆对子代雄鼠生殖系统的影响

亲代小鼠分别喂食转基因和非转基因大豆饲料,120 d后组内交配获得子一代小鼠。以转基因饲料喂食的亲代所繁殖的子代小鼠作为实验组,断乳后子鼠继续喂食转基因大豆饲料;对照组子鼠为亲代非转基因喂食组所繁殖,断乳后继续喂食非转基因大豆饲料。分别于喂食30、60、90、120 d取子代小鼠的睾丸称重并计算脏器系数,伊红法染色检测精子存活率与畸形率;制作石蜡切片HE染色后观察睾丸病理学变化。结果表明:与对照组相比,实验组小鼠睾丸系数、精子存活率与畸形率均无显著性差异;组织切片镜检未发现两组小鼠的睾丸出现明显病理损伤。实验结果说明转基因大豆饲料喂食120 d未对子代雄鼠精子质量和睾丸组织病理造成影响,表明亲代长期喂食转基因大豆饲料后无潜在遗传毒性及积累效应。     

花生种子贮藏蛋白的热稳定性与氨基酸组成的关系

分析两种不同蛋白类型的花生种子贮藏蛋白热稳定性，表明各品种类型花种子贮藏蛋白的3种主要组分的热稳定性存在显著的差异。即伴花生球蛋白Ⅱ热稳定性最高，伴花生球蛋白I次之，花生球蛋白最低，高甲硫氨酸品种类型（汕油523）的贮藏蛋白中无论花生球蛋白还是伴花生球蛋白Ⅱ的热稳定性都高于低甲硫氨酸品种类型（海花1号相应组分的热稳定性，氨基酸分析表明，各品种3种组分中17种氨基酸中的大多数氨基酸含量无显著变化，并且天冬氨酸，谷氨酸和精氨酸的含量最高，三者之和可达总量的45%以上；3种组分中，伴花生球蛋白Ⅱ除了谷氨酸和精氨酸含量显著高于花生球蛋白，伴花生球蛋白I外，含硫氨基酸（甲硫氨酸和半胱氨酸）也明显高于后两者，3个组分中含硫氨基酸水平与热稳定性正相关，即含硫氨基酸水平越高，其热稳定性越高，冷藏过程中含硫氨基酸高的伴花生球蛋白Ⅱ不易降解、保持高热稳定性正相关，即含硫氨基酸水平越高，其热稳定性越高，冷藏过程中含硫氨基酸高的伴花生球蛋白Ⅱ不易降解、保持高热稳定性水平。     

花生种子相对分子质量17500多肽抗体制备及其应用

用一种纯化的花生种子高甲硫氨酸蛋白－相对分子质量１７５００多肽为抗原,免疫动物获得了高特异性的抗血清,以之为探针分析比较了其它几种豆科植物中们花生球蛋白Ⅱ提取物,免疫亲合反应均呈阳性,而玉米种子呈阴性反应,表明该多肽是豆科植物种子蛋白保守成分,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析表明该多肽在高甲硫氨酸类型代表品种和低甲硫氨酸类型代表品种中均存在。     

植物化的猪α-乳清蛋白基因人工合成

根据猪α-乳清蛋白基因cDNA序列设计了多对特异性引物,采用循环PCR方法人工合成了植物化的猪α-乳清蛋白基因编码区(398 bp)并对该PCR产物进行测序.DNA序列测定结果表明,采用循环PCR法扩增的产物是预期的猪α-乳清蛋白基因编码区,该植物化的猪α-乳清蛋白基因编码区可以用于植物转化,为猪α-乳清蛋白基因转基因植物研究和在转基因植物中进行动物基因表达研究奠定了基础.     

猪α乳清蛋白基因双元载体的构建和转化拟兰芥植物

将人工合成的植物化的猪α乳清蛋白基因编码区克隆到载体中,构建了带有35 S启动子--猪α乳清蛋白基因--终止子表达单元的双元载体,采用农杆菌法对拟兰芥进行植物转化.利用该双元载体上的除草剂抗性基因(Bar基因)为选择性标记进行筛选,获得了一些抗除草剂的转化植株.对转化植株后代植进行猪α乳清蛋白基因的PCR检测,证实外源猪α乳清蛋白基因已整合到植物基因组DNA中.     

广州市农贸市场中转基因大豆的检测

对广州市农贸市场中销售的大豆进行转基因大豆的初步筛查,以检测在广州市场是否有转基因大豆流通和销售,为相关标识和监管提供实验依据。根据转基因大豆内参凝集素Lectin基因及外源基因CaMV35S、NOS及EPSPS基因序列设计4对引物,对收集的大豆样品提取其基因组DNA后进行PCR检测。结果在所收集的14份大豆样品中检测出1份转基因大豆,表明在广州农贸市场中存在转基因大豆,并在市场流通,提醒相关部门需根据国家规定需要加强监管力度。     

转基因植物(农产品)中转基因成分的PCR检测

转基因(植物)食品的安全性是科学界及公众普遍关心的问题。在转基因植物研究中,根据转基因植物所带有的转基因成分的DNA序列,设计引物对耐草铵膦转基因植物中转入的转基因成分进行了PCR分析,结果表明,采用PCR扩增对外源基因和遗传标记基因的分析方法灵敏、准确。     

棉花中转基因成分多重PCR检测体系的建立

以棉花内源基因sad1、报告基因GUS、外源抗虫基因Cry1 Ab/Ac、筛选基因NPTⅡ、NOS终止子和CaMV35 S启动子为检测对象,设计的6对引物能扩增长度合适的基因片段且避免了引物二聚体。通过优化PCR扩增体系中不同引物终浓度的配比以及退火温度对多重PCR检测的影响,建立了棉花转基因成分6重PCR检测体系。结果表明:采用本研究建立的棉籽基因组DNA提取方法,该6重PCR检测体系能够有效地从少至1颗棉籽的少量样品里检测出棉花中的转基因成分。     

两种不同蛋白质组成类型的花生种子甲硫氨酸含量的比较分析

本文对两种不同蛋白质组成类型花生的子叶总蛋白3个主要组分,花生球蛋白、伴花生球蛋白I和伴花生球蛋白Ⅱ进行了部分纯化,并进行了氨基酸分析。它们的氨基酸组成研究表明,这两种类型花生的子叶总蛋白中及其3个主要组分均含有17种氨基酸,包括8种必需氨基酸,其中天冬氨酸、谷氨酸和精氨酚含量为最高,约为总量的45%：而甲硫氨酸含量和半胱氨酸水平都极低。在这3个主要组分中,花生球蛋白的甲硫氨酸含量最低,伴花生球蛋白I次之,伴花生球蛋白Ⅱ最高。高甲硫氨酸类型品种（汕油523）其花生球蛋白、伴花生球蛋白I和伴花生球蛋白Ⅱ的甲硫氨酸含量均显著高于海花1号的对应组分的甲硫氨酸含量。