金丝猴肺脏中分离到绿脓杆菌

绿脓杆菌,在自然界中分布广泛,可引起多种动物的脏器脓肿.2007年11月初,我们对深圳某动物园送检的病死金丝猴病因进行了调查,结果从金丝猴的肺脏中分离到绿脓杆菌,报告如下.     

新型鸭肝炎病毒FS株全基因组序列分析

本试验参考GenBank中已公布的新型鸭肝炎病毒全基因组序列,应用Primer Premier5．O软件,在序列保守区域分别设计了7对引物,通过RT-PCR方法对本实验室已鉴别纯化的新型鸭肝炎病毒Fs株进行了分段扩增,经过测序拼接整理,获得Fs株全基因组序列（GenBank中登录号为EU877916）。序列分析表明,Fs株全长7792个碱基,一个大的开放阅读框编码2251aa。将各基因与国内外已发表的新型鸭肝炎病毒参考毒株进行相似性分析,结果表明,与G株（GenBank登录号为EU755009）核苷酸相似性最高,为99．2％,而FS株与G株和C—GY株（GenBank登录号为EU352805）的氨基酸相似性最高,均为99．6％,与DHV—HS株和DHV-HSS株的相似性最低,均为83．6％。系统发育树分析发现,与G株亲缘关系最近。     

2型猪圆环病毒感染对小鼠组织中Caspase3、Bak及Bcl-2基因表达的影响

Caspase3、Bcl-2、Bak是细胞凋亡过程中3种重要的调节蛋白,为研究感染猪圆环2型病毒(PCV2)后体内细胞的凋亡情况,本实验以BALB/c小鼠为实验模型,建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测细胞凋亡的方法.结果表明实验组Caspase3的表达在各时间段里与对照组相比均呈上升趋势,提示了PCV2感染可以上调Caspase3水平,从而增加被病毒感染组织的细胞凋亡,而小鼠心、脑、脾等组织Bak基因表达明显上调,Bcl-2基因表达水平也伴随Bak基因而升高.这些结果揭示了PCV2感染BALB/c小鼠后,相关细胞凋亡基因在体内的作用与机制,同时为今后细胞凋亡的检测提供了新的方法.     

猪圆环病毒2型感染对小鼠脾脏中IFN-γ基因表达的影响

本研究对PCV-2感染对小鼠组织中IFN-γ基因表达的影响进行了分析。分别取各基因RT PCR扩增的回收产物进行序列稀释（10^-1~10^-6）,再进行实时荧光定量PCR扩增,扩增完毕后,进行熔解曲线分析,相对定量检测了PCV 2感染小鼠脾脏不同时段IFN γ基因的表达水平。试验结果表明,得到定量标准曲线,起始模板浓度与Ct值之间呈良好的线性关系,β-actin基因标准曲线为y=-3.32x+31.57,IFN-γ基因标准曲线为y=3.43x+45.83,PCV-2感染小鼠后脾脏IFN γ基因表达水平升高,但第14~28天 IFN-γ基因表达水平呈下降趋势。     

猪圆环病毒2型（PCV2）灭活疫苗（LG株）在规模猪场的应用效果观察

猪圆环病毒2型（PCV2）是导致断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原,并与仔猪先天性震颤、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）、猪呼吸道综合征（PRDC）、母猪繁殖障碍等疾病相关。     

Taqman探针荧光定量PCR快速检测猪圆环病毒2型

猪圆环病毒(PCV)为圆环病毒科圆环病毒属成员,单股环状DNA病毒,为已知的最小动物病毒之一[1]。PCV存在两种血清型,即PCV1和PCV2,两者的细胞培养物均不产生细胞病变。PCV2首先由Allan等[2]从患断奶猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪群中分离到,被证明为PMWS的重要病原之一。此病主要     

应用RT-PCR检测鸭肝炎病毒Ⅰ型感染

鸭肝炎病毒Ⅰ型(duck hepatitis virus Ⅰ,DHV Ⅰ)感染是雏鸭的一种急性高度致死性传染病,主要侵害4周龄以内的雏鸭,特别是1周龄以下的雏鸭最易感染,死亡率较高,是危害养鸭业最为严重的传染病之一[1].1945年在美国首次发现,我国于1963年在上海首次报道了该病的临床病例,至今,全国各养鸭地区均有不同程度的发生和流行.目前,已有多种检测DHV Ⅰ抗原的方法,如免疫电镜、Dot-ELISA和病毒中和试验等,这些方法在DHV Ⅰ的诊断中各有优势.PCR作为一种新的分子生物学检测技术,具有灵敏度高、快速、特异、操作简单等优点[2～4].本实验通过目前已发表的DHV Ⅰ基因组序列相对保守的区域设计引物,成功建立了RT-PCR方法检测鸭肝炎病毒1型.     

浅谈免疫抑制性疾病的预防

对外交流的日益频繁,给我国养殖业带来了发展良机,我国的禽类产品越来越多的打入世界市场,但同时也为疫病的传播提供了有利条件。传染性法氏囊病(1979)、禽脑脊髓炎(1983)、网状内皮组织增生征(1986)、产蛋下降综合征(1986)、番鸭细小病毒病(1988)、鸡传染性贫血(1992)、鸡传染     

对Ⅰ型鸭肝炎病毒3D基因克隆及其原核表达的研究

根据Genbank中的Ⅰ型鸭肝炎病毒全基因序列，应用Primer5.0分析软件设计合成了扩增Ⅰ型鸭肝炎病毒3D基因的一对引物，用该特异性表达引物体外克隆1型鸭病毒性肝炎病毒3D基因。构建重组表达质粒pET32a-3D，将此重组质粒转化到受体菌RossetaⅡ（DE3）中进行诱导表达。SDS—PAGE和蛋白质印迹分析表明，诱导4h后表达量达到最高，表达产物大小约为70Ku，表达蛋白能与Ⅰ型鸭病毒性肝炎阳性血清产生特异性免疫反应。     

2株猪圆环病毒2型分离毒株全基因组的克隆及序列分析

参考GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)全基因组序列,设计2对引物,通过PCR技术扩增出2株PCV2流行株的全基因,并进行了序列测定分析.结果表明,2个分离株基因组全长分别为1 767 bp和1 768 bp,2个分离株之间的核苷酸相似性为97.3%,与GenBank上已发表的PCV2分离株之间的相似性为93.8%～99.3%.2个分离株的ORF2核苷酸序列相似性分别为91.3%～99.6%和90.6%～98.0%,存在一定的变异.