狂犬病病毒HEP-Flury M基因重排后在小鼠神经母细胞瘤细胞中的表型分析

【目的】探究狂犬病病毒HEP-Flury M基因重排对基因转录和蛋白表达的影响,揭示病毒在小鼠神经母细胞瘤(NA)细胞中的表型变化与M基因重排的相关性。【方法】通过荧光定量PCR、Western blot以及病毒在NA细胞中的生长和扩散试验,对亲本毒株rHEP-Flury和M基因重排毒株M2、M4在NA细胞中的基因转录、表达、生长和扩散进行比较。【结果】狂犬病病毒结构基因的转录和表达主要受病毒基因组RNA合成的影响,但是在一个完整转录过程中单个结构基因的转录比例与其所在位置相关,M基因重排病毒的Leader RNA (LeRNA)和L mRNA的转录比例显著高于亲本毒株rHEP-Flury。M基因重排病毒在NA细胞中的生长和扩散都劣于亲本毒株rHEPFlury。【结论】狂犬病病毒亲本毒株rHEP-Flury具有狂犬病病毒原始的基因组顺序,在NA细胞中的生长和扩散都明显优于M基因重排病毒。结构基因在基因组中的位置主要决定其在一次转录过程中的转录比例,进而影响病毒在NA细胞中的生长和扩散。     

从江土著鲤成鱼传统养殖技术要点

<正>从江县位于贵州省黔东南苗族侗族自治州南部,东邻黎平,北接榕江,南连广西三江,西与荔波、广西融水和环江毗邻。境内最高海拔1 643 m,最低153 m,是典型的丘陵山区,"九山半水半分田"的山地特征非常典型,当地群众为了提高土地利用率,把鱼、鸭引入稻田,在相同的土地面积上同时获得稻米、鱼和鸭,形成了全球重要农业文化遗产"从江侗乡稻-鱼-鸭复合系统",实现了天然的立体循环生态农业生产模式,提高了土地利用率,有效缓解了     

MCS+型血细胞分离机采集血小板冲红的原因分析

目的 :了解MCS +型血细胞分离机采集血小板冲红的原因。方法 :将血细胞分离机采集血小板出现冲红的献血者 2 0名作为冲红组 ,随机选择正常机采血小板的献血者 2 0名作为对照组 ,对两组献血者机采前手指末梢血的红细胞计数 (RBS)、血红蛋白 (Hb)、红细胞体积分数 (Hct)、红细胞平均体积 (MCV)、红细胞平均血红蛋白 (MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度 (MCHC)和血浆总蛋白进行分析。结果 :冲红组多项血液参数 (包括Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC)以及血浆总蛋白均明显低于对照组 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1) ;而两组的外周末梢血RBC计数比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :冲红现象与外周血的Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC以及血浆总蛋白等参数的水平降低有关。     

献血前用全血金标法初筛HBsAg的结果与分析

目前 ,对无偿献血者献血前作全血金标法筛查 HBs Ag,是针对我国人群乙肝 HBs Ag阳性比率较高而设计的。献血前作HBs Ag的快速筛查 ,对保证血液质量 ,减少血液浪费有特定的意义。笔者对血站 2 0 0 1年 1～ 3月共 4 4 18名无偿献血者应用全血金标法快速筛查 HBs Ag的结果进行了分析 ,现将结果报道如下。1　材料与方法1.1　标本来源无偿献血者未梢全血标本 4 4 18份、(献血留样标本 390 4份、未梢全血金标快速筛查 HBs Ag阳性献血者采集其静脉血确认标本 5 14份 )。1.2　试剂及方法HBs Ag灵敏度标准参比品 ,由中国药品生物制品检定所提…     

五水头孢唑林钠预防肛肠疾病术后切口感染的疗效观察

目的观察五水头孢唑啉钠对肛肠外科疾病手术患者术后切口感染和不良反应的发生情况。方法选择湛江中心人民医院普通外科肛肠外科疾病手术192例,随机分为两组：治疗组97例给予五水头孢唑啉、对照组95例予头孢唑啉预防手术感染,比较两组的术后切口感染率及不良反应发生率。结果治疗组、对照组的切口感染分别为3.1%（3/97）、10.5%（10/95）,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗组纳入安全性评价83例,与五水头孢唑林钠有关的药物不良反应有1例;对照组纳入安全性评价86例,与头孢唑林钠有关的药物不良反应有7例,两组药物不良反应发生率分别为1.2%、8.1%,两组比较差异也有统计学意义（P〈0.05）。结论五水头孢唑啉钠对控制肛肠疾病手术后切口感染是有效的,不良反应少,值得临床推广应用。     

从江土著鲤鱼种培育技术

正随着农业工业化、农村城镇化和农民居民化的不断发展,许多传统的农业技术、农业文化和农业生产系统正逐渐弱化和消失,为保证传统的农业生产技术、农业生物种质资源和农业文化得以发掘、保护、利用和传承,联合国粮农组织(FAO)在全球环境基金(GEF)资助下发起了"全球重要农业文化遗产(GIAHS)"项目。2013年"贵州从江侗乡农业生产系统"被农业部列入全球重要农业文化遗产[1,2],     

嵌合犬瘟热病毒H基因的重组狂犬病病毒的构建及免疫原性研究

【目的】构建表达犬瘟热病毒（CDV）血凝素蛋白H基因的重组狂犬病病毒（RABV）,并研究其生物学特性及免疫原性。【方法】在RABV HEP-dG株基因组G与L基因之间插入CDV H基因,构建重组全长cDNA质粒pHEP-dG （H）。将pHEP-dG （H）与辅助质粒共同转染BHK细胞,拯救携带CDV H基因的重组RABV HEP-dG （H）。将重组病毒接种BHK细胞,分析病毒的扩散能力;将重组病毒接种小鼠,分析病毒的致病性和免疫原性。【结果】RT-PCR及直接免疫荧光显示,传至第3代的病毒仍能检测到H基因,表明CDV H基因已成功插入RABV基因组中,并在HEP-dG （H）中稳定遗传和正确表达。HEP-dG （H）在BHK细胞中的生长曲线与HEP-dG毒株相似,病毒滴度在96 h达到峰值,但HEP-dG （H）的滴度在每个时间点略低于HEP-dG。以感染复数（MOI）为0.005感染BHK细胞,HEP-dG （H）的扩散能力比HEP-dG毒株低。HEP-dG （H）与HEP-dG对6周龄成年小鼠均不致死,但HEP-dG （H）对成年小鼠体重的影响弱于HEP-dG。HEP-dG （H）与HEP-dG均能诱导小鼠产生抗RABV的中和抗体,免疫后7 d抗体已达到保护水平（0.5 EU/mL）;此外,HEP-dG （H）可诱导产生CDV中和抗体。HEP-dG （H）与HEP-dG免疫小鼠3周后,均能抵御RABV标准攻毒毒株CVS-24的攻击。【结论】本研究成功构建重组RABV HEP-dG （H）,其具有良好的免疫原性和安全性,可作为RABV-CDV新型二联基因工程候选疫苗。     

狂犬病病毒G蛋白的过表达及对病毒的抑制

【目的】探究G蛋白在狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)复制中的作用,以揭示携带双G基因的重组RABV的Hep-dG与亲代毒株rHep-Flury在神经母细胞瘤(NA)细胞中滴度差异的原因,为RABV致病机制的研究奠定基础。【方法】通过病毒吸附、入侵、荧光定量PCR、Western-blot以及中和抗体阻断等试验,检测G蛋白过表达对IFN-β以及相关因子转录的影响。【结果】Hep-dG感染能显著上调NA细胞中IFN-βmRNA的表达,激活了下游因子STAT1的表达与磷酸化,在较低的感染复数(MOI=0.01)下,Hep-dG感染后24 h即可显著促进IFN-β基因的表达,36 h达到最高水平(P0.001)。该病毒进入细胞后,产生了更多的病毒Leader RNA和RIG-I mRNA,且与IFN-βmRNA的表达高度一致。抗体阻断IFN-β后,Hep-dG在NA细胞中的病毒滴度显著上升(P0.01),约为阻断前的7.9倍,且与亲代毒株rHep-Flury无显著差异。与阴性对照比较,5μg的pH-G质粒转染能刺激IFN-β的转录(P0.05),表明真核表达RABV G蛋白能在一定程度上刺激IFN-β的转录。【结论】本研究初步揭示了G蛋白激活先天性免疫应答的原因和作用。RABV G蛋白的过表达,通过促进病毒Leader RNA的转录,激活了RIG-I介导的IFN-β通路,进而抑制了Hep-dG在NA细胞的繁殖。G蛋白的过表达也对干扰素通路起到一定的作用。     

果实香气物质的合成与代谢研究进展

香气是评价新鲜水果和果品加工产品品质的重要指标之一.水果中的香气物质包括脂肪酸、氨基酸和萜类等,它们分别通过脂肪酸代谢、氨基酸代谢和萜类合成等途径而合成.首先介绍了果实中香气物质的种类、脂肪酸代谢途径、氨基酸代谢途径和萜类合成途径等香气物质合成途径,并全面地综述有关香气物质的提取和检测技术、影响水果香气物质形成的采前因素和采后贮藏加工工艺条件对香气物质形成的影响、香气合成的生理与分子生物学基础、贮藏期间果实香气形成相关基因的表达调控等方面的研究进展.最后,提出了对果品香气物质的研究展望.     

湛江地区无偿献血人群HTLV-I感染状况的调查研究

目的 了解湛江地区无偿献血员中HTLV—I感染情况。方法采用ELISA法检测7630名湛江地区无偿献血者血清中HTLV抗体，其中1896名为外地人群，5734名为本地人群。阳性者进行双孔复检，仍阳性者采用PCR法进行确证及系统发生树分析。结果ELISA法检测1896名外地人群HTLV-I抗体阴性；5734名本地无偿献血者中发现1例HTLV-I感染，PCR确证仍为阳性，阳性率为0．17‰。获得1株同属世界群世界人种亚型的HTLV-I毒株的部分核酸序列。结论建议在本地区无偿献血员中开展HTLV-I常规筛查。