草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白的原核表达

根据草鱼呼肠孤病毒广东株GCRV-GD108编码VP5的M5基因的cDNA序列,分别设计合成带特定酶切位点的特异引物,进行PCR扩增;通过酶切与连接,构建2种重组表达载体pET30c-M5和pColdⅡ-M5,分别转化于大肠杆菌并进行诱导表达;对培养基、诱导时间、诱导剂浓度和温度等条件进行优化,确定最适表达体系.通过SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定.结果显示,所构建的2种VP5蛋白原核表达载体,均在大肠杆菌中成功表达了分子质量大小(约80 ku)与预期相符的重组蛋白,表达产物主要存在于包涵体中.诱导表达后的菌体经离心、洗涤与超声破碎,离心收集包涵体.包涵体通过变性、透析与复性,获得纯化的重组蛋白,其中pET30c-M5/BL21 (DE3) 工程菌的目的蛋白占全菌蛋白的22.5％,纯化后获得了高纯度的重组蛋白(＞95％).比较2种表达载体的表达结果,pET30c-M5具有诱导表达耗时少、获得重组蛋白量大的优势,可为下一步的研究提供足量的蛋白.     

生态香冬瓜高产栽培

生态香冬瓜在市场上供不应求,风味独特,深受广大消费者喜爱。为保护特色香冬瓜品种,并提高生态香冬瓜产量和产值,打造高原特色农业品牌,提高产品质量和市场竞争力,从种子处理、播种育苗、定植、田间管理、病虫害防治、采收等方面总结了生态香冬瓜优质高产的栽培技术。     

猛海县紫山药高产栽培技术

紫山药,云南省西双版纳傣族称麻地咪索(意思是紫色熊掌山药),是云南省猛海县目前开发的高原特色农产品,具有很大的开发培植潜力。根据近年种植经验,从种薯处理、种植、管理等方面阐述紫山药高产栽培的技术措施,以期促进这项技术推广应用。