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摘要采用已构建的原核重组质粒pET30a-Om pK为模板,通过PCR扩增Om pK成熟肽基因片段,引入酶切位点后克隆至分泌表达载体pPIC9K,经Sal I线性化后,氯化锂法转化至毕赤酵母GS115中,并经G418遗传霉素筛选高拷贝酵母转化子,最后进行甲醇诱导表达,表达上清经SDS-PAGE电泳检测及Western-... 相似文献
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宁波地区贝类产品中副溶血弧菌的分离与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从2007年3月至6月,在宁波市5个不同的农贸市场共采集贝类样品360份,分离菌株71株,其中5株代表菌株革兰氏染色阴性、弧状、具极生单鞭毛,利用葡萄糖、甘露醇产酸,不利用乳糖、蔗糖,精氨酸双水解酶阴性,VP试验为阴性,赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶为阳性,靛基质、甲基红试验阳性,不产生H2S,初步判断为副溶血弧菌;进一步进行了基于16S rRNA和toxR序列的PCR检测,序列测定结果验证了该5株细菌确实为副溶血弧菌.以16S rRNA序列为基础,分析了分离株与相关细菌菌株的同源性,构建了系统发育树. 相似文献
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大黄鱼弧菌病综合防治对策的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在5月下旬用哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)灭活菌苗对大黄鱼(Pseudosciaena crocea)幼鱼进行浸泡免疫,7月至8月高温季节投喂添加防病药物或者uharveyi灭活菌苗的配合饲料,进行了综合防病试验。试验结果表明,uharveyi灭活菌苗浸泡免疫接种可以有效地预防uharveyi对受免大黄鱼的感染,但是,受免鱼对副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)的感染则没有显著的保护;高温季节投喂添加药物的配合饲料能够有效地降低大黄鱼的死亡率,而将药物添加在鱼糜中后的投喂方式则不能获得明显防病效果;对受免鱼口服灭活菌苗后在56d内仍然可以观察到加强免疫效果。 相似文献
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投喂中草药对大黄鱼几种免疫酶活性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以不同中草药配制的药物饵料投喂大黄鱼,比较大黄鱼的白细胞吞噬活性、血清溶菌酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶等非特异性免疫指标及对致病性假单胞菌人工感染抵抗力的差异。试验结果表明,投喂不同中草药饲料28 d内,血清溶菌酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶均随饲料投喂时间的延长而升高;投喂28 d后,各试验组血清溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性均显著高于对照组(P<0.05),其中党参组大黄鱼超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性显著高于其他组(P<0.05);在假单胞菌人工感染中,黄芩组、黄芪组和党参组表现出一定水平的保护力,其他中药组没有明显保护效果。本研究提示,饲料中添加黄芪、黄芩和党参能有效提高大黄鱼非特异性免疫功能,但不足以保护免于特异性的感染。 相似文献
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近年来 ,因为市场需求的扩大 ,浙江省沿海的青蟹养殖发展很快 ,但是 ,疾病也越来越频繁地发生 ,给养殖业带来了严重的损失。宁波市沿海是浙江省最主要的青蟹养殖海区 ,以下是该地区青蟹的主要疾病种类及防治措施。一、主要疾病种类目前危害宁波地区养殖青蟹的主要疾病为“黄水病”、黄黑斑病、长毛病和脱壳不遂等。1.“黄水病”青蟹“黄水病”在每年的5月至10月均可发生 ,有两次发病高峰 ,一次是5月下旬至6月初的梅雨季节 ,另一次是9月至10月。宁波地区各地都有发生 ,发病率和死亡率均较高。病蟹消瘦 ,体色暗 ,关节膜处呈黄色或浊… 相似文献
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哈维氏弧菌的血清型与菌苗抗原性的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
采用不同血清型哈维氏弧菌Vibrio hanwyi624、809和106等3个菌株,制备成福尔马林灭活菌苗,注射接种大黄鱼4周后,通过血清中凝集、交叉凝集抗体效价测定以及活菌攻毒试验,证明了3个菌株制备的菌苗抗原性存在差异。 相似文献
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不同方法灭活的哈维氏弧菌菌苗对异育银鲫的免疫原性比较 总被引:2,自引:0,他引:2
将哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)制备成福马尔林灭活菌苗(formalin killed V.harveyi,F-VH),苯酚灭活菌苗(phenol killed V.harveyi,P-VH)和热灭活菌苗(heat killed V.harveyi,H-VH),以注射法接种异育银鲫(Carassius auratus gibelio)后,通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价,头肾及血液中吞噬细胞的吞噬活性和杀菌活性,对用不同方法制备的3种灭活菌苗的免疫原性进行了比较。结果表明,3种不同方法制备的V.harveyi菌苗对异育银鲫均显示出较强的免疫原性,其中以F-VH的免疫原性最强,P-VH其次,而H-VH的免疫原性较弱。说明用福尔马林灭活V.Harveyi较用苯酚和热灭活方法更有利于保护V.harveyi菌体的有效抗原。 相似文献
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采用RT-PCR方法扩增和克隆了鲈鱼白细胞介素-8(LjIL-8)的编码阅读框。该编码阅读框由300个核苷酸组成,编码由99个氨基酸组成前体蛋白。LjIL-8氨基酸序列与哺乳动物和鱼类IL-8类似物的氨基酸同源性分别为23%~48%和25%~92%。氨基酸序列分析表明,N端存在一长23个氨基酸的信号肽,含有形成2个链内二硫键的4个半胱氨酸。分子进化分析表明,LjIL-8与欧洲鲈鱼的亲缘关系最近。将LjIL-8编码序列克隆到原核表达载体pET-28a (+),转化E.coli BL21(DE3)后用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE检测结果表明,预期分子量大小的小分子蛋白在大肠杆菌中成功表达,Western-blotting检测结果显示,目的蛋白能与抗6×His单克隆抗体发生特异性反应。 相似文献