植物基因印迹及其对种子发育的影响

基因印迹最先发现于哺乳动物的胚胎发育中,近些年研究表明也存在植物种子发育中.基因印迹成为当前植物种子发育生物学的研究热点.从印迹基因、印迹机制及其对植物种子发育的影响等方面综述了植物种子发育中基因印迹的研究进展,并提出研究中存在的问题及其解决对策,旨在为今后相关研究提供参考.     

油菜高效转化系统的研究

以甘蓝型油菜湘油13为试验材料，运用子房注射法将BT毒蛋白基因导入油菜。在授粉后第20小时至第30小时用自制的微玻针从子房中部注射0.5~1.5μg外源DNA，以高达12.8%的频率获得抗卡那霉素植株。分子杂交分析证明BT毒蛋白基因已整合到油菜基因组中，转化频率为1.6%，表明子房注射法是一种有效、实用的油菜遗传转化方法。     

利用花序轴组培快繁青花菜萝卜胞质雄性不育系的研究*

 以萝卜胞质不育型青花菜的幼嫩花序轴为外植体进行组织培养，可成功诱导出苗。将幼嫩花序轴接种到不同激素配比的诱导培养基上，均有愈伤组织产生，其中在MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L培养基培养效果最好，诱导率高达100%；用MS + NAA 0.01mg/L +KT 0.2mg/L + 6-BA 0.5mg/L分化不定芽时，不定芽分化效果最好，芽分化率可达6.16；用1/2 MS + NAA 0.2mg/L进行生根培养，生根率高达86.7%，平均根数13.5条，在一定的温度和湿度条件下培养，移栽成活率可达85%以上。     

甘蓝型油菜与紫罗兰远缘杂交的初步研究

远缘杂交是进行育种和种质创新的一条重要途径,通过远缘杂交可以转移异种属见的遗传物质,因此在育种上得到广泛应用①.甘蓝型油菜(BrassicanapusL.)是世界上栽培面积最大的油菜类型,而现有甘蓝型油菜品种的改进必须有丰富而有价值的基因资源作基础,但这些有益资源在甘蓝型油菜中十分有限,可是在十字花科其它属中基因变异十分广泛.因此,通过各种育种途径拓宽甘蓝型油菜的遗传基础,扩大其种质资源,受到全世界油菜生产国家的高度重视.从1917年Kajanus第一次报道甘蓝型油菜(B.napus)与芜菁(B.rapa)种间杂交成功,到李再云通过甘蓝型油菜与诸葛菜属间杂交,在世界上首次获得属间杂种②③④,甘蓝型油菜杂交已涉及到与其它种以及邻近的一些属间杂交⑤,但油菜与紫罗兰杂交还未见报道.     

供水水平对烤烟镁积累量和烟叶含镁率的影响

针对中国南方烟区烤烟缺镁症发生较为普遍的问题，1996年在云南昆明通过盆栽试验，研究了在不同供水水平下，烤烟不同生育时期镁积累量，各器官干物重与烟叶含镁率之间的关系，结果表明，干物重远远大于镁积累量对烟叶含镁率的影响，干旱对团棵期，旺长期的根，茎，叶干物质积累极为不利；供水过多对旺长期茎的生长不利；成熟期各供水水平对根，茎生长影响不显著，而对叶重和叶面积的影响极为显著；烟叶含镁率与根重，茎重，叶重，叶面积之间，各个生育时期均呈负相关，但成熟期叶重，叶面积与烟叶含镁率呈极显著负相关。     

农杆菌介导转化甘蓝型油菜大田植株小孢子*

 以甘蓝型油菜花油3号、湘油15号大田植株的小孢子为受体,进行了农杆菌介导转化,PCR检测证明获得了转基因植株。侵染比例为1.0,共培养时间为24h,植株生长阶段选择(植株再生后),农杆菌介导转化甘蓝型油菜小孢子的频率最高,花油3号为1.21株转基因植株/花蕾,湘油15号为0.51株转基因植株/花蕾。     

山东丹参细胞悬浮培养体系及生长模型的建立

【目的】建立和了解山东丹参疏松愈伤组织和悬浮细胞生长规律。【方法】以叶片为外植体研究疏松愈伤组织诱导增重以及细胞悬浮培养体系,并对疏松愈伤组织和悬浮细胞进行生长模型的拟合。【结果】疏松愈伤组织最佳诱导和增殖培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+KT 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+酸水解酪蛋白1g/L,细胞悬浮培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+KT 1.5mg/L+6-BA 3.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+酸水解酪蛋白1g/L。【结论】山东丹参疏松愈伤组织和悬浮细胞生长曲线为"S"型,Richards方程模型能够很好地描述疏松愈伤组织和悬浮细胞生长曲线变化。     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。     

根癌农杆菌介导的枣树遗传转化系统的建立

经比较影响根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化枣树的各种因素后,建立了稳定的转基因实验体系.预培养2d的枣树嫩梢段和下胚轴经根癌农杆菌感染后共培养3d,转移至分化选择培养基MS(1/2NO3) 0.15 mg/l NAA 1.75 mg/l ZT 10 mg/l Km 500 mg/l Carb上诱导产生不定芽,将抗Km不定芽先后在20 mg/l Km的生长培养基和30 mg/l Km生根培养基上继续选择,诱导成完整植株,转化率为2%-4%.经PCR检测和Southern杂交证实有6株外源基因已整合到了枣树基因组中.     

Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜中的动态表达与其抗虫性研究

采用ELISA方法检测Bt杀虫基因在转基因油菜植株中的表达。试验结果表明：在第3至9叶期Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜植株中稳定、高效地表达,Bt杀虫蛋白的表达量为170ng/25mg-260ng/25mg鲜叶,占植物可溶性蛋白的0．067％－0．105％,其抗早效果高达42．5％－80．0％。但从第11叶期后Bt杀虫蛋白表达量显著地降低,只有7ng/25mg-50ng/25mg鲜叶,占植物可溶性蛋白的0．03％－0．02％。