台湾杉ISSR反应体系的建立及检测

在保持1U Taq酶和0.2 mmol/L dNTP两个条件不变的情况下,通过对模板DNA的浓度、引物浓度与Mg2+浓度的筛选,建立了台湾杉的优化ISSR反应体系,即在25 μ1的反应体系中,含有40 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.2 mmol/L dNTP、0.4μmol/L引物、1.8 mmol/L Mg2+、2.5 μL 10×buffer.扩增程序为:94℃,4 min; 94℃,45s,51～56℃,45s,72℃,2 min,40个循环;72℃,7 min.利用这种优化的反应体系,筛选出了10条稳定性强、清晰度高并表现出一定多态性的ISSR引物,并进一步筛选出了这10条引物的最佳退火温度.应用这些引物对分布于湖北利川市星斗山保护区的台湾杉野生居群的20个样品进行了扩增,结果表明,利川星斗山台湾杉居群的多态位点百分率为61.97％,Nei's基因多样性和Shannon's信息指数分别为0.136 9和0.216 0.     

桂花胚和胚乳发育过程的研究

采用石蜡切片法，观察了桂花胚和胚乳的发育过程。结果表明，桂花胚胎发生类型为柳叶菜型。其卵细胞受精后，合子经过一段时间休眠，于10月中，下旬才进行第1次分裂，合子分裂通常发生在初生胚乳核分裂之后，合子经棒形胚，球形胚，心形胚，至果实成熟时发育为鱼雷胚。心形胚时期，胚柄最为发达。桂花的胚乳发育类型为细胞型。二核胚囊时，珠被内层特化为珠被绒毡层，球形胚时，珠被绒毡层细胞发生形变，最后构成种皮的最内层。     

蜡梅AFLP-银染体系的建立与优化

为了建立蜡梅AFLP-银染的优化体系,采用EcoRI和MseI 2种限制性内切酶酶切组合,对该2种酶的用量、酶切时间、预扩增与选择扩增中的Mg2 浓度、Taq DNA聚合酶的用量、引物的浓度以及预扩增产物的稀释倍数等因素进行了多水平的筛选,同时探讨了温度及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的电流强度等因素对胶图的影响。结果表明:用5 U限制性内切酶酶切4 h便能在40μL的反应体系中完全切割500 ng的总DNA,酶切连接产物稀释10倍后在含有1.5 mmol/L Mg2 1、U Taq、预扩增引物E A和M C分别为40 ng的20μL反应体系中进行预扩增,将预扩增产物稀释30倍后在含有1.5 mmol/L Mg2 、0.6 U Taq、选择扩增引物E 3为30 ng、M 3为60 ng的20μL的体系中进行选择性扩增,能够得到质量比较好的AFLP胶图。此外,在进行PAGE电泳和硝酸银染色,将电泳的温度控制在50℃左右,电流控制在45~60 mA左右能提高胶图的质量。利用这种优化的反应体系,成功地评价了40个蜡梅基因型的遗传多样性,6对选择扩增引物组合表现出较高的稳定性、清晰度和多态性,它们分别是:E-AAC/M-CCC,E-ATC/M-CCC,E-AGA/M-CAG,E-AAA/M-CAC,E-ATA/M-CCA,E-ATT/M-CCA。     

从认知角度探讨园林树木学课程教学改革

园林树木学是系统研究园林树木的学科,具有综合性、实践性强的特点。针对学生在学习园林树木学课程时存在的只是简单识记知识点、缺少深层认知的问题,从认知角度提出园林树木学课程教学改革的建议。首先,在教学内容方面突出4种认知,即园林树种形态和习性的认知、园林树木观赏特性的认知、园林树木的空间认知和园林树木的文化认知。其次,从教学方法和手段的角度注重培养学生的认知能力,遵循认知理论,科学地安排树种的讲授顺序;利用多种教学方式,强化学生对知识点的认知。最后,在教学环节方面注重认知的再现,针对不同的教学内容,培养学生的自主认知;在实践教学环节中巩固学生的认知;在理论课与实践课有机结合的基础上,加强课后认知。     

高校生态校园建设中的植物配置对策

生态校园是一个建立在遵循生态规律基础上的和谐有序、稳定性好的校园群落环境.通过对华中农业大学生态环境现状的深入分析,总结生态校园建设特别是植物配置中存在的典型问题,提出建设性意见.以重要生态节点的植物配置为例,充分体现环境、人文、景观等综合效益,为实际规划建设提供参考.     

桂花单性结实现象的初步探讨

对桂花单性结实现象进行了研究。结果表明：桂花某丹桂品种无籽果实的形成是他动型单性结实的结果；具单性结实性丹桂的花粉生活力较低，且不能形成功能性花粉管，但雌性器官具有育性；在果实发育早期子房内的4个胚珠同时膨大，可能是引起单性结实的胚胎学因子之一。     

3种含笑属植物花粉生活力的测定

以阔瓣含笑、平伐含笑、含笑为材料,对这3个树种的花期进行跟踪观察,并且采用TTC染色法和固体培养基法对它们的新鲜花粉和4 ℃低温下保存的花粉进行了生活力的测定.结果表明:培养基中蔗糖浓度对花粉萌发具有明显影响,阔瓣含笑花粉的最佳萌发浓度为10%,而平伐含笑和含笑的最佳萌发浓度均为15%;TTC染色法测定的花粉生活力比萌发法高;4 ℃低温保存条件下,阔瓣含笑花粉的可贮藏时间最短,约40 d后花粉便失去了生活力,而含笑和平伐含笑的花粉贮藏40 d后的萌发率分别为28.77%、32.01%.     

浅谈专业基础课教学改革与学生能力培养的整合——以园林树木学课程为例

该文以园林树木学课程为例，围绕学生学习能力、实践能力、创新能力以及合作与交流能力的培养，探讨专业基础课教学与学生能力培养的关系，提出系统整合课程体系、教学内容、教学方法和教学手段的改革措施，从科学安排教学内容、改革教学方法和手段、促进教学互动和教研结合、完善课程考核和成绩评价办法等方面，加强学生能力的培养。     

桂花受精作用的研究

对桂花开花前后雌雄蕊的发育状态与受精作用进行了研究，结果表明：在金桂中存在2种性别的植株，两性株（雌、雄均可育）和雄株（雄性可育、雌性不育）。两性株开花时，多数胚囊处于2核至4核期，花后约4d开始出现成熟胚囊。成熟胚囊由1个卵细胞、2个助细胞和2个互靠近的极核组成，3个反足细胞已退化。成熟花粉粒为二细胞型，在桂花中存在一定比例的二型花粉，FDA染色法显示，桂花花粉的生活力较低，开花后5－7d，胚囊开始受精。花粉管进入胚囊，穿过1个助细胞，释放出2个精子。精卵融合速度慢于精子与极核的融合。受精前两极核不一定融合成次生核。受精作用持续时间约为6－20d。双受精作用属有丝分裂前型。     

台湾杉DNA提取及RAPD反应体系的建立

台湾杉富舍多糖和多酚等物质,这对获取高质量的DNA造成了困难,采用常规CTAB法和改良的CTAB法分别对台湾杉DNA的提取进行了研究.结果表明,常规CTAB法提取的DNA含杂质多、难溶解、易降解;改良的CTAB法提取的DNA质量高,A260/A280比值在1.8左右,每1.0 mg干样可获取DNA200～600ng左右;电泳检测表明,所获得的DNA完整、无降解.通过对台湾杉RAPD-PCR反应体系中的各个影响因素进行优化,建立了台湾杉RAPD扩增分析的稳定反应体系.即20μL反应体系中舍1UTaqDNA聚合酶,0.2 mmol·L-1 dNTPs,1.8 mmol·L-1 Mg2 ,0.4μmol·L-1引物,40 ng模板DNA.应用优化后的反应体系PCR扩增获得的RAPD指纹图谱,带型清晰,重复性好,为进一步开展台湾杉的保育遗传学研究奠定了基础.