枯草芽孢杆菌突变株的构建及其对猪肺泡巨噬细胞(MΦ3D4/2)免疫因子表达的影响

试验旨在研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)不萌发芽孢和不生孢营养体对猪肺泡巨噬细胞(MΦ3D4/2)免疫因子表达的影响。利用同源重组敲除B.subtilis PY79芽孢萌发基因clW-gerD和生孢早期基因spo0A,构建芽孢不萌发突变株B.subtilis clW-gerD-和不生孢突变株B.subtilis spo0A-,提取基因组DNA进行PCR检测;结合革兰氏染色和萌发率检测,分别对构建的B.subtilis芽孢不萌发突变株和不生孢突变株进行萌发和生孢能力鉴定;将B.subtilis clW-gerD-和B.subtilis spo0A-分别与猪肺泡巨噬细胞共培养,用ELISA试剂盒检测细胞因子分泌表达水平。结果表明:(1)成功获得不萌发突变株B.subtilis clW-gerD-和不生孢突变株B.subtilis spo0A-;(2)萌发和生孢能力检测结果显示,B.subtilis clWgerD-完全丧失芽孢萌发能力;显微镜观察和生孢率检测表明不生孢突变株B.subtilis spo0A-丧失了生孢能力;(3)B.subtilis clW-gerD-极显著的促进了细胞因子IL-6的表达(P0.01);B.subtilis clW-gerD-、B.subtilis PY79和B.subtilis spo0A-对细胞因子IL-1β、IL-10和IL-8的表达量无显著影响(P0.05)。B.subtilis clW-gerD-可刺激巨噬细胞分泌促炎因子IL-6,增强MΦ3D4/2细胞的炎症反应,提高机体的抗感染能力。     

小麦 TaPLC1基因与耐热的相关性研究

小麦磷酸肌醇特异性磷脂酶C（phosphoinositide-specific PLC，简称PI-PLC）在小麦抗逆过程中具有重要作用。为研究 TaPLC1基因与小麦耐热性的关系，选用热敏感型品种中国春(CS)和耐热型品种TAM107，在一叶一心期用PI-PLC抑制剂U73122处理，在两叶一心期进行40 ℃热胁迫处理，对小麦植株的部分生理指标（MDA、SOD、叶绿素和可溶性糖含量）及 TaPLC1基因的表达模式进行测定。结果表明，在两个品种中，抑制剂处理较未处理的幼苗叶片MDA、SOD及可溶性糖含量均升高，叶绿素含量下降，中国春的变化幅度大于TAM107。 TaPLC1基因在两个品种中呈现不同的表达模式，但表达量均在热胁迫30 min达到最大值。随着热处理时间的延长，未经抑制剂处理的TAM107叶片中 TaPLC1的表达量变化幅度明显大于处理叶片，抑制剂处理的TAM107对热胁迫响应不显著；而未经抑制剂处理的中国春叶片中 TaPLC1的表达量变化幅度与抑制剂处理的叶片差异不显著，均在一定程度上响应热胁迫；未经抑制剂处理的叶片，TAM107中 TaPLC1表达量的变化幅度明显大于中国春。热胁迫后，中国春幼苗出现明显萎蔫现象，TAM107轻微萎蔫，停止热胁迫后，全部幼苗萎蔫逐渐恢复，而抑制剂处理的幼苗叶尖开始枯萎变黄，热胁迫处理4 h后第5天表型较为明显，品种之间枯萎变黄程度无明显差异。以上结果说明，抑制 TaPLC1基因的表达后，幼苗对热胁迫的敏感性增强，TAM107和中国春的耐热性可能与 TaPLC1的表达有关。     

三个小麦新品种不同生育阶段抗旱性的综合评价

为了解三个小麦新品种西农538、西农556和西农558的抗旱性,以抗旱性不同的三个生产上大面积推广的小麦品种晋麦47、小偃22和西农979为对照,在大田自然干旱和人工灌水条件下,分别测定和分析了不同生育时期与抗旱有关的小麦生理指标(SOD活性、POD活性、CAT活性、丙二醛含量、脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、叶绿素含量、相对电导率、相对含水量)及农艺性状(株高、小穗数、穗粒数、穗下节长、穗长、单穗粒重、千粒重、小区产量),并运用主成分分析、隶属函数和聚类分析方法对六个品种的抗旱性进行综合评价。结果表明,干旱条件下,不同单项指标对小麦品种抗旱性的反映存在差异,不同指标间存在不同程度的相关性。通过主成分分析,在拔节期、抽穗期和灌浆期,将9个生理指标和株高转换为3个相互独立的综合指标;在成熟期,将9个农艺性状指标转换为2个相互独立的综合指标,四个时期的累计贡献率依次达到了93.67%、87.16%、92.29%和89.56%。通过对这四个时期的抗旱性综合评价值(D值)进行聚类分析,可将6个小麦品种分为三类,其中西农538与晋麦47属于强抗旱型品种,西农558与小偃22属于中等抗旱型品种,西农556与西农979属于弱抗旱型品种。     

公猪的饲养管理

1饲养原则 提供所需的营养以使精液的品质最佳,数量最多;为了交配方便,延长使用年限,公猪体重不应太大,这就要求限制饲养。最好选用特制公猪料,日喂2次,每头喂2．5～3．0kg／d,适当补充维生素,配种期每天补喂一枚鸡蛋,每餐不要喂得过饱,以免猪饱食贪睡,不愿运动造成过肥,喂鸡蛋于喂料前进行。     

沙地刚性轮构型仿生设计及牵引性能数值分析

为了提高车轮牵引性能,改善车辆在松散沙土介质环境的通过能力,该文以善于沙地奔跑的鸵鸟足部关键部位—足趾甲为仿生原型,通过仿生优化轮刺结构,设计出具有高牵引性能的仿生轮刺式沙地刚性轮,并以一种模拟月壤作为试验松散沙土介质材料,采用离散元软件PFC2D?的内置语言FISH和相关命令,建立了适用于非规则结构刚性轮的轮壤相互作用动态模拟系统,并获得试验验证。通过仿生轮刺式刚性轮与模拟月壤相互作用离散元模拟,并与矩形轮刺式刚性轮模拟结果对照,从轮下模拟月壤颗粒细观运动、接触力场、速度场以及车轮挂钩牵引力角度,验证了仿生轮刺式刚性轮具有优越的牵引性能,在车轮滑转率50%的稳定运行状态下,仿生轮刺式刚性轮的牵引性能可提高5.2%左右。该研究为提高刚性轮在松散沙土介质环境中的牵引性能提供了全新设计和研究手段。     

人白介素-2基因打靶载体的构建、转染及鉴定

为研究人白介素2基因在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达，构建人白介素-2基因的山羊β-酪蛋白位点打靶载体。以质粒pBCI为模板扩增山羊β-酪蛋白上游2．5kb和下游3．5kb的序列作为5’和3’同源臂，将克隆得到的人白介素2基因和neo基因插入到2个同源臂之间，获得山羊β-酪蛋白基因打靶载体pBN153。利用脂质体将重组质粒转染奶山羊胎儿成纤维细胞进行G418筛选，并采用PCR和实时定量PCR方法对人白介紊-2基因在稳定株中的表达进行验证。检测结果表明，本试验构建的打靶裁体pBN153成功转染奶山羊胎儿成纤维细胞，将人白介素2基因成功整合至奶山羊胎儿成纤维细胞基因组中，为通过体细胞核移植法制备人白介素-2基因乳腺生物反应器的研究奠定了基础。     

低能日粮中添加木聚糖酶对肉仔鸡生产性能和养分利用率的影响

为了验证自产木聚糖酶的添加效果并确定其适应添加量,将180只健康且体质量接近的1日龄AA肉仔鸡,随机分为6组,每组6个重复,每重复5只。分别添加5个水平(0、500、1 000、1 500和2 000 U/kg)的自产木聚糖酶及1 000 U/kg的商品酶,研究其对肉仔鸡生产性能、养分利用率的影响,并比较自产酶与商品酶饲养效果。结果表明,与对照组比较,添加1 000 U/kg自产木聚糖酶可显著提高日增体质量、蛋白质利用率、能量利用率及粗纤维利用率(P<0.05),并显著降低平均日采食量和料肉比(P<0.05)。添加自产木聚糖酶1 000 U/kg与商品酶1 000 U/kg相比,日增体质量、采食量、料重比和蛋白质、能量及粗纤维利用率均没有显著性差异(P>0.05)。     

母猪的管理要点

1 后备母猪的饲养管理要点1.1 75kg后备母猪当后备母猪体重达到75kg时,饲喂母猪料,最好是专门的后备母猪料,适当调整饲料配方,以保证后备母猪适宜的肥瘦度.1.2 105kg后备母猪这时需要接种疫苗并用公猪诱情刺激,每种疫苗接种时间最好间隔7d.     

枯草芽孢杆菌bioW基因在大肠杆菌中的表达及其对宿主生长的抑制作用

【目的】克隆枯草芽孢杆菌(B.subtilis)生物素基因(bioW),在bioW基因缺陷型大肠杆菌中进行表达,探讨其对bioW基因缺陷型大肠杆菌的遗传互补作用和对宿主的生长抑制作用,为生物素基因工程菌的构建奠定基础。【方法】用大肠杆菌表达载体pEXT20和枯草芽孢杆菌bioW基因构建表达载体pEXT20-bioW,并将其转化到大肠杆菌DH5α和生物素基因缺陷型大肠杆菌株R876中,构建重组菌DH5α(pEXT20-bioW)和R876(pEXT20-bioW)。分别将R876、DH5α(pEXT20-bioW)、R876(pEXT20-bioW)在不同培养基和不同IPTG浓度下进行培养,检测bioW基因对bioW基因缺陷型大肠杆菌株的遗传互补和生长抑制作用。【结果】在生物素限制性培养基中,只有同时加入庚二酸和IPTG时,R876(pEXT20-bioW)才能生长。在不含IPTG的LB培养基中,R876(pEXT20-bioW)生长正常;在添加不同浓度IPTG的LB培养基中,DH5α(pEXT20-bioW)和R876(pEXT20-bioW)生长均受到不同程度的抑制。【结论】bioW基因对bioW基因缺陷型大肠杆菌有遗传互补作用。在大肠杆菌中,bioW基因的表达对宿主有生长抑制作用。