干酪乳杆菌功能及应用的研究进展

益生菌作为一种无毒、无害、无残留、无耐药性的绿色饲料添加剂,已成为抗生素替代品的一个热门研究方向。干酪乳杆菌作为最早录入《饲料添加剂品种目录》的益生菌之一,可对动物机体产生多种显著的益生功效,在实际生产中也被广泛应用。文章主要对干酪乳杆菌的分类、功能特性、在生产上的应用现状及前景进行了综述。     

绿色荧光蛋白穿梭载体的构建及其在嗜酸乳杆菌中的应用

为深入研究嗜酸乳杆菌的作用机理,以温敏型穿梭载体pSET4s为基本骨架,将绿色荧光蛋白(GFP)和嗜酸乳杆菌上、下游同源臂插入该载体,构建GFP标记的穿梭表达载体pSET4s-P1-GFP-P2。利用电转化方法将穿梭表达载体pSET4s-P1-GFP-P2转化入嗜酸乳杆菌,通过抗性和温度双重筛选获得能稳定表达GFP的重组嗜酸乳杆菌,将Western blotting和荧光显微镜观察验证的重组菌命名为ΔMG6243(GFP)。利用荧光显微镜观察和平板计数的方法对重组菌进行遗传稳定性和生物学特性研究。结果显示,重组菌在蓝光激发下可见明显绿色荧光,连传10代仍可见明显荧光,与野生菌相比,其生长特性、酸碱盐耐受性均无显著差别。结果表明,本试验已成功构建稳定表达GFP基因的重组嗜酸乳杆菌,利用温敏型穿梭载体pSET4s实现了外源基因在嗜酸乳杆菌中非抗性、整合型表达,为嗜酸乳杆菌基因重组菌的构建奠定了基础,同时GFP的标记作用也为嗜酸乳杆菌在动物体内分布、定植规律和作用机理创造了可行的条件。     

益生性屎肠球菌HDRsEf1对雏鸡盲肠菌群发育的影响

研究益生性屎肠球菌HDRsEf1株和抗生素对白羽肉雏鸡科宝500盲肠肠道菌群发育情况的影响。采用荧光定量PCR检测方法,确定该株屎肠球菌能在雏鸡盲肠中定植后,选取180只新生1日龄白羽雏鸡科宝500随机分成对照组、益生菌组和抗生素(金霉素)组,分别在7、14、21、28、35、42日龄无菌快速采集盲肠内容物,用RT-PCR法检测盲肠中乳酸杆菌和大肠杆菌的数量,用DGGE技术检测盲肠肠道菌群的变化情况。结果显示,益生菌的添加可以显著降低雏鸡21日龄盲肠大肠杆菌的数量,显著增加42日龄盲肠乳酸杆菌的数量。DGGE结果显示,雏鸡盲肠菌群从7日龄到14日龄为一个过渡期,从14日龄到42日龄为相对稳定期。益生菌和抗生素的添加可以促进肠道菌群在过渡期更有效地完成过渡,在稳定期维持更稳定的状态,而抗生素的添加作用相反。