硅藻土吸附固定化Bacillus sp.DL-2胞内蛋白酶拆分制备(S)-乙酸苏合香酯

[目的](S)-乙酸苏合香酯是手性药物合成的关键手性砌块,其在多种手性化合物的合成及医药、香料的工业生产中具有重要的作用.传统的化学合成手性化合物的方法需要有毒有机溶剂及重金属的参与,对环境及人类具有严重的危害,同时得到的手性化合物的光学纯度较低.与传统的化学合成相比,酶法选择性拆分消旋体化合物,具有高立体专一性和区域选择性、副反应少、产率高、产物光学纯度好以及反应条件温和的优点,是一种被广泛认可的拆分方法.实验表明,Bacillus sp.DL-2胞内蛋白游离酶可拆分制备(S)-乙酸苏合香酯,然而游离酶不易回收且稳定性差,将Bacillus sp.DL-2胞内蛋白游离酶制备成固定化制剂,克服了游离酶对环境敏感,稳定性不高的缺点,为工业化生产(S)-乙酸苏合香酯奠定了基础.[方法]酶的固定化方法主要有物理吸附法、离子结合法、共价结合法、交联法和包埋法.以吸附法固定酶,酶的构象很少改变,因此,酶的催化活力损失较少;且吸附法固定化操作过程简单,因此吸附法在经济上是最具吸引力的固定化方法.硅藻土由硅藻的细胞壁沉积而成,硅藻土表面的多孔性与负电性使其呈现明显表面吸附性,因而被常用做吸附载体.以硅藻土作为固定化载体,对Bacillus sp.DL-2胞内蛋白酶进行固定化,用以拆分制备高光学纯的(S)-乙酸苏合香酯.利用单因素实验优化,确定制备固定化酶的最佳固定化条件及制备(S)-乙酸苏合香酯的最佳拆分条件,并测定了制备的固定化酶对金属离子的敏感度及储存稳定性.[结果]最佳固定化条件为:温度40℃,pH为7,固定化时间10 h,载体添加量100 g/L.在最佳固定化条件下制备了固定化酶,优化确定了制备(S)-乙酸苏合香酯的最佳拆分条件为:固定化酶用量为160 mg/mL,拆分时间7 h,拆分温度30℃,缓冲液pH为7.[结论]在最佳固定化及拆分条件下,制备的(S)-乙酸苏合香酯e.e.值可达到96.8％,转化率为73.9％,且固定化酶对金属离子敏感度较低,对反应环境要求较低,适用于工业化生产.固定化酶在4℃条件下储存,随保存周数的增加,e.e.值及转化率均逐渐降低,但4周后e.e.值仍能达到90.1％,转化率保持在66.6％左右,具备较高的储存稳定性,为工业化生产(S)-乙酸苏合香酯提供了参考.     

防风的栽培技术

通过对防风的生长习性和发育规律的了解、以及防风对外界生长条件的要求。探讨出防风人工栽培的生产技术。     

依靠科技支撑推动三江源自然保护区生态保护与建设

随着西部大开发战略的深入实施,三江源区生态的好坏,已成为全社会的焦点〔1〕。2003年,国务院将三江源区列为国家级自然保护区,2005年,以退牧还草、退耕还林、水土保持、生态移民、封山育林、“黑土滩”综合治理等为主要内容的生态保护和建设工程全面启动,以保护和恢复三江源区     

黄瓜茬口安排及栽培管理

1茬口安排 1.1越冬一大茬：一般在9月中旬播种,10月中旬定植,11月下旬始收,经冬、春、夏三个季节,翌年6～7月拉秧。 1.2秋冬茬：7月中下旬育苗,8月中下旬定植,根据不同地区气温条件适时扣棚,9月下旬采收,翌年1月初拉秧。     

大孔树脂吸附-交联法固定脂肪酶

【目的】为基于大孔树脂吸附结合环氧交联剂交联法固定脂肪酶等工业用酶奠定基础。【方法】使用大孔树脂吸附,而后环氧交联剂交联的方法进行脂肪酶的固定化,研究各因素对吸附–交联固定化的影响,并采用响应面法对固定化条件进行优化,制备固定化酶并考察其稳定性。【结果】筛选出大孔树脂HPD750为载体,聚乙二醇二缩水甘油醚为交联剂。最佳固定化条件为:吸附温度45℃,给酶量60 mg·g–1,交联温度30℃,交联时间12.5 h,pH6.36,交联剂体积分数为0.7%。由上述条件制备所得的固定化酶活力为565.31 U·g–1,酶活力回收率为32.16%。与游离酶相比,固定化酶的热稳定性和酸碱稳定性均有明显提升;连续操作10次,固定化酶活力仍保留34.86%,操作稳定性较好;4℃条件下储存30 d,固定化酶活力仍保留64.81%。【结论】大孔树脂HPD750为载体,聚乙二醇二缩水甘油醚为交联剂制备的固定化脂肪酶热稳定性、酸碱稳定性均得到显著提升,且具有良好的操作及储存稳定性。     

小型自走式稻麦联合收割机

小型自走式稻麦联合收割机河北省邢台联合收割机厂与中国农机院、邢台市机械研究所共同研制生产的小型自走式稻麦联合收割机填补了国内一项空白。该产品采用国内外收获机械轴流滚筒先进技术和工艺研制而成，结构设计独特、新颖，体积小，操作灵活方便。张继福小型自走式稻...     

水飞蓟引种及丰产栽培技术研究

水飞蓟(Lessed Thisteseed)别名奶蓟子等,原产于南欧至北非,为两年生植物,我国50年代开始引种,同时也进行了多方面的研究,在我国北方各地,由于气候温度条件的改变,使水飞蓟由两年生植物,改变为一年生植物,生育期120天。水飞蓟是以治疗肝病为主的药     

长白山野生药用植物园建设的研究报告

采用野外调查和引栽驯化相结合的方法,引进长白山区道地药用植物及外地药用植物,进行繁殖方法,栽培管理措施研究,建立药用植物标本圃。     

东北扁核木引种驯化及丰产栽培技术

东北扁核木是生长在长白山区的一种小灌木，通过引种驯化，已获成功，并开发利用。现已掌握集约化丰产栽培的技术，定植后第三年产量可达20kg-25kg，第四年可达50kg以上，这是一项开发山区荒山荒地、农民脱贫致富的好项目。