日粮鱼油对高脂日粮饲喂小鼠发情周期和机体产热的影响

本研究旨在探讨鱼油对高脂日粮饲喂小鼠发情周期和机体代谢产热的影响。试验选用36只4周龄C57BL/6 J雌性小鼠,随机分成3组（n=12）：对照组、高脂组和高脂+鱼油组。对照组饲喂标准啮齿动物饲料（AIN-93G）,高脂组和高脂+鱼油组分别饲喂高脂日粮（脂肪提供60%能量）和添加5%鱼油（等能替代猪油）的高脂日粮。试验期间,对小鼠体组成（12周龄）、整体代谢（16周龄）、褐色脂肪温度（18周龄）、体核温度（直肠温度,18周龄）和发情周期（20周龄）等进行检测。试验结束后,眼球采血分离血清,检测促卵泡激素（follicle-stimulating hormone,FSH）和雌二醇（estradiol,E2）的水平。此外,采集皮下脂肪、腹部脂肪和肩胛间褐色脂肪,称重并使用Western blot检测脂肪组织中产热相关基因的蛋白表达（UCP1、Cyto C）,使用实时荧光定量PCR检测褐色脂肪组织中产热基因的mRNA表达（UCP1, PRDM16,PGC1α,Cidea,Elovl3）。结果显示,与对照组相比,高脂日粮显著增加了小鼠的体脂含量（12周龄）及皮下和腹部脂肪的沉积量（21周龄）（P<0.05）,而添加鱼油显著降低了高脂饮食引起的体脂含量增加（P<0.05）。另外,高脂日粮导致小鼠的发情周期紊乱,伴随着周期延长、发情期缩短,以及血清中FSH和E2的水平降低（P<0.05）,而添加鱼油可缓解高脂日粮导致的小鼠发情周期紊乱,提高血清中FSH和E2的水平（P<0.05）。同时,添加鱼油可增加高脂饲喂小鼠肩胛间褐色脂肪（interscapular brown adipose tissue,iBAT）和腹股沟白色脂肪（inguinal white adipose tissue,iWAT）中产热相关基因的表达（P<0.05）,进而促进iBAT激活/产热和iWAT褐色化。结果提示,日粮鱼油可缓解高脂日粮导致的发情周期紊乱,可能与BAT激活和WAT褐色化造成的机体代谢产热增强有关。     

2种共轭亚油酸异构体对小鼠肌内脂肪沉积和肌肉线粒体代谢的影响

试验旨在研究不同共轭亚油酸异构体对小鼠肌内脂肪沉积和肌肉线粒体代谢的影响。将成长到5周龄的雄性小鼠按体重分成3组(每组8只),适应1周后分别饲喂不添加、添加2%的顺9反11共轭亚油酸(c9,t11-CLA)和添加2%的反10顺12共轭亚油酸(t10,c12-CLA)的日粮,正试期1个月,监测其体重和体组成的变化,饲养试验结束后采集血清检测甘油三酯和游离脂肪酸含量;采集肌肉检测甘油三酯含量,使用油红O染色直观检测肌内脂肪含量的变化;提取腓肠肌总RNA,通过使用荧光定量PCR方法检测腓肠肌部位与脂肪酸转运、线粒体合成和氧化代谢相关基因的变化。结果表明:日粮添加c9,t11-CLA和t10,c12-CLA异构体均可以降低小鼠体重和体增重、机体脂肪比例及血清甘油三酯含量(P<0.05),增加肌肉比例(P<0.05);与c9,t11-CLA异构体相比,日粮添加t10,c12-CLA异构体可以增加血清游离脂肪酸含量、小鼠肌肉甘油三酯和肌内脂肪含量(P<0.05),增加肌肉部位脂肪酸转运、线粒体生物合成和氧化代谢相关基因的表达(P<0.05)。由此可见,t10,c12-CLA...     

日粮添加鱼油对高脂日粮饲喂小鼠肠道屏障功能的影响

【目的】研究日粮添加鱼油对高脂日粮饲喂小鼠肠道屏障功能的影响。【方法】选用36只4周龄C57BL/6J雌性小鼠,随机分为对照组、高脂组、高脂+鱼油组,每组12只小鼠,分别饲喂基础日粮、高脂日粮、高脂日粮添加质量分数为5%的鱼油(等能替换高脂日粮中脂肪)。试验持续21周,每周测定小鼠采食量和体质量,期间测定小鼠肠道通透性以及粪便粗脂肪含量和能值;试验结束后,检测小鼠血清内毒素水平,检测小鼠肠道形态、杯状细胞的数量、肠道紧密连接蛋白和炎症因子的表达。【结果】与高脂组相比,日粮添加鱼油显著提高了小鼠采食量和能量摄入、降低了粪便中粗脂肪的含量和能量排出,显著降低了小鼠体质量(P0.05)。在肠道形态方面,与高脂组相比,添加鱼油使小鼠空肠和回肠的绒毛高度与隐窝深度比值(l V/d C)分别提高了43.1%和67.5%,使回肠绒毛杯状细胞的数量增多了16.7%(P0.05)。与高脂组相比,添加鱼油使血清荧光葡聚糖和内毒素水平分别降低了34.3%和50.4%(P0.05),并逆转了高脂日粮造成的肠道紧密连接蛋白表达的降低。在炎症因子表达方面,与高脂组相比,添加鱼油显著降低了空肠和回肠内促炎因子IL-8、IL-6和IL-1β的表达,同时显著增加了抗炎因子IL-10的表达(P0.05)。【结论】日粮添加鱼油可降低由高脂日粮导致的小鼠肠道屏障功能损伤,这可能与鱼油降低肠道炎症有关。     

猪BMSCs成脂分化中细胞膜钙离子通道、钙敏感受体及成脂定向相关基因表达研究

【目的】研究猪骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)定向分化为脂肪细胞过程中细胞膜上钙离子通道、钙敏感受体(Calcium-sensing receptor,Ca SR)基因及成脂定向相关基因的表达。【方法】从5~7日龄仔猪骨髓中分离纯化出猪BMSCs,诱导猪BMSCs成脂分化。油红O法和三酰甘油法检测细胞分化聚酯状况。在成脂分化不同时间(0、1、2、5和10 d)收集细胞,利用荧光定量PCR检测锌指蛋白423(Zinc finger protein423,Zfp423)、脂肪前体细胞因子(Preadipocyte factor 1,Pref-1)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2,BMP2)、骨形态发生蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)、细胞膜钙离子通道及Ca SR基因的mRNA表达变化。【结果】油红O染色和三酰甘油检测结果表明,成功诱导猪BMSCs成脂分化;定量PCR结果显示,在猪BMSCs成脂分化第5天,成脂定向标志基因Zfp423、脂肪前体细胞标志基因Pref-1及促进成脂分化基因BMP2、BMP4的mRNA相对表达量显著提高(P0.05),说明第5天是猪BMSCs成脂定向形成脂肪前体细胞的关键时期;同时,细胞膜上的电压门控钙离子通道亚基电压依赖型α/δ亚型1(Voltage-dependentalpha-2/delta subunit 1,CACNA2D1)、钙释放激活钙通道调节分子1(Calciumr elease-activated calcium channel modulator 1,Orai1)、瞬时受体电位通道传统型1(Transient receptor potential canonical type 1,TRPC1)、瞬时受体电位通道M型7(Transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)、瞬时受体电位通道香草素受体亚型1(Transient receptor potential vanilloid receptor1,TRPV1)基因和Ca SR基因在诱导成脂第5天mRNA相对表达量也显著提高(P0.05),提示细胞膜钙离子通道及Ca SR基因可能参与了猪BMSCs成脂分化过程。【结论】揭示了猪BMSCs成脂分化过程中细胞膜钙离子通道、钙敏感受体及成脂定向相关基因的表达模式。     

不同共轭亚油酸异构体对小鼠脂肪沉积、能量代谢和肠道微生物的影响

【目的】探究日粮添加不同共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)异构体对小鼠体脂、能量代谢和肠道微生物的影响。【方法】用普通日粮(对照组)、普通日粮分别添加质量分数为2%的顺9，反11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)和反10，顺12-共轭亚油酸(t10, c12-CLA)饲喂小鼠12周，检测小鼠脂肪含量、能量代谢和肠道微生物的变化。【结果】与对照组相比，c9, t11-CLA和t10, c12-CLA组小鼠体质量分别降低了22.79%和25.04%；脂肪含量分别降低了57.98%和59.41%；小鼠皮下脂肪、附睾白色脂肪以及褐色脂肪含量也显著降低。c9, t11-CLA和t10, c12-CLA均显著提高小鼠耗氧量和产热量，其中，t10, c12-CLA显著降低小鼠夜间的呼吸交换率。16S rRNA测序结果显示，3组小鼠的肠道微生物菌群结构存在明显差异，c9, t11-CLA和t10, c12-CLA组小鼠肠道中与机体代谢相关的菌群丰度显著高于对照组，且t10, c12-CLA能促进与脂质代谢相关的菌群丰度上调。在门水平，c9, t11-CLA和t10...     

饮水添加氯化钙对高脂日粮饲喂小鼠脂肪沉积和肠道菌群的影响

【目的】研究饮水添加氯化钙对高脂日粮饲喂小鼠脂肪沉积和肠道菌群的影响,为提高动物胴体品质和人体健康提供理论依据。【方法】选用27只4周龄C57BL雄性小鼠,分为高脂日粮组和高脂日粮+饮水添加氯化钙组,试验期13周。每周测定小鼠体质量,试验末测定小鼠体脂含量,试验结束后采集小鼠皮下脂肪、附睾脂肪并称质量。于试验后期10～12周采集小鼠粪便进行16S rRNA高通量测序,并分析对菌群的影响。【结果】饮水添加氯化钙显著降低了小鼠体质量、体脂含量、皮下脂肪指数和附睾脂肪指数,与高脂组相比分别降低了12.85%、32.69%、26.65%和18.60%。饮水添加氯化钙提高了小鼠粪便样中的菌群多样性和菌群丰度。在门水平下,饮水添加氯化钙对拟杆菌门Bacteroidetes、厚壁菌门Firmicutes、变形菌门Proteobacteria、脱铁杆菌门Deferribacteres、放线菌门Actinobacteria、软壁菌门Tenericutes的丰度无明显影响。在纲水平下,与高脂组相比,饮水添加氯化钙显著降低了丹毒丝菌纲Erysipelotrichia和放线菌纲Actinobacteria的相对丰度,并且显著提高了梭菌纲Clostridia的相对丰度。【结论】饮水添加氯化钙能够降低高脂日粮饲喂小鼠的体质量和体脂含量,这可能与饮水添加氯化钙提高了小鼠粪便菌群多样性和特定菌群丰度有关。     

高脂日粮对初情期小鼠乳腺发育的影响及分子机制

【目的】研究高脂日粮对初情期小鼠乳腺发育的影响及可能机制。【方法】选用20只4周龄昆明雌性小鼠,设对照组和高脂日粮组,试验期4周,每周称体质量并统计采食量。试验结束后采集小鼠乳腺并称质量,采用wholemount及HE染色观察小鼠乳腺组织形态结构及导管数量。利用Western blot检测初情期小鼠乳腺组织胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor1,IGF-1)、增殖相关信号通路关键蛋白蛋白激酶B(Protein kinase B,Akt)、胞外调控的蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinase,Er K)以及炎症信号通路关键蛋白Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和核因子κB激酶抑制剂(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase,IKK)的表达。【结果】高脂日粮组小鼠采食量极显著低于对照组(P0.01),但在能量摄入方面与对照组无显著差异。高脂日粮组小鼠的体质量增加显著高于对照组(P0.05)。高脂日粮组小鼠在乳腺质量、乳腺质量与体质量的比值上均极显著高于对照组(P0.01)。乳腺组织的whole-mount及HE染色结果表明,高脂日粮组小鼠乳腺导管发育明显被抑制,其乳腺组织的导管数和密度明显降低,乳腺组织的终末乳芽数量也极显著低于对照组(P0.01)。高脂日粮能够显著抑制小鼠乳腺组织IGF-I的蛋白表达以及Akt、Erk和IKK的磷酸化水平(P0.01或0.05),极显著促进小鼠乳腺组织TLR4的蛋白表达(P0.01)和显著促进JNK的磷酸化水平(P0.05)。【结论】高脂日粮能够抑制初情期小鼠乳腺发育,这可能是通过抑制乳腺增殖的相关信号和促进乳腺组织炎症的相关信号来实现。