青杄转录因子PwERF8及其启动子序列的克隆与分析

【目的】AP2/ERF是植物的转录因子家族之一,广泛参与生物胁迫和非生物胁迫过程。从青杄中克隆ERF类转录因子PwERF8及其启动子序列,研究PwERF8基因的表达特性、启动子序列功能,并进一步分析其对非生物胁迫的响应模式,为深入了解青杄的耐逆调控机制提供理论基础。【方法】通过RACE-PCR技术获得青杄PwERF8编码区全长序列。通过染色体步移技术克隆PwERF8启动子序列。通过PlantCARE在线软件和BDGP在线软件预测启动子序列上的顺式作用元件、基础启动子和转录起始位点,构建pBI121-PwERF8 promoter∷GUS启动子表达载体,采用农杆菌注射法瞬时转化烟草叶片来验证启动子的功能。构建PGBKT7-PwERF8载体,转化AH109酵母菌株验证其转录激活活性。构建35S∷PwERF8-GFP融合表达载体,通过PEG介导瞬时转化拟南芥原生质体进行基因表达的亚细胞定位分析,应用RT-qPCR技术分析该基因的组织特异性和在非生物胁迫下的时空表达特征。【结果】PwERF8基因的编码区全长序列共1 191 bp,开放阅读框共765 bp,开放阅读框翻译成255个氨基酸。在肽链的N端具有1个保守的由58个氨基酸组成的AP2结构域,在C端含有1个EAR转录抑制基序(DLNLPP)。组织特异性表达分析表明,PwERF8在茎、根、针叶、花粉、种子中均有表达,但在花粉中,PwERF8的表达量最高,其次为种子,在茎中的表达量最少。酵母单杂交试验表明,PwERF8蛋白不具有转录激活活性。亚细胞定位分析发现PwERF8蛋白主要定位于细胞核。将启动子序列进行在线分析显示PwERF8含有GA、ABA、JA和SA等激素的顺式作用元件。进一步在烟草中瞬时过表达PwERF8启动子并用GUS染色显示,PwERF8启动子能响应GA、ABA、MeJA和SA等外源激素的处理。GA、ABA、MeJA和SA分别处理青杄幼苗3、6、12 h后,PwERF8的表达量均显著高于对照,干旱、4℃和42℃处理均能诱导PwERF8表达,但盐胁迫不能诱导其表达。【结论】青杄转录因子PwERF8参与了GA、ABA、JA和SA激素的信号通路,广泛响应干旱、温度逆境等非生物胁迫,且可能作为一个转录抑制子在细胞核中发挥功能。     

玉米的栽培与病虫害防治技术要点解读

随着我国农作物种植水平的提升,农业结构也不断调整,保证了农作物的产量和质量,逐渐调整和发展下,实现了玉米的积极生产,基于此,需要对其存在的栽培技术、病虫害防治工作做出分析。在下文中,对相关要点做出解读。     

盐碱地冬闲棉田复种模式探索

简要介绍了黄河三角洲冬闲棉田利用对复种作物的要求及四种常见的复种模式，为盐碱地棉田的高效生态利用发挥指导作用。     

江汉平原中山杉引种造林试验研究

通过在江汉平原开展中山杉6个品系的引种造林试验。结果表明,引进的6个品系中山杉无严重病虫害发生,各生长指标均大于池杉,11 a生中山杉平均胸径为17.61 cm、树高为11.06 m、材积为0.1297 m^3,表明中山杉在江汉平原的引种试验基本成功,其中中山杉502和中山杉118最为突出,适合在江汉平原推广造林,丰富江汉平原造林树种。     

平原湖区落羽杉苗期黄化防治试验

针对落羽杉苗期在平原湖区易黄化的现象 ,在公安县三台林场开展了落羽杉苗期黄化病防治试验 ,结果表明 :施用硫酸亚铁(FeSO4 )能有效防治落羽杉苗期的黄化现象.     

浅析花生的施肥技术

<正>花生是我国重要的经济农作物,可食用也可饲用。辽宁锦州占据沙质土壤的地理优势,加上优良的自然环境特点,成为重要的花生种植基地之一。但是因为农民在花生种植上缺乏科学的种植技术和意识,其产量也存在了很大的提升空间。1花生施肥存在的问题1.1花生肥料使用不合理在这个方面,主要的问题就是氮肥、磷肥、钾肥的配比不合适,花生种植中多以氮肥为主,钾肥偏少,并且特别注重养分复合肥的使用量。1.2花生肥料太过单一     

露地春黄瓜种植技术要点

<正>黄瓜是葫芦科草本植物,同时也是日常生活中一种极为常见的蔬菜,并且在全国各地都有广泛的种植。近些年来我国的北方地区也开始大规模种植,而种植方式则采用温室栽培以及露天栽培等。春天已至,该季节是黄瓜的重要种植季节,通过掌握露地黄瓜的种植技术,对于提高黄瓜产量有着非常重要的作用。1培育幼苗培育幼苗是一项重要的工作,通过培育适龄的壮苗,也是实现黄瓜丰收增产的重要基础,因此在育苗的过程之中,一定要做好以下几项工作。1.1培育环境在辽宁锦州地区,大多采用阳畦进行幼苗培育,同时也有采     

广西野生茶树种质资源现状及保护利用建议

本文论述了野生茶树种质资源的价值,介绍了广西野生茶树种质资源的现状,分析了广西野生茶树存在的问题,提出了广西野生茶树资源的保护与利用建议,以期为开展广西野生茶树资源的研究、保护和利用提供参考。     

试论现代茶具的设计走向与趋势

以传统茶具历史为依据,论述现代茶具的设计趋势,即在传统茶具设计理念上寻求突破和创新,将现代设计与传统的文化相结合,使传统茶具在现代社会中更加完美的展现与运用。     

蓝莓果实花青苷积累与内源激素含量动态变化

为明确蓝莓果实花青苷积累与内源激素含量动态变化，本研究以5年生高丛蓝莓品种‘日出’和‘喜来’的果实为试验材料，运用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法、示差法等技术，测定了果实中花青苷含量、可溶性糖含量与5大内源激素(玉米素(ZT)、脱落酸(ABA)、吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA₃)、乙烯(ETH))含量的变化规律并分析其相关性。结果表明，对整个蓝莓果实生长发育期间可溶性糖含量进行HPLC分析测定显示，蓝莓果实发育过程中主要以积累葡萄糖和果糖为主，蓝莓果实中可溶性糖的积累主要在果实发育后期。通过气相色谱测定蓝莓果实的ETH含量和ELISA试剂盒测定IAA、GA₃、ZT、ABA显示，GA₃与ZT含量较低，整体是先上升后下降的趋势，在果实发育中期出现一个峰值，IAA含量在蓝莓生长发育的过程中整体呈下降趋势，与之相反，蓝莓果实内ABA与ETH的含量变化总体呈上升的趋势。对整个蓝莓果实生长发育期间的花青苷含量、可溶性糖含量和内源激素含量3者之间进行相关性分析显示，ABA和ETH为糖类物质重要诱导因子，共同促进果实成熟和花青苷积累，IAA抑制糖类物质的积累和花青苷的合成，而GA₃对糖类物质及花青苷的合成积累调控作用不明显，ABA、IAA和ETH等激素协同调控果实成熟过程。