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正交法优化蛹虫草子实体多糖的提取工艺 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]采用正交法优化蛹虫草(Cordyceps militaris L.Link)子实体多糖的提取工艺。[方法]采用优化煎煮法、水热回流提取法和碱法提取蛹虫草子实体多糖的工艺。[结果]煎煮法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入40倍体积的水,提取3次,每次3.0h,各因素影响得率的主次顺序为:料液比〉煎煮时间〉煎煮次数。水热回流法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入20倍体积的水,80℃下提取2次,每次1.0h,各因素影响得率的主次顺序为:提取次数〉提取时间〉提取温度〉料液比。碱法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入8倍体积的0.7mol/LNaOH溶液,提取3次,每次0.5h,各因素影响多糖得率的主次顺序为:浸提次数〉NaOH浓度〉料液比〉浸提时间。[结论]该研究找出了煎煮法、水热回流提取法和碱法提取蛹虫草子实体多糖的工艺,可为下一步研究及工业生产提供参考资料。 相似文献
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超声波对菜豆种子超氧化物歧化酶活性的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
菜豆种子粗酶液经乙醇-氯仿、丙酮沉淀、DEAE-纤维素柱层析和Sephadex G-75柱层析,获得比活力为127.45U/mg的超氧化物歧化酶(SOD),该酶活性受H2O2和KCN强烈抑制,经电泳鉴定为3种SOD同工酶,部分纯化的SOD证明为Cu,Zn-SOD,经不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳获得其中1种电泳纯的酶,超声波处理此酶后,酶活力发生改变,适宜的超声波参数能显著提高酶活力,经超声波处理后,SOD的紫外吸收光谱无明显变化,而紫外差示光谱在一定波长范围内出现正峰和负峰。 相似文献
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[目的]对水稻SDG711蛋白C末端进行原核表达,并制备其多克隆抗体。[方法]选取水稻SDG711蛋白抗原决定簇较密集的C末端进行原核表达,通过构建原核表达载体pET28a-711C,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达融合蛋白后进行纯化,再以纯化的融合蛋白为抗原免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体,并对其进行Western-blot分析。[结果]试验制备的多克隆抗体能有效地检测抗原的表达。[结论]该研究为进一步深入研究SDG711蛋白的功能奠定了基础。 相似文献
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从树林中腐烂木块上采集并筛选出一株分泌外切β-葡聚糖苷酶(exo-1,4-β-D-glucanase or cellobiohydrolase,CBH)的绿色木霉菌株.在100mL的锥形瓶中装入40mL培养基的产酶状况最好,其通气量最佳,培养液初始pH为8时绿色木霉产生的CBH活力最高.随绿色木霉生长时间的延长,CBH的活力与培养基中的葡萄糖含量呈交替的一高一低的波浪状变化.通过硫酸铵分部分离、葡聚糖G-100凝胶过滤、DEAE-纤维素52阴离子交换柱层析等方法使绿色木霉所产的CBH达到了电泳纯,纯化倍数为16.3.CBH的反应最适温度为60℃,最适pH为6.0,Km(底物为羧甲基纤维素钠)为17.34mg/ml. 相似文献
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从海芋叶中分离和纯化过氧化物酶(POD),研究了不同参数超声波对其活性作用效果.结果表明,经不同频率、功率超声波处理不同时间后,酶活性均比未经超声波处理的活性低.将粗酶经硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-纤维素离子交换柱层析,在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上显示出1条蛋白带.对纯酶进行动力学分析,结果表明,超声波处理后,POD的Km值变大,而vmax值变化不大,说明超声波处理使酶与底物的亲和力降低.紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱的研究进一步表明,超声波处理使酶分子的构象发生变化,从而导致酶活性的改变. 相似文献
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通过腹腔注射四氧嘧啶建立小鼠糖尿病(DM)模型, 分别用虎奶菇菌核水提多糖(W-HNP)、碱提多糖(A-HNP)按每千克体质量200和100 mg灌胃给药,阳性对照用盐酸二甲双胍片(MH)按每千克体质量500 mg灌胃给药,连续15 d后,分别测定空腹12 h后血糖,并对小鼠血清进行乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳.试验结果显示:与DM对照组相比,W-HNP、A-HNP处理组的小鼠血糖分别降低了(34.499±9.345)%、(46.820±7.032)%(P<0.01),且不影响正常小鼠血糖;同时,多糖可改善DM小鼠的饮水、摄食和体质量,提高DM小鼠的胸腺、脾指数;DM对照组血清的LDH4、LDH5的活性比正常组高,W-HNP、A-HNP处理组的LDH4、LDH5活性比DM对照组低. 相似文献
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为了探索不同参数超声波对淀粉酶活性的影响效果,将水稻淀粉酶经分级盐析初步纯化后,用DEAE-纤维素进行柱层析,层析结果分离出两个蛋白峰,第1个蛋白峰无酶活力;第2个蛋白峰有很高的酶活力,且酶活力峰与蛋白峰吻合,将此峰中蛋白成分进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳结果显示的蛋白带比粗酶的蛋白带明显减少,经柱层析后淀粉酶被纯化13.726倍,将部分纯化的淀粉酶用适宜参数的超声波处理可以使酶活力提高9.09%-33.09%。 相似文献