鸡致病性大肠杆菌噬菌体的分离

将微生物实验室分离保存的44株鸡致病性大肠杆菌进行生化鉴定,将鉴定正确的大肠杆菌接种于肉汤培养基,取幼龄培养物利用双层平板法进行大肠杆菌噬菌体的分离。对分离的噬菌体进行增殖后,经过滤除菌得到较纯噬菌体样品,并用甘油进行分装保存。     

大豆蛋白饮料中大豆蛋白定量方法研究

[目的]建立基于竞争酶联免疫分析(ELISA)的大豆蛋白饮料中大豆蛋白定量方法.[方法]以变性的大豆球蛋白和β-伴球蛋白为抗原,分别制备抗这2种蛋白的多克隆抗体,构建竞争ELISA方法.分析了9个品系的大豆球蛋白、β-伴球蛋白、可溶蛋白的含量.基于大豆球蛋白与伴球蛋白含量之和与可溶蛋白的比例关系,得出了植物蛋白饮料中大豆蛋白含量的计算方法.[结果]该方法的线性范围均为2.0 ～ 80 μg/ml(R2=0.99),样品前处理使用含有0.1％二硫苏糖醇(DTT)的7 mol/L尿素作为提取液.大豆球蛋白与伴球蛋白含量之和除以系数0.682可换算得到蛋白饮料中大豆蛋白含量,方法的相对标准偏差＜12％.[结论]研究可为其他热加工食品的蛋白特异性定量提供参考.     

油葵HaDGAT2基因的功能及表达特性分析

二酰甘油酰基转移酶(DGAT)在植物油脂合成中起关键作用,其活性高低与植物含油量显著相关。为探明油葵二酰甘油酰基转移酶2基因(HaDGAT2)的功能,本研究以‘新葵杂5号’为试验材料,从油葵中扩增HaDGAT2基因序列并构建酵母穿梭表达载体pYES2-Ha DGAT2,将重组载体转入酿酒酵母INVSc1后提取酵母总脂肪酸,甲酯化后GC-MS分析。结果显示,在酿酒酵母中可成功诱导HaDGAT2基因,且转HaDGAT2基因酵母中棕榈油酸(16:1)和油酸(18:1)含量与对照相比得到提高。结果表明,HaDGAT2基因在调控油脂合成的过程中具有重要作用。实时荧光定量PCR分析结果表明HaDGAT2基因在油葵根、茎、叶、花、子叶和不同发育时期的种子中都有表达,且在开花后31天的种子中表达量高,说明该基因表达无组织特异性,在油葵种子油脂积累后期起关键调控作用。本研究为深入了解油葵油脂和调控机制提供了基础,为今后利用分子育种手段提高并改良葵花籽油的品质提供了理论基础。     

黑木耳连着菌棒卖

前不久,浙江开化县长虹乡长川村菇农邹家建,将一筒筒手臂长的黑木耳菌棒运到集贸市场里,用绳子整齐地吊在架子上出售,并在架子的中间挂一块牌子:无公害黑木耳,每筒10元。过去市场上卖的不是干木耳,就是刚采下的鲜木耳,现在居然是连着     

阻抑动力学光度法测定茶叶中痕量铈

以溴代十六烷基吡啶为增敏剂,在H2SO4介质中痕量铈（Ⅳ）对高碘酸钾氧化维多利亚蓝的反应具有阻抑作用,研究了其动力学条件,据此建立一种阻抑动力学光度法测定痕量铈（Ⅳ）的新方法。方法线性范围为0-60μg／L,检出限为6．09×10^-7g／L。本法在表面活性剂存在下,其灵敏度提高3倍。用于茶叶中铈的测定,结果满意;     

鸡大肠杆菌病病原的分离鉴定及药敏试验

自疑似大肠杆菌病例中分离到大肠杆菌44株，并对其病原特性进行了研究，结果表明这些菌的生化特性基本一致，与文献报道相符。对此44株大肠杆菌进行血清型鉴定，鉴定出血清型39株，其中O血清型13种，以O₇₈、O₃₅、O₂₄、O₁、O₁₅、O₇₆和O₈₈等7个血清型为主，占定型菌株的84.6%。其中血清型为O₇₈的菌株占定型菌株的38.5%，为优势血清型。用9种抗菌药物（头孢唑啉、庆大霉素、阿米卡星、链霉素、环丙沙星、诺氟沙星、青霉素、妥布霉素、红霉素）进行了药敏试验，结果表明分离菌株呈现出不同程度的耐药性，其中青霉素、红霉素的耐药率最高（均为97.7%），其次是环丙沙星（81.8%），大多数为多重联合耐药；而阿米卡星、妥布霉素和庆大霉素的敏感率较高，其中以阿米卡星（90.9%）最敏感。     

猪伪狂犬病病毒流行毒株gE/gI缺失突变株的构建及生物学特性研究

【目的】为研制针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的疫苗提供候选毒株。【方法】构建针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的gE/gI缺失重组转移质粒pMD-LA-RA及携带EGFP标记基因的重组转移质粒pMD-LA-EGFP-RA,将pMDLA-EGFP-RA与伪狂犬病病毒流行毒株PRV AH进行同源重组,利用EGFP为筛选标记,获得携带EGFP基因的gE/gI基因缺失突变株PRV AH gE~–/gI~–/EGFP~+,以此毒株与pMD-LA-RA进行第2次同源重组,筛选去除EGFP基因的gE/gI基因缺失突变株PRV AH gE~–/gI~–,并通过生长曲线、易感细胞连续传代和动物免疫评价其增殖能力、遗传稳定性及免疫原性。【结果】通过2次同源重组,结合荧光观察、空斑纯化和PCR检测,成功获得了PRV AH gE~–/gI~–,经PCR鉴定、荧光观察及测序鉴定,证实该毒株g E和g I基因被成功缺失,且不携带EGFP标记基因。生物学特性研究结果表明,该毒株增殖能力与亲本毒株相当,遗传稳定性及免疫原性良好。【结论】采用同源重组技术成功构建了免疫原性良好的猪伪狂犬病病毒流行毒株gE/gI基因缺失突变株,为研制针对流行毒株的基因缺失疫苗奠定了一定的基础。