不同培养液对昆明小鼠体外受精率及早期胚胎体外发育的影响

在TYH受精液中添加促卵泡素（FSH）和苯甲酸雌二醇（E2），检测不同浓度的FSH和E2对昆明小鼠的体外受精率的影响；检测在M16、CZB两种培养液中添加胎牛血清（FCS）与否对昆明小鼠早期胚胎体外发育的影响．结果表明：在．rYH中添加1．0IU／mL FSH，受精率和2-细胞胚率显著高于对照组；在TYH中添加0．1μg／mL E2，受精率和2-细胞胚率也显著高于对照组．在CZB中添加体积分数为10％FCS，可显著减少2一细胞期体外发育阻断，并显著提高小鼠胚胎体外发育的囊胚率，可见，以TYH添加1．0IU／mL FSH和0．1μg／mL E2为受精液，以含体积分数为10％FCS的CZB为胚胎培养液，小鼠胚胎可获得较高的囊胚率．葡萄糖并不是小鼠胚胎形成囊胚所必需的．     

长白和蓝塘猪印记基因 IGF2 和 H19 的时空表达研究

运用实时荧光定量PCR技术,检测 IGF2和H19 印记基因在长白猪和蓝塘猪中的表达水平.测定了1日龄和180日龄2个阶段的基因在各组织中的转录表达水平,按照生长性状分组,对组间的表达差异进行了比较分析.分析不同日龄长白、蓝塘猪各组织中 IGF2、H19 的表达量.结果显示,仔猪初生体质量大的组肝脏组织中 IGF2 基因表达水平显著高于初生体质量轻的组;180日龄猪皮脂厚的组脂肪组织的 IGF2 基因表达量高于皮脂薄的组;1日龄仔猪肝脏、肌肉和胃组织中 IGF2 表达量高于其他测定组织和180日龄的各组织;180日龄蓝塘猪肾脏组织中的 H19 表达量显著升高.     

Leptin和ITS对牛卵母细胞体外培养和胚胎生产的影响

利用Leptin和ITS促进体外成熟和体外培养的牛卵母细胞的发育和质量,探讨提高胚胎体外生产的质量和数量的方法和技术。试验1：体外受精胚胎的培养液：添加BSA的KSOM中添加10mL/L浓度的ITS,结果使胚胎的桑椹胚率和囊胚率显著（P〈0.05）高于培养液中不加ITS的对照组（桑椹胚率：43.48%vs29.07%,囊胚率：22.83%vs11.63%）,卵裂率、正常分裂率和8细胞率与对照组差异不显著（P〉0.05）。试验2：在卵母细胞的体外成熟液中添加10μg/L具有生物学活性的重组鸡Leptin成熟肽融合蛋白,Leptin处理组和对照组卵母细胞经体外成熟、受精后转入加有10mL/LITS的KSOM培养液进行体外培养。试验组卵裂率和正常分裂率极显著（P〈0.01）高于对照组（88.96%vs66.81%和61.11%vs29.36%）,8细胞率显著（P〈0.05）高于对照组（84.84%vs69.57%）。Leptin处理的卵母细胞在受精后的桑椹胚率和囊胚率与对照组差异不显著,但最后的囊胚数量较对照组增加1倍多,分别为IVF卵母细胞总数的14.8%和6.4%（P〈0.01）。这说明,添加Leptin对牛卵母细胞体外成熟有促进作用,可显著提高卵母细胞受精后早期胚胎的卵裂率、正常分裂率和8细胞率;加入ITS则能提高桑椹胚率和囊胚率;而Leptin和ITS的按顺序结合使用,则能大大增加体外生产胚胎的桑椹胚和囊胚的数量,从而提高胚胎体外生产的效率。     

营养对公猪精液生产的影响

使公猪既能生产出大量高质量的精度又能获得良好体况和健康的日粮，是公猪生产获得利润的关键。长期以来应用限饲应用于延长公猪的利用年限。现有更多选择指数高、经济性状更优秀的年轻公猪可取代采精公猪，公猪站公猪依靠限制饲喂来延长公猪利用年限的模式将重新考虑。增加饲喂量有利于精子发生，而饲喂不足会降低精子生产量和公锻造蝗性欲。公猪在体重增加时比在体重不变或减轻时产生更多的精子。5分制评定公猪体况，获得3分的体况较为理想，公猪的营养水平取决于生产因素，如公猪年龄、采精频率、环境温度、遗传及健康状况等。物质因素如能量与赖氨酸之比、日粮中粗纤维含量以及日粮是否含有抗生素都影响着公猪的繁殖性能。在不同环境下，营养对精子的发生的不同作用有待进一步的研究。此外，研究评定精液受精能力的技术也是必需的。     

模拟微重力条件下体外成熟卵母细胞的受精能力

分别对1 g重力和模拟微重力条件下成熟的昆明小鼠卵母细胞进行体外受精试验,研究模拟微重力条件下成熟卵母细胞的受精能力,探讨模拟微重力对卵母细胞成熟的影响。结果显示,1 g重力条件下成熟的小鼠卵母细胞的体外受精率为35.82%,显著高于模拟微重力条件下成熟的卵母细胞的体外受精率。可见,模拟微重力不利于卵母细胞的体外成熟,模拟微重力损伤卵母细胞的受精能力。     

广州地区娟姗种公牛精液品质随月份的变化研究

选择在广州地区亚热带气候条件下2岁～6岁的娟姗公牛5头,观察其精液品质(采精量、原精密度、原精活力以及细管精液产量)在全年不同月份的变化情况.结果表明:娟姗公牛的每次采精量和细管精液产量在气温较高的7～9月份会因为采精频率的减少而增加,10月份会因为周采精频率增加而使每次采精量和细管精液产量有明显减少;娟姗公牛的原精密度在气温适宜的2月份和采精频率较低的8月份会出现两个高峰值;娟姗公牛的原精活力在气温较高的月份会出现明显的下降趋势,2月份气温适宜时原精活力最好.     

胚胎移植中供体母牛的配种受胎情况总结

采用超数排卵法生产体内胚胎是否会影响到供体牛以后的繁殖性能,一直是业内人士关心的问题。为此我们对经超数排卵处理的供体牛的继后发情、配种和受胎情况进行了总结,结果表明超数排卵不影响供体牛继后的繁殖性能。1供体牛来源2004年10月至2005年5月,广州市奶牛生物技术工程中心在广州市华美牛奶公司进行了奶牛的胚胎移植及胚胎生产工作。期间,共选择了优质高产的荷斯坦奶牛101头(成母牛13头,育成牛88头)作为供体,并对其中23头第一次反应良好的供体母牛进行了第二次超排。2供体母牛的处理过程2.1根据系谱资料选定供体母牛,对供体母牛阴道放…     

MDR1启动子的克隆及其转录活性的检测

目的 克隆人多药耐药基因1 (MDR1)5'非编码区启动子序列,并检测该段启动子在人肝癌细胞株HepG2中的转录活性.方法 提取HepG2肝癌细胞基因组DNA,PCR扩增人MDR1启动子序列(-1 040～ +288);采用基因重组技术构建由MDR1启动子驱动的荧光素酶报告基因载体,将该载体瞬时转染HepG2细胞,通过双荧光素酶报告基因试剂盒检测该MDR1启动子在HepG2细胞的转录活性.结果 PCR扩增出人MDR1启动子(-1 040～ +288)片段,PCR鉴定、酶切鉴定及测序鉴定均证实该段启动子驱动的荧光素酶报告基因载体构建正确;转染实验证实,转染该质粒的HepG2细胞中荧光素酶活性很高.结论 成功克隆了人MDR1启动子(-1 040～ +288),并证实该MDR1启动子具有较强的转录活性.该启动子的成功克隆为后续研究MDR1基因在药物耐药中作用和基因表达调控机制提供了载体.     

广州地区娟姗公牛与荷斯坦公牛精液品质的比较研究

本试验选择亚热带气候条件下广州地区的娟姗公牛和荷斯坦公牛各5头,比较两个品种公牛的精液品质(采精量、原精密度、原精活力、细管精液产量、冻后活力、低渗膨胀率及穿透率)。研究表明,荷斯坦公牛每次采精的采精量(16.14±0.06 mL)和细管精液产量(189.17±3.11支)都极显著地高于娟姗公牛(4.74±0.05 mL,158.46±2.64支)(P<0.01);娟姗公牛的原精密度(8.95±0.08亿/mL)极显著地高于荷斯坦公牛(8.32±0.07亿/mL;P<0.01);娟姗公牛原精活力(0.731±0.004)高于荷斯坦公牛(0.729±0.003),但两者差异不显著(P<0.05);娟姗公牛精液的冻后活力(0.355±0.003)极显著高于荷斯坦公牛(0.339±0.003;P<0.01);娟姗公牛冷冻精液的低渗膨胀率(34.50%±0.49%)显著高于荷斯坦公牛(31.21%±0.59%;P<0.01);娟姗公牛冷冻精液对去透明带仓鼠卵的穿透率(84.51%±13.83%)显著高于荷斯坦公牛(81.52%±6.13%;P<0.05)。