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为了建立适用于临床诊断的H1N1亚型猪流感病毒快速检测方法,本研究根据GenBank已登录的H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因序列设计RT-PCR扩增引物,以H1N1亚型猪流感病毒、H3N2亚型猪流感病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒为试验对照,通过优化RT-PCR反应条件和反应体系,建立了H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法。同时,运用H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法和本研究建立的方法对165份猪病料样品进行了对比验证。结果表明,本研究建立的H1N1亚型猪流感病毒双重RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、重复性,所扩增的目的基因片段大小分别为428 bp和678 bp左右,可检出最小基因组RNA浓度为2.9×10-5μg/μL。本研究建立的方法和H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法均从同一份猪肺脏样品中检测出H1N1亚型猪流感病毒,其余样品中均未检出H1N1亚型猪流感病毒,两种方法符合率为100%。本研究建立的方法适用于H1N1亚型猪流感病毒双基因定型检测,可在H1N1亚型猪流感病毒流行病学调查和临床诊断中应用。 相似文献
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893真菌是担子菌变种,对其在国赤米、麦芽等物上生长的菌体对鸡的抗(ND)病性的影响及其多糖提取物对鸡增重的影响进行了研究。结果表明,893真菌作添加剂饲喂雏鸡,对有母源抗体的雏鸡有一定抗新城病毒的作用,但在母源抗体降低或消失后,则与对照无差异;其真菌多糖液对AA肉鸡有一定增重作用,两个剂量之间也略有差异。 相似文献
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犊牛沙门氏菌病是一个世界范围内存在的疾病,仍在一些地区流行。引起犊牛沙门氏菌病的是鼠伤寒沙门氏菌和都柏林沙门氏菌两种血清型。很多报道认为,活的或死的组织苗可保护犊牛,然而,都柏林沙门氏菌灭活苗的效果不理想。本研究利用抗沙门氏菌特异性卵黄抗体作为治疗出... 相似文献
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酒石酸泰乐菌素对鸡细胞免疫应答的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
许多报道都认为抗生素对白细胞功能 ,尤其是对多形核白细胞和淋巴细胞的功能有抑制作用。然而 ,最近发现大环内酯类的红霉素在体内外对多形核白细胞和巨噬细胞的趋化性、吞噬能力、白细胞增殖 ,超氧化物的产生白细胞介素 - 1(IL- 1)和肿瘤坏死因子 (TNF)活性 ,刀豆蛋白 A(Con A)诱导的母细胞化程度及自然杀伤细胞活性等功能有促进作用。收稿日期 :2 0 0 0 -0 6-2 0 这就揭示了大环内酯类抗生素酒石酸泰乐菌素(可溶性泰农 )也有与红霉素相类似的作用 ,但很少有关于泰乐菌素对鸡细胞免疫功能影响的报道。本研究中采用给肉鸡口服泰乐菌… 相似文献
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淫羊藿—蜂胶佐剂对雏鸡免疫器官早期发育和形态结构的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
3日龄雏鸡按两个剂量组分别于皮下注射淫羊藿-蜂胶佐剂(简称淫蜂佐剂)0.2mL和0.4mL,24日龄时重复注射1次,于7,14,21,28,35,42日龄时随机抽样扑杀,采取免疫器官称重并进行光镜和电镜检查,比较不同剂量的淫蜂佐剂对雏鸡免疫器官的增重以及形态结构的影响。结果表明,淫蜂佐剂能显著促进雏鸡免疫器官的早期发育,并能刺激T,B淋巴细胞活化。重复注射后,可再次引起脾脏增重,且与剂量有相关性, 相似文献
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大肠杆菌外排泵系统基因表达及ELISA检测方法建立 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】对大肠杆菌AcrAB外排泵系统acrA、acrB基因进行原核表达,获得的表达产物AcrA、AcrB蛋白分别免疫兔,制备相应的抗体,建立大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法。【方法】扩增AcrAB外排泵系统acrA、acrB基因片段,扩增片段分别与原核表达载体 pET-41a(+)连接构建重组质粒,于BL21(DE3)中进行诱导表达。表达产物AcrA、AcrB纯化后分别免疫新西兰大白兔,获得抗AcrA、AcrB抗血清,并用Western blot方法对表达产物进行鉴定分析。纯化的AcrA、AcrB蛋白分别按不同的浓度包被酶标板,与不同稀释倍数的抗血清反应,通过ELISA检测确定最佳抗原包被浓度及抗体稀释度,初步建立大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法。【结果】成功克隆和表达了 acrA、acrB基因片段,经 SDS-PAGE检测表明两种表达产物 AcrA、AcrB均以可溶性蛋白形式存在。AcrA、AcrB抗原蛋白最佳包被浓度分别为 1.0μg?ml-1和0.5μg?ml-1,抗AcrA、AcrB血清的最佳稀释度分别为1﹕800和1﹕400。用初步建立的ELISA方法检测8株大肠杆菌多重耐药菌株外排泵表达水平,结果表明分别用两种蛋白作包被抗体检测外排泵表达水平的结果一致。【结论】本研究通过原核表达的方法获得大肠杆菌AcrAB外排泵系统AcrA、AcrB蛋白并制备了相应的抗体,分别用两种抗体包被酶标板,并建立了大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法,对8株多重耐药菌株的检测结果表明该方法可行、可靠。 相似文献
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鸭疫里默氏杆菌菌种保存试验及蜂胶苗的保护试验 总被引:1,自引:0,他引:1
鸭疫里默氏杆菌感染已成为危害养鸭业最严重的细菌性疾病之一,其病原生长营养要求较高,普通方法不易保存;目前防制该病主要采用药物和(或)疫苗.本文对几种保存方式鸭疫里默氏杆菌的活力和毒力进行初步试验,并检测了自行研制的蜂胶苗的保护率.结果表明将带菌鸭血放于一20℃冰箱,鸭疫里默氏杆菌的活力和毒力可保持17个月以上;应用研制的蜂胶苗对雏鸭免疫两次可获得较好的保护力,达100%(10/10). 相似文献
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鸭疫里氏杆菌各血清型在我国的分布 总被引:3,自引:1,他引:2
吕殿红 《广东畜牧兽医科技》2003,28(5):18-20
鸭疫里氏杆菌病(Riemerella anatipestifersis,RA)是家鸭、火鸡、鹅和多种其它鸟类的一种接触性传染病,能引起1~8周龄的鸭发生浆膜炎、心包炎、气囊炎和肝周炎等为特征的急性败血性传染病。我国近年来对该病病原的分离及其血清型的鉴定等方面进行了较多的研究,目前已证实我国有1、2、3、4、5、6、7、8、10、11、13、14、15、17等14种血清型的RA,另新发现4种新血清型(22、23、24、25型),多种血清型的存在是造成该病防制困难的重要原因。本文介绍了我国对RA血清型的研究,及各血清型在我国的分布,以期对综合防制该病有一定的启发和指导。 相似文献