选育蚕抗病品种的基因工程研究

桑蚕抗病育种是当前生产上迫切要求组织力量攻关的项目,八十年代初召开全国第一次桑蚕抗病育种座谈会以来,各地区、单位对于桑、柞蚕的抗性资源开展了广泛的调查和鉴定;对桑蚕抗病品种的遗传规律及抗病的生理生化机制等基础理论进行了探讨;     

柞蚕抗菌肽D基因在酵母中表达的研究

柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能，人工合成抗菌肽Ｄ基因（１２２ｂｐ）与含α－因子及前导肽序列的穿梭质粒ｐＣＬＷＡ２重组，克隆于酵母ＡＢ１０３。在缺亮氨酸的ＹＥ培养基中筛选Ｌｅｕ＋阳性的转化子。转化子菌株培养扩增后提取重组质粒与抗菌肽基因片段探针作点杂交为阳性，电泳后插入含抗菌肽Ｄ基因１２８ｂｐ的区带。在转基因酵母的发酵液中分离上清液，浓缩，对抗菌肽敏感的指示菌Ｅ．ｃｏｌｉＫ１２Ｄ３１有明显抑菌效应。证实人工合成柞蚕抗菌肽Ｄ基因在酵母中表达。     

家蚕卵DNA在大肠杆菌中克隆

应用常规的方法培育抗病的家蚕品种较难得到十分理想的结果,如借助基因工程的手段可能是解决这一课题的有利途径。为此,必须从分子生物学的水平上研究和分析     

选育家蚕抗病品种的基因工程研究——Ⅰ.家蚕卵DNA在大肠杆菌中无性繁殖

从抗病力较强的家蚕多化性金黄茧系品种“白皮淡”的卵提取DNA,以质粒pBR322为载体,在大肠杆菌中组建了家蚕卵DNA片段的无性繁殖系。通过插入失活和菌落的同位素示踪原位杂交签定,共筛选出TcRAp5的克隆菌株16个,定名为pSO(1～16)。经限制性内切酶降解及琼脂糖凝胶电泳测定,这些克隆的蚕卵DNA片段的分子量分别为0.2～6.3×106道尔顿。