珠三角地区鸭坦布苏病毒的全基因序列测定与分析

【目的】了解2010年以来分离于珠三角地区鸭坦布苏病毒病(Duck Tembusu virus,DTMUV)GDNS2010.1、GDNS2010.2、GDZQ2012、GDPY2013株的分子特征.【方法】参考Gen Bank收藏的DTMUV JS804株,共设计合成11对特异性引物,扩增了4株病毒的全基因序列片段.【结果和结论】4株病毒全长约为10 990 bp,无Ploy(A)尾结构,仅含有1个大的ORF,共编码3 426个氨基酸,5'非编码区(5'UTR)各含有94 bp.在3'非编码区(3'UTR),GDNS2010.1、GDNS2010.2毒株在103 395~103 411 bp处缺失10个碱基.联合前期试验已测定的2株病毒序列(GDHZ2012.1、GDHZ2012.2),用DNAstar和MEGA6.0序列分析软件将6株病毒同Gen Bank收藏的国内的其他坦布苏病毒株比对,发现核酸序列相似性在98%以上,与Ntaya病毒和Sitiawan病毒相似性较大,相似性都在73%左右;与西尼罗河病毒、日本乙型脑炎病毒、黄热病毒等相似性皆低于63%.6株病毒囊膜蛋白E核酸序列相似性为97.5%~99.9%,推导氨基酸序列相似性在97%以上,其中同一地区分离的毒株相似性最高,达99.9%;在囊膜蛋白E154位存在一潜在的糖基化位点Asn-Try-Ser,在E蛋白结构域Ⅱ第E289位,极性带正电荷的Lys变为极性带负电荷的Glu,推测这一位点可能为病毒的毒力位点.     

一例肠炎型犬细小病毒病的诊治

2009年4月,笔者接诊一只2月龄英国小古牧病例,在主人购回后3d发病,就诊前已发病超过1周,曾以普通出血性胃肠炎治疗,但病情未见改善。结合流行病学和临床表现,疑似犬细小病毒感染,遂用犬细小病毒抗原快速检测试纸对粪便中的病原进行检测,结果表现为强阳性,确诊此犬为犬细小病毒感染。经过采用输液、输血、灌肠、抗感染等综合性治疗,病情逐步得到改善,10d后痊愈。     

凤尾草不同溶媒提取功能成分的抗菌效果比较

[目的]比较不同溶媒提取凤尾草功能成分的抗菌效果.[方法]将新鲜凤尾草干燥粉碎后,分别用水煎煮、乙醇热回流提取、丙酮热回流提取,再将提取液蒸发浓缩至一定浓度,采用试管二倍稀释法分别测定提取液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌五种细菌的最小抑菌浓度(MIC).[结果]凤尾草水煎液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌的MIC分别为55.31、110.62、110.62、110.62、55.31mg生药/ml;凤尾草乙醇提液对以上五种菌的MIC分别为43.40、86.81、86.81、86.81、86.81 mg生药/mL;丙酮提取液对以上五种菌的MIC分别为29.48、58.96、58.96、29.48、29.48 mg生药/ml.[结论]凤尾草丙酮热回流提取的功能成分在本试验中抗菌效果最好.