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草莓miR156靶基因SPL9的克隆与表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】从草莓中克隆SPL(SQUAMOSA promoter binding protein-like)转录因子基因SPL9,并分析其在草莓植株不同生长时期的表达水平及与miR156的表达关系,探讨SPL9在草莓植株生长发育中的作用。【方法】根据苹果SPL基因家族的保守序列设计简并引物,以草莓叶片为试材,利用RT-PCR克隆草莓SPL9基因片段,在此基础上利用RACE方法克隆SPL9的cDNA全长。利用实时定量RT-PCR技术分析草莓叶片中SPL9及miR156的表达水平。【结果】从草莓(Fragaria×ananassa)品种‘全明星’中克隆出SPL9基因的cDNA全长序列,命名为FaSPL9。其CDS长度为1 143 bp,编码381个氨基酸,与拟南芥AtSPL9、葡萄VvSPL9、枳PtSPL9、苹果MdSPL9以及玉米ZmSPL9的氨基酸序列同源性分别为:40.30%、64.57%、56.09%、70.33%,38.35%。FaSPL9有着高度保守的SBP结构域和一个双向核定位信号KRXXXRRRK。FaSPL9基因序列中包含miR156的靶位点,实时定量RT-PCR结果表明,在草莓植株的不同生长时期FaSPL9的表达量不同,且与miR156呈现相反的表达模式。【结论】从草莓中分离出FaSPL9基因,其作为miR156的靶基因,推测FaSPL9对草莓植株的生长发育具有重要的调控作用。 相似文献
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不同的基本培养基对枇杷胚愈伤组织的诱导有较大影响 ;不同品种的鱼雷形胚的愈伤组织的诱导率有明显差异 ;不同生长调节剂组合和碳源对愈伤组织的形成有较大的影响 .比较而言 ,以 B5为基本培养基并添加 0 .5mg· L-12 ,4 - D和 1mg· L-1BA组合诱导的愈伤组织的质量最佳 .蔗糖作为碳源 ,有利于愈伤组织生长 ,而山梨醇则对细胞分化有利 .附加 0 .1mg· L-12 ,4 - D和 0 .5mg· L-1BA的 B5培养基有利于胚性愈伤组织的继代、增殖 ,低温和弱光照有利于胚性愈伤组织的保存 . 相似文献
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枇杷LEAFY同源基因的克隆及序列分析 总被引:11,自引:0,他引:11
为从分子水平研究枇杷成花的机理,通过分析植物花分生组织决定基因LEAFY(LFY)同源基因的保守区序列,设计了1对简并引物,用PCR方法从枇杷栽培品种‘早钟6号’基因组DNA中扩增出1个1317bp的片段,把该片段克隆到pUCm-T载体,测序和序列分析结果表明获得了枇杷LFY同源基因(ejLFY)3’端的1个片段,该片段有1个911bp的内含子,编码区共编码130个氨基酸,其序列已经在GenBank中登记(登录号为AY551183).在GenBank中进行同源性搜索,发现该基因片段与其他作物中已经报道的LFY同源基因的同源性大都在94%以上,特别是与同属于蔷薇科的苹果的同源性最高,达到98%的同源性,推测它们具有相似的功能. 相似文献
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在果树栽培生产中嫁接是主要的繁殖方式,砧木育种是果树育种的重要内容。近些年来的研究表明,一些mRNA和小RNA能够在植物细胞间移动,并且能够穿过嫁接口在植物体内长距离运输传递。总结了能够通过嫁接长距离传递的植物内源RNA分子的种类,介绍了基因沉默原理和技术,提出了基于系统获得性沉默原理的果树砧木分子育种策略,并分析了其可能存在的问题,为进一步开展果树砧木分子育种提供思路和参考。 相似文献
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农杆菌介导转化平邑甜茶子叶外植体的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以近轴端子叶为外植体,研究了菌液浓度、菌液浸泡时间、共培养时间及推迟筛选对根癌农杆菌介导的苹果属植物平邑甜茶转化效率的影响,建立了平邑甜茶高效的转化体系.结果表明:较优转化体系是将成熟胚接种在胚萌发培养基上培养,7~10d后剪取近轴端子叶,子叶外植体在OD600=0.5的EHA105菌液中浸泡10min后在再生培养基上共培养5d,然后在附加20mg· L-1Kan和400mg· L-1 Cef的再生培养基上选择培养,在此转化体系上平邑甜茶抗性芽再生率达9.0%.对27个Kan抗性株系的叶片进行GUS组织化学染色分析,23个株系呈现出GUS染色阳性反应.本研究为平邑甜茶的基因工程育种奠定了重要基础. 相似文献
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以野生绿色草莓"5-9"试管苗叶片为外植体,研究了培养基中激素对叶片再生不定芽效率的影响及适宜的四倍体诱导方法.结果表明,当培养基中TDZ质量浓度为2.0 mg/L、2,4-D质量浓度为0.5 mg/L时,再生频率达96.3%;以附加50、100、150 mg/L秋水仙碱的液体和固体再生培养基处理叶片5 d,各个处理均诱导出四倍体植株,诱变率在15.1%~23.3%之间.诱变获得的四倍体试管苗表现出生长缓慢、叶色浓绿、叶片大、叶形指数变小等典型的四倍体植株特点,与普通二倍体试管苗相比具有明显差异.本研究揭示野生绿色草莓试管苗叶片具有极强的不定芽再生能力,叶片再生过程中进行秋水仙碱处理是获得四倍体的有效途径. 相似文献