1株野生蝉虫草的鉴定及其胞内和胞外多糖抗肝癌活性比较

【目的】对1株野外采集的蝉虫草进行分离和鉴定，分析比较其发酵菌丝体胞内和胞外多糖的抗肝癌细胞HepG-2活性及多糖的组成。【方法】通过形态学特征和ITS序列分析，对供试菌株进行鉴定；采用MTT法、细胞划痕试验，比较供试菌株菌丝体胞内和胞外多糖对人肝癌细胞HepG-2的抑制活性以及对人正常肝细胞LO2的毒性，并通过高效液相色谱法和凝胶渗透色谱法，比较分析2种多糖的成分及分子质量分布。【结果】根据菌株形态学特征和ITS序列分析，供试菌株为蝉虫草Cordyceps cicadae；其胞内和胞外多糖均可极显著抑制HepG-2细胞活性（P<0.01），半数抑制浓度（IC₅₀）值分别为3.23和0.45 mg/mL，细胞迁移率分别为38.72%和24.79%，提示胞外多糖比胞内多糖具有更强的抗肝癌细胞HepG-2活性；且2种多糖对人LO2细胞均无明显毒性；进一步分析发现，胞外多糖中半乳糖醛酸的含量是胞内多糖的23.53倍，其分子质量的94.1%集中在19.1～85.0 ku，胞内多糖中核糖是其特征性单糖，高分子质量多糖（>250.0 ku）分布占比明显高于胞外多糖。【结论】野生蝉虫草菌株发酵所产胞外多糖的抗肝癌细胞HepG-2活性较胞内多糖强，二者在单糖组成和分子质量分布上存在明显差异。