山羊TNNT3基因可变剪切及其对骨骼肌细胞分化的作用

【目的】快速骨骼肌肌钙蛋白T（fast skeletal troponin T3,TNNT3）作为肌钙蛋白(troponin, Tn)家族成员,调节横纹肌收缩、参与骨骼肌的生长发育并影响家畜肉质性状。通过获得山羊TNNT3基因的可变剪切体,分析山羊TNNT3基因可变剪切的表达模式及其在肌细胞分化中的作用,深入解析TNNT3基因在山羊骨骼肌生长发育过程中的作用机制。【方法】基于NCBI已公布山羊TNNT3基因（NM_001314210.1）和牛TNNT3基因（XM_010821200）mRNA序列,使用软件Primer Premier 6.0设计引物,以简州大耳羊胚胎期和出生后7个阶段骨骼肌为试验材料,克隆测序获得山羊TNNT3基因的CDS区可变剪切体,利用软件ORF Finder、EditSeq、DNAMAN、ClustalW和MEGA_X_10.1.8等对序列进行生物信息学分析;进一步设计实时荧光定量（real-time PCR,RT-qPCR）及半定量引物,研究TNNT3基因剪切体在7个不同组织（背最长肌（longissimus dorsi muscle,LD）、半膜肌（semimembranosus muscle,SM）、心、肝、脾、肺、肾）和7个发育阶段（胚胎期E75、E90、E105和出生后B3、B45、B150、B300）肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中表达模式;此外,对转录本TNNT3_3进行体外编码能力检测确定其具有编码蛋白的能力,并在山羊骨骼肌卫星细胞（skeletal muscle satellite cells,MuSCs）中过表达,观察细胞形态变化以及检测标志基因的表达变化,研究其对山羊MuSCs分化的作用。【结果】①TNNT3（NM_001314210.1）CDS区全序列主要含有18个外显子,其中外显子16/17相互排斥,转录后单一表达。克隆发现山羊TNNT3基因 5个新转录本（TNNT3_1—5）,其外显子数分别是15、15、20、16、14。②生物信息学分析结果显示山羊TNNT3基因核苷酸序列和氨基酸序列与绵羊、牛、猪等哺乳动物具有很高的一致性,而与鱼类和爬行类动物的一致性较低,说明TNNT3基因序列在哺乳动物高度保守。③TNNT3 mRNA在背最长肌、半膜肌、心、肝、脾、肺、肾7个组织中都有表达,其中在骨骼肌中高度富集(P < 0.01),心脏及肺次之,其余组织中较低;TNNT3 mRNA在背最长肌和半膜肌中的表达始终处于一个动态变化中,胚胎期TNNT3在半膜肌的表达量高于背最长肌（P<0.05）;出生后则背最长肌中高于半膜肌（P<0.05）。④山羊TNNT3基因转录本TNNT3_3重复出现保守的外显子9—11（138bp）,体外翻译实验显示其可编码蛋白且蛋白大小与预期基本相符（37 kD）;相较于对照组,在山羊MuSCs中过表达该转录本使肌分化标志基因Myomaker、MyoG和MyH4 mRNA极显著升高(P < 0.01)。【结论】获得了山羊TNNT3基因具有完整CDS区5个新可变剪切体,TNNT3主要在肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中高表达,在哺乳动物中高度保守且促进成肌分化。初步表明TNNT3基因在动物肌肉生长发育中具有重要的生物学功能。     

福建南平市竹产业标准体系实施、评价与改进建议

推动竹产业高质量发展，标准化工作任重道远，推进标准体系有效实施、开展标准体系评价、动态优化标准体系必不可少。本文以南平市竹产业为例，探索竹产业标准体系实施、评价与改进的方法，以期逐步建立福建省竹产业标准体系实施与评价体系。     

吉林省西部地区滴灌条件下宜机械粒收玉米品种筛选

确定宜机械粒收的玉米品种是构建吉林省西部旱作补灌区玉米丰产增效技术模式的重要内容之一。2018年和2019年在吉林省西部地区开展滴灌条件下宜机械粒收玉米品种的筛选试验,测定38个玉米品种的收获子粒含水率和产量,并按玉米子粒含水率和产量水平采用双向平均法作图进行品种分类。结果表明,本研究初步筛选出5个滴灌条件下宜机械粒收玉米品种,分别是迪卡159、福莱77,稷秾108、吉农大889和优迪919。根据品种综合性状分析,吉农大889较优,其次为迪卡159,可以作为适宜吉林省西部滴灌条件下丰产高效栽培的推荐品种。     

西方语境的中国古典园林审美认知历史溯源

中国古典园林审美不仅仅在中国文化体系中进行讨论，随着全球化进程，西方语境学者也逐渐涉及相关的内容。尝试寻找一种跨文化的“他者”视角，梳理近3个世纪以来西方语境的中国古典园林审美认知经历的3个主要阶段。以18世纪为开端，经过19—20世纪借助西译艺术著作和海外园林建设实现对审美理解从印象到真实的转变，到进入21世纪后诞生的跨学科的诸多新观，这个过程中展现出以中国传统园林审美为代表的打破自身线性历史的闭关自守，回归全球语境的未来中国古典园林研究趋势。     

山葡萄VaCIPK18原核表达与多克隆抗体制备

类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CBLs)互作蛋白(CIPKs) 作为类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在植物响应非生物胁迫信号转导中起着重要作用。基于前期山葡萄响应低温胁迫转录组测序结果,发现低温胁迫引发的早期伤害及感知阶段的激酶基因中涉及CBL-CIPK 信号通路的VaCIPK18表达显著上调。为进一步研究山葡萄(Vitis amurensis)VaCIPK18激酶参与低温胁迫的功能,采用同源克隆获得了VaCIPK18基因,其开放阅读框为1 320 bp,编码439个氨基酸。基于对VaCIPK18蛋白生物信息学分析,获取胞外结构域中抗原表位丰富的肽段,并将其C端调控结构域(230~439 aa)构建到原核表达载体pET28a-SUMO。将重组表达载体转化至大肠杆菌(E. coli Rosetta)中,经0.8 mmol·L^-1 IPTG、37℃诱导4 h表达出大小为42 kDa的包涵体蛋白。将重组蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,获得anti-VaCIPK18多克隆抗体,经检测具有高效价及特异性。Western Blot结果表明,该抗体可以与葡萄内源CIPK18特异性结合,且在50 kDa位置出现与预期一致的条带。同时,CIPK18在低温胁迫后葡萄叶片中蛋白表达水平与室温下相一致,但两种状态下均存在可能的磷酸化与泛素化修饰现象。本研究结果为进一步探究VaCIPK18的蛋白定位、表达及其功能奠定了基础。     

薄型子宫内膜的中西医研究进展

目的 探究薄型子宫内膜的病因机制，分析临床现行的处理策略，加深对薄型子宫内膜的认识，更好地指导临床工作。方法 整理、分析最新薄型子宫内膜的中西医研究文献成果。结果 当代医学对薄型子宫内膜病因机制阐述颇多，处理策略多样，但均存在一定局限性，还未形成统一的治疗原则。中医治疗多以补肾活血为大法，显示出较好的优势。结论 学者对薄型子宫内膜病因的认知尚未形成共识，发病机制仍不明确，治疗效果各异。中西医治疗各有优势，较西医治疗，中药、针灸具有多靶点整合，整体网络调节等优点，成效显著，值得临床推广应用。     

国医大师孙光荣论中西医学文化的比较

中西医学分属于不同的医疗体系，认识其差异，有利于寻求两者之间的共同点和交融的契合点，从而促进医学的发展。国医大师孙光荣通过系统的对比，得出两者之间在学科属性、医疗模式、诊疗思维、发展特点、治疗特点五个方面存在较大的差异。从学科属性而言，中医学具有自然科学与社会科学的双重属性，西医学则属于单纯的自然科学；从医疗模式而言，中医学为整体医学模式，西医学为生物医学模式或生物-心理-社会医学模式；从诊疗思维而言，中医学是包容性思维，主张非定点清除致病因子，西医学则是对抗性思维，主张定点清除致病因子；从发展特点而言，中西医学呈现出起点高、发展慢与起步晚、发展快两种截然相反的状态；从治疗特点而言，中医学以"观其脉证，知犯何逆，随证治之"与"中和"为特点，西医学则强调数据支持，临床路径、介入和干预。     

Kernel vitreousness and protein content: Relationship,interaction and synergistic effects on durum wheat quality

Four sets of durum samples were used in this study to further understand the interrelationships among hard vitreous kernels (HVK), protein content, and pigment concentration, with a focus on the interaction and synergistic effects of protein content and vitreousness on durum quality. HVK level increases with higher protein content in the range of 9.5–12.5%, but this relationship is less evident in durum samples with high protein content (12.5–14.5%). Both protein content and kernel vitreousness can significantly affect durum milling quality. White starchy kernels (WSK) in low protein durum have a very detrimental impact on milling and pasta processing quality, but high protein content can mitigate the adverse impact of WSK on durum quality. Although protein content plays a dominant role, higher HVK might contribute positively to pasta firmness. There was no significant difference in yellow pigment content between HVK and WSK. However, pigment loss from semolina to dough was higher for WSK than HVK. Despite the difference in protein content, HVK and WSK have little difference in gluten strength. The monomeric protein was preferentially accumulated in HVK. The glutenin proteins of HVK and WSK were similar in the ratios of 1Bx/1By and HMW/LMW-GS.     

浅析蒋益兰教授辨治恶性肿瘤的学术观点

蒋益兰教授基于恶性肿瘤"虚、毒、瘀"互结的病因病机理论，从预防为主的治未病思想，临证辨治的整体观念和个体化治疗，病证结合，分期论治，衷中参西的论治观，提倡带瘤生存和以人为本的肿瘤辨治观，重视肿瘤病人的心理疏导等五个方面形成了诊疗恶性肿瘤的学术观点。     

福建中南部近海四种主要作业蟹类种类组成及其分布特点

蟹类是福建海区重要的经济渔获种类之一。本文基于2009年1月-011年12月期间进行的蟹类调查资料，分析了福建中南部近海四种捕捞作业渔获物中蟹类的种类组成和分布特点。结果表明：福建中南部近海海域有蟹类94种，隶属16科、53属，以亚热带和热带的暖水性种为主，与南海关系最为密切，而与黄、渤海关系较为疏远。从蟹种分布区域看，这些蟹类在浅海均有分布，其中26．6％的蟹类既分布于浅海又分布于潮间带。从蟹种个体大小看，福建海区蟹类多数属于中小型种类。高强度捕捞加剧了对蟹类资源的破坏，因此需要调整捕捞作业结构，拓展外海蟹类捕捞作业，开展资源动态监测和苗种放流增殖工作，并实施TAC管理制度。