灯盏花成分专用型种源评价与鉴定

收集和鉴定了云南省和贵州省共46份灯盏花种质资源,筛选出适合生产不同药品的成分专用型种源,为专用型品种选育提供参考。利用HPLC测定了灯盏花种源10种活性成分含量,相关分析阐明各成分含量间的相关性,聚类分析对种质资源进行分类。结果表明：16份灯盏花种源灯盏乙素（scutellarin, SE）含量在2.5%以上,是培育灯盏花素专用型品种的优良材料,其中4份种源同时含有高含量（>1.0%）的双咖啡酰奎宁酸酯（dicaffeoylquinic acids, diCQAs）,是培育灯盏细辛专用型品种的优良材料;同时,筛选出8份总黄酮（total flavonoids, TFs）含量高于3.5%的种源,适合选育总黄酮专用品种。相关性分析表明,SE含量与diCQAs和TFs含量均显著正相关,是灯盏花品质育种的标志性成分。聚类分析将灯盏花种源分为三大类,除1个种源的SE含量和diCQAs含量接近（第Ⅲ类）外,其他种源SE均占总活性成分的60%以上,其中第Ⅰ类为高TFs型种源,TFs占到总活性成分的80%以上,diCQAs占总成分的15%以下;第Ⅱ类为高diCQAs型种源,diCQAs占总成分的16.9%~28.9%,TFs占到总活性成分的80%以下。该结果表明灯盏花种源活性成分组成存在多种类型,为专用型品种选育提供了可能,灯盏乙素含量可以作为专用型种源筛选的首要指标。     

氮磷钾配施对灯盏花产量和品质的影响及肥料效应

为探究氮磷钾(NPK)肥配施对灯盏花产量和品质的影响及肥料效应,推荐灯盏花NKP肥最佳配比及施用量,本研究采用“3414”设计进行田间小区试验,测定灯盏花产量和主要提取成分野黄芩苷、总黄酮和总咖啡酸酯含量,并计算主要提取成分单位面积收获量,通过肥料效应函数方程拟合NPK施肥量。结果表明,合理施肥可显著提高灯盏花产量,同时氮磷钾肥对产量的影响有互作效应,互作效应大小依次为NPK>NP>NK>PK。氮磷肥互作表现为协同促进作用,而当施钾量处于低中水平时,氮钾肥间和磷钾肥间有协同促进作用。合理施肥可提高灯盏花主要提取成分单位面积收获量,减施或不施N肥,施用中等水平的磷肥和钾肥有利于提高灯盏花品质。综上,通过建立肥料效应函数,获得该地区最佳产量推荐施肥量为N 151.4 kg·hm^-2、P₂O₅ 120.7 kg· hm^-2、K₂O 71.0 kg · hm^-2,产量为13 807.2 kg · hm^-2;获得最高单位面积野黄芩苷收获量(310.7 kg · hm^-2)的施肥量为N 120.0 kg · hm^-2、P₂O₅ 92.1 kg · hm^-2、K₂O 113.6 kg · hm^-2。本研究结果为指导和规范灯盏花施肥技术提供了理论依据。     

Evolution and spread of glyphosate resistance in Conyza bonariensis in California and a comparison with closely related Conyza canadensis

Glyphosate‐resistant weeds are an increasing problem in perennial cropping systems in the Central Valley of California, USA. To elucidate the evolutionary origins and spatial spread of resistance, we investigated the geographical distribution of glyphosate resistance and the population genetic diversity and structure of Conyza bonariensis and compared the results with previously studied C. canadensis. Thirty‐five populations from orchards and vineyards across the Central Valley were sampled. Population genetic structure was assessed using microsatellite markers. Population‐level resistance was assessed in glasshouse screening of plants grown from field‐collected seed. Bayesian clustering and analyses of multilocus genotypes indicated multiple origins of resistance, as observed in C. canadensis. Pairwise F_ST analysis detected spatial spread of resistance in the south of the Central Valley, also similar to C. canadensis. The results strongly indicate that the southern valley was an environment markedly more suitable than the northern valley for resistance spread and that spread in Conyza species was driven by increased uniformity of strong selection in the southern valley, due to recent regulation on herbicides other than glyphosate. Accordingly, resistant C. canadensis individuals occurred at high frequencies only in the southern valley, but interestingly resistant C. bonariensis occurred at high frequencies throughout the valley. Expression of resistance showed varying degrees of plasticity in C. bonariensis. The lower selfing rate and substantially greater genotypic diversity in C. bonariensis, relative to C. canadensis, indicate greater evolutionary potential over shorter time periods. Interspecific hybridisation was detected, but its role in resistance evolution remains unclear.     

云南不同地点短葶飞蓬中野黄芩苷含量比较

[目的]比较云南不同产地短葶飞蓬中野黄芩苷的含量,为短葶飞蓬的良种选育及GAP栽培提供依据。[方法]用HPLC法测定短葶飞蓬中野黄岑苷的含量,色谱条件为：岛津Shim-pack VP-ODS液相色谱柱（150.0 mm×4.6 mm,5μm）;流动相甲醇-0.1%磷酸水溶液（40∶60,V/V）;流速1.0 ml/min;检测波长335 nm;柱温25℃;进样量10μl。[结果]8个产地的短葶飞蓬中野黄芩苷的含量差异较大,昭通巧家药山短葶飞蓬野黄芩苷含量最高（2.628%）,昆明双龙镇短葶飞蓬野黄芩苷含量最低（1.597%）。[结论]该方法精密度、重现性好,适于短亭飞蓬中野黄岑苷含量的测定,为云南短葶飞蓬的良种选育及GAP栽培提供了依据。     

灯盏花组织培养研究

比较了灯盏花组织培养中不同外植体消毒方法和不同激素及其浓度对愈伤组织诱导与分化、继代增殖、生根的影响，并探索了试管苗假植炼苗方法。结果表明：MS＋0．5—1．0mg／L2，4-D培养基的灯盏花幼叶愈伤组织诱导效果最好；在BA浓度为0—2．0mg／L范围内，浓度越高继代增殖倍数越大，而单株生长则是在MS＋BA0．5mg／L＋NAA1—2mg／L培养基上最佳；不同培养基上的组培苗均具有较高的生根率，而生根质量则以MS＋IBA1．0mg／L＋NAA2．0mg／L最好；对生根试管苗进行漂洗、消毒后假植铺有河沙的苗床上，其上建盖有塑料薄膜和遮荫网的小拱棚，并经精心管理，其假植成活率高达95％以上。     

加拿大蓬水浸液对植物幼苗生长的影响

[目的]为阐明我国外来入侵植物加拿大蓬的化感作用提供依据。[方法]研究了加拿大蓬根、茎、叶不同浓度水浸液对9种植物幼苗生长的影响。[结果]加拿大水浸液对植物幼苗株高和根长生长均有明显的抑制作用,且随水浸液浓度的升高抑制活性显著增强,对植物根长生长明显大于对株高生长的抑制,其抑制活性为叶水浸液〉茎水浸液〉根水浸液。[结论]加拿大蓬的化感物质主要存在于叶中。     

灯盏花大田杂草种类调查及防除

经过4年对灯盏花田杂草种类的调查确定,在云南玉溪地区灯盏花田常见杂草有32种,隶属16科,主要杂草是鹅肠菜、野燕麦、长芒棒头草、无芒稗、酸模叶蓼,6月下旬至7月初为发生第1高峰期,10月中至11月下旬为发生第2高峰期,可通过药剂土壤处理、药剂茎叶喷雾防治和人工拔除控制灯盏花田杂草。     

灯盏花遗传转化中组织培养受体系统的研究

对灯盏花遗传转化中组织培养受体系统进行了研究,结果表明:使用MS+BA 0.2(mg/L,单位下同)+NAA 2.0的培养基,播种10 d的幼苗,0.5 cm×1.5 cm大小的真叶作为外植体,能在2周内形成愈伤组织;使用MS+BA0.5+NAA0.5培养基,附加30 g/L蔗糖,以真叶为外植体,能在2周内诱导不定芽形成;使用75μg/ml的氯霉素(Chl.)作为土壤农杆菌转化培养的选择压力,使用50μg/ml的庆大霉素(Gent.)作为转基因植株的选择压力,使用300μg/ml的头孢霉素(Cef.)作为土壤农杆菌转基因的抑菌抗生素,对灯盏花遗传转化效果最佳。     

灯盏花不定芽无糖生根培养的微环境调控技术研究

 以灯盏花组培不定芽为材料，研究探讨了不同处理组合的无糖组织培养培微环境调控对灯盏花不定芽的生根率的影响。结果表明：在一定CO₂浓度范围内，通过对各处理间差异显著性SSR检验，处理9的灯盏花无糖组培苗生根率最高，长势最好，与其它处理组合比较达到显著水平。     

不同施肥配比对灯盏花产量和灯盏乙素含量的影响*

 应用L₉（3⁴）正交设计对不同施肥配比下灯盏花进行大田试验,观测了其生长情况、产量和灯盏乙素含量。结果表明：N,P,K三个因素对灯盏花产量影响的主次关系为K＞N＞P,其最佳组合为N₂P₃K₃,比例为N∶P∶K=3∶2∶1;对灯盏乙素含量影响的主次关系为N＞P＞K,最佳组合为N₃P₃K₃,比例为N∶P∶K=4∶2∶1;公顷含灯盏乙素量的主次关系为K＞P＞N,N₂P₃K₃是最佳组合,比例为N∶P∶K=3∶2∶1。在灯盏花栽培中,增施氮肥,适当施用磷肥,控制钾肥施用量能提高其产量和灯盏乙素含量。