鱼类组蛋白核苷酸的多态性及其在杀鱼爱德华氏菌感染中的作用

组蛋白是染色体核小体的重要组分,在调控染色质结构、基因转录、个体发育等不同生物学过程中起着重要作用。为了研究鱼类组蛋白基因是否存在核苷酸的多态性以及组蛋白核苷酸多态性是否会影响鱼类的抗病力,本实验以斑马鱼和草鱼为研究对象,通过PCR扩增克隆了组蛋白H2A的全长开放阅读框;利用过表达技术、菌落平板计数、感染存活分析以及荧光定量PCR技术,研究了斑马鱼和草鱼组蛋白H2A核苷酸多态性不同变异体在杀鱼爱德华氏菌感染中的作用。在本研究中,实验发现鱼类组蛋白H2A存在着丰富的核苷酸多态性。序列分析结果显示斑马鱼和草鱼组蛋白H2A核苷酸多态性的变异体核苷酸序列相似性为90%～100%;而两两H2A核苷酸多态性变异体氨基酸序列之间最多只有3个位点存在差异。通过体内和体外抗菌实验可知,斑马鱼和草鱼组蛋白H2A核苷酸的多态性显著影响H2A的抗菌活性。此外,筛选出的抗菌组蛋白H2A核苷酸多态性的变异体在斑马鱼体内的过表达,不仅具有免疫增强的作用,还能显著增强斑马鱼对杀鱼爱德华氏菌感染的抗病力。本研究为筛选具有抗病作用的组蛋白H2A免疫保护原奠定了重要基础。     

核心竞争力视角下农产品加工业人力资源管理研究——以铜仁市为例

基于核心竞争力视角,设计农产品加工业人力资源管理问卷和访谈进行数据搜集,结合数理统计分析,对铜仁市农产品加工业的人力资源管理进行分析。结果表明,被调查企业的人力资源管理存在管理模式较为粗放、管理理念相对落后、制度不够完善、“无法可依”和“有法不依”2种现象同时并存、从业人员素质偏低、年龄结构分布不合理、薪酬制度不合理等问题,并就存在的问题提出相应的对策。     

人溶菌酶密码子优化及其在牛乳腺细胞中高效表达

【目的】分析牛乳腺中7种主要乳蛋白基因密码子使用偏好性,筛选高频密码子和低频密码子,依据其对人溶菌酶基因进行密码子局部优化和全局优化,通过牛乳腺上皮细胞等多种细胞对优化效果进行分析评价,为提高重组人溶菌酶表达量,开发新型、高效、安全的重组人溶菌酶提供理论依据。【方法】利用CodonW和EMBOSS等软件对7种主要牛乳蛋白和人溶菌酶基因密码子偏好进行生物信息学分析,筛选牛乳蛋白基因高频、低频密码子并根据牛乳蛋白基因密码子使用偏好对人溶菌酶基因翻译起始区前22位密码子（LYZop22）和全局密码子(LYZop)分别进行优化。构建人溶菌酶-荧光素酶融合表达载体（pGL3-LYZcw/op22/op）和人溶菌酶过表达载体（pcDNA-LYZcw/op22/op）,将上述载体分别转染牛乳腺上皮细胞(BMEC)、牛成纤维细胞（BFFC）和C127小鼠乳腺上皮细胞等3种细胞,通过荧光素酶、实时荧光定量PCR及Western-blot等方法检测密码子优化对溶菌酶表达的影响。【结果】牛乳蛋白基因密码子偏好以GC结尾,GC3s平均含量为0.537±0.062,而人溶菌酶GC3s含量为0.407,偏好以AT结尾;聚类结果表明,牛乳中酪蛋白与乳清蛋白类基因在密码子使用偏好性上也存在一定差异。依据筛选获得的牛主要乳蛋白基因5个高频密码子（RSCU>1.5）和7个低频密码子（RSCU<0.5）对人溶菌酶基因密码子进行优化并转染多种细胞进行表达效果分析。荧光素酶分析发现,相比野生型溶菌酶密码子（LYZcw）,翻译起始区密码子优化类型LYZop22分别在BMEC、BFFC细胞中提高1.48倍（P<0.01）和1.30倍（P>0.05）;而全局密码子优化类型LYZop分别在BMEC、BFFC中提高2.2倍（P<0.01）和2.44倍（P<0.01）,说明密码子优化能明显提高人溶菌酶在多种细胞中表达量。实时荧光定量PCR结果表明,LYZop22相比LYZcw在BMEC和BFFC细胞中分别提高了2.08倍（P<0.05）和1.5倍（P>0.05）,而LYZop则分别提高了22倍（P<0.01）和17.8倍（P<0.01）,mRNA表达水平与密码子优化后的mRNA二级结构稳定性呈正相关。Western-blot结果也进一步表明,密码子优化后的LYZop22和LYZop能明显提高重组人溶菌酶在牛乳腺上皮细胞中的表达量。上述结果表明,根据牛乳腺中主要乳蛋白基因密码子使用偏好进行密码子优化,能显著提高人溶菌酶在牛乳腺上皮细胞及成纤维细胞中的表达量,且溶菌酶基因全局密码子优化效果优于翻译起始区密码子优化效果。【结论】通过生物信息学分析获得了牛乳蛋白基因使密码子使用偏好及高低频密码子;依据牛乳蛋白密码子使用偏好性对人溶菌酶密码子优化能显著提高重组人溶菌酶mRNA水平和蛋白水平的表达量,为今后利用生物反应器高效生产重组人溶菌酶奠定基础。     

不拘于形，不役于物——欧阳修的园林活动与园林书写

欧阳修自幼与园林结缘，仕宦四十年，所到之处植花造园，笔耕不辍，留下数座园林景观、二十多篇园亭记及百余首园林诗词，撰写了现存最早的牡丹专著《洛阳牡丹记》，为后人研究园林提供了珍贵的史料。欧阳修的园林活 动和园林书写与其宦海沉浮、文学创作紧密相关。欧阳修热爱但不耽溺于园林，其崇尚自然、开放自适，不拘于形，不役于物的园林观，拓宽了园林审美的视域，启发了后人对“物”的审美思考，为园林理论注入了新鲜血液。欧阳修进一步打开了园林的大门，推动了园林的开放，为园林的繁荣与普及做出贡献。     

人地协调视角下农村居民点利用质量评价与提升策略

农村居民点高质量利用是乡村振兴的一种具体表现，综合开展农村居民点质量评价、全面改善质量障碍要素是科学编制村庄规划和优化农村要素配置的基础。该研究以北京市平谷区为例，从土地集约利用和人居环境品质相互协调的视角界定农村居民点利用质量内涵并构建评价体系，综合运用熵权-TOPSIS法、变异系数修正的弹性系数法和障碍度诊断模型，对农村居民点利用质量进行评价并提出相应的提升策略。结果表明：1）平谷区农村居民点土地集约利用水平中等偏高，人居环境品质和农村居民点利用综合质量则中等偏低。2）平谷区农村居民点类型表现为中等质量主导、高质量次之、低质量偏少，对应着从脱钩F弱型、脱钩T弱型、正向挂钩F强型、负向挂钩F弱型、正向挂钩T强型、负向挂钩T弱型、正向挂钩T-F同强型、负向挂钩T-F同弱型的村庄数量依次降低。3）平谷区农村居民点高质量利用的障碍要素主要体现在规模强度、空间布局、生活环境和生产环境4个维度，从高质量到低质量利用类型，障碍因素数量增多、作用程度逐渐增大。4）平谷区应充分发挥生态环境优势，在"整体化、集约化、人本化和善治化"战略导向下，按照"高质量利用类适当优化、中等质量利用类同步调控、低质量利用类系统整治"策略，分类有序地推进农村居民点质量提升。     

旅游活动对生态环境及牧草资源的影响

随着国家经济快速增长,居民生活水平得到巨大提升,假期出行旅游已成为国民重要的精神文明需求,但当前我国草原旅游业发展不够成熟,旅游活动增加对草原生态环境及牧草资源造成了一定影响,这其中既有积极的影响也包含消极影响,本文通过以当前我国草原生态系统环境承载能力为切入点,以草原生态系统一级牧草资源生长所需条件为前提,深入挖掘旅游活动对草原生态环境的影响及可能面临的破坏风险,从而找出草原生态环境及牧草资源的可持续发展路径与建议,为草原生态系统及牧草资源的发展提供一定的理论保障。     

Most fish destined for fishmeal production are food‐grade fish

Marine fisheries target and catch fish both for direct human consumption (DHC) as well as for fishmeal and fish oil, and other products. We derived the fractions used for each for 1950–2010 by fishing country, and thus provide a factual foundation for discussions of the optimal use of fisheries resources. From 1950 to 2010, 27% (~20 million tonnes annually) of globally reconstructed marine fisheries landings were destined for uses other than DHC. Importantly, 90% of fish destined for uses other than DHC are food‐grade or prime food‐grade fish, while fish without a ready market for DHC make up a much smaller proportion. These findings have implications for how we are using fish to feed ourselves or, more appropriately, how we are not using fish to feed ourselves.     

论能岗匹配原理在农业企业人力资源招聘中的应用

合理地进行人岗匹配，是有效实现农业企业人力资源管理职能的前提。而能岗匹配原理作 为人力资源招聘过程中的黄金法则，正逐渐成为人力资源管理研究的热点，受到越来越多学者的关 注。本文详细阐述了能岗匹配原理，剖析了能级与权级的异同之处，并尝试提出相关理论的在操作中 的操作方式。     

关中-天水经济区人类活动对植被覆盖变化的影响

为探究植被覆盖变化及人类活动对改善关中地区及西北地区的生态环境影响,利用植被覆盖和地表温度数据,结合Sen趋势与Mann-Kendall检验分析关中-天水经济区2001—2016年的植被覆盖变化趋势,并根据估算的土壤湿度因子,应用残差法评价人类活动对植被覆盖变化的影响程度及影响方向。结果表明:1)从时间变化维度来看,2001—2016年关中-天水经济区植被覆盖变化总体呈良好趋势,且整体表现为在不断波动中递增,表明关天经济区进行的生态环境建设工程正在慢慢凸显它的生态效应。2)从空间变化维度来看,关中-天水经济区植被覆盖显著增长的区域面积占35.87%,主要集中在研究区南北两侧。而显著下降的面积区域占3.21%,主要分布在城市中心,即经济发展活跃的地区,如西安市区,宝鸡市区,天水市区,铜川市区等。3)关中-天水经济区植被覆盖受自然因素影响较小,受其他因素影响大。其正相关区域占13.43%,不显著相关区域占85.26%。4)关中-天水经济区人类活动对植被覆盖变化的正作用大于负作用。其中,正作用区域主要分布在研究区北部和东南地区,其主要原因是人类活动不频繁,建设生态屏障、加强退耕还林、三北防护林保护以及水土保持等生态工程促进植被NDVI增长。负作用区域主要分布在渭河沿线、经济活动较高地区,其主要原因有:人类活动频繁、过度城市化、工业化等抑制植被生长。5)植被覆盖的增长和下降区域与人类活动对植被影响的正作用和负作用区域大致相同。这也从侧面反映了关天经济区植被覆盖情况受人类活动影响大。总之,在负作用区域,在经济建设发展的同时也要注重植被建设、以及对植被乃至生态环境的保护。     

Responses of Australian sea lions,Neophoca cinerea,to anthropogenic activities in the Perth metropolitan area,Western Australia

1. Tourist‐based activities, partly due to their rapid increase, have raised concerns regarding the impacts of anthropogenic activity on marine fauna. Documented effects on pinnipeds in proximity to humans include changes in behaviour, site use and potentially higher aggression levels towards people. Effects vary considerably between populations and sites, thus requiring separate assessment of human impacts on activity and energy budgets.
2. Responses of the endangered Australian sea lion, Neophoca cinerea, to human visitation were recorded from November 2013 through April 2014. Exposure levels and response types to anthropogenic activities were assessed at two easily accessible locations with different management schemes, Seal (landing prohibited) and Carnac (landing permitted) islands, Western Australia. Exposure levels were measured as both stimulus type (i.e. ‘People’, ‘Paddlers’, ‘Small’, ‘Medium’, and ‘Large vessels’, ‘Tour vessels’, and ‘Jet skies’), and people (‘Direct’, ‘Attract’, ‘Interact’, ‘View’, ‘Incidental’, ‘Water’, ‘Low‐level’), and vessel activities (‘Interact’, ‘Approach/Follow’, ‘Anchor noise’, ‘Engine noise’, ‘Close to beach’, ‘Moderate/Fast travel’, ‘Slow travel’, ‘Transit’, ‘Drift/At anchor’, ‘Aircraft noise’).
3. Exposure levels varied significantly between the islands in numbers, stimuli type, duration and minimum approach distances. The instantaneous behaviours of ‘Lift head’, ‘Interact’ and ‘Sit’ were the most frequent responses. ‘Aggressive’ and ‘Retreat’ responses, the highest disturbance levels measured, occurred on Carnac approximately once per day, but rarely on Seal Island. ‘Aggressive’ behaviour towards ‘People’ was observed only on Carnac Island and elicited only by ‘People’. ‘People’, ‘Tour vessels’, and scenic ‘Aircrafts’ on both islands as well as ‘Jet skis’ on Carnac Island had the highest probability of triggering responses. Owing to their relatively high visitation at Seal Island, ‘Paddle powered vessels’, followed by ‘Tour vessels’ elicited the highest number of responses, compared with ‘People’, ‘Small’, and ‘Medium vessels’ at Carnac Island. The majority of responses occurred when any stimulus type was at short‐range (≤10 m), and ‘People’ ‘Viewing’ N. cinerea elicited most. Vessels triggered more responses at larger ranges than ‘People’.
4. To limit close‐range access to N. cinerea, one possibility is to close the beach at Carnac Island to human visitation and increase the minimum approach distance by vessels and ‘People’ by installing marker buoys at least 15 m from the shore.

© 2016 The Authors. Aquatic Conservation: Marine and Freshwater Ecosystems published by John Wiley & Sons, Ltd.