噬菌体在防治畜禽沙门氏菌感染中的应用

噬菌体是病毒中分布最广泛和最常见的群体,具有专一性强、裂解效率高、易发现且成本低等优点。噬菌体现阶段已被用于人类食品安全卫生、动植物病原菌的控制等方面,是代替抗生素控制细菌病的重要手段。沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌和人畜共患病原菌,感染动物机体后会引发沙门氏菌病,导致幼龄动物出现较高的感染率和死亡率。国内养殖业主要依赖抗生素防控沙门氏菌感染,但随着细菌的不断进化,沙门氏菌在不同物种之间产生了严重的耐药性。论文就噬菌体的生物学特性和作用机制及噬菌体在防控畜禽沙门氏菌感染中的应用进行综述,以期为研究和应用提供参考。     

噬菌体P1侵染大肠杆菌Nissle1917(EcN)机理研究

[目的]找出噬菌体侵染大肠杆菌的位点。[方法]选择血清型为O6∶K5∶H1的大肠杆菌Nissle 1917(Ec N)作为试验菌株。通过λ-RED系统,突变其K抗原和O抗原合成基因,通过检测P1转导至这一系列突变株的转导效率来确定P1的侵染位点。[结果]双突变株Ec NΔkfi AΔwaa G::Cm具有最高的转导效率。kfi A基因突变导致了K抗原缺失,waa G基因突变导致了LPS核心寡糖中第2位庚糖(HepⅡ)的暴露,使得P1更容易接触到HepⅡ,从而侵染细菌。[结论]研究认为HepⅡ很可能就是噬菌体P1的识别位点。     

内含NDV核酸的耐核糖核酸酶病毒样颗粒作为荧光定量RT-PCR内标的制备与鉴定

为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。     

沙门菌烈性噬菌体的分离鉴定及生物学特性的试验

从商品肉鸭场采集鸭粪及垫料,以实验室保存的沙门菌为宿主菌,采用双层平板法分离到1株烈性噬菌体。对分离到的噬菌体进行纯化、效价测定、裂解谱测定、形态观察,并且进行了最佳感染复数、温度跟p H值稳定性和一步生长曲线的生物学特性研究。结果表明,该噬菌体形成的蚀斑均匀透亮,效价能达到109PFU/m L以上,并能裂解多株沙门菌菌株,为宽裂解谱噬菌体,透射电镜显示,该噬菌体为长尾噬菌体;最佳感染复数为0.001;一步生长曲线测定表明,该噬菌体的潜伏期为15 min,暴发期为30 min,暴发量约为320;该噬菌体的温度、p H值耐受性良好;紫外线照射60 min后效价降低3个梯度,由此可见该噬菌体分离株可作为潜在开发的生物消毒剂菌株。     

犊牛几种常见病的中药疗法

在临床上犊牛疾病是常见病之一,防治不当会造成经济损失。介绍利用中草药治疗犊牛几种常见病方法,供参考。     

茶文化疗法对学生心理教育的干预研究

茶文化作为我国传统文化的精髓,它存在的意义非凡,并起着对大学生心理教育的干预作用。当下的大学生心理上存在的问题集中表现在人际沟通和日常的交流上。新科技打开了大学生的新世界,也正因为这样的背景,让不少大学生出现了很多不愿意与人交流等心理健康问题。日常生活的节奏很快,导致大学生内心的负面情绪被积累,甚至做出很多匪夷所思的事。为避免这样的情况发生,我们可以将传统的茶文化理念引入到心理教育中。当代的大学生与人沟通存在一定的障碍,因此,以茶文化疗法干预学生的心理健康教育,是当下工作开展的重中之中。本文将根据现有学生的心理问题做出分析,然后从整体上把握住茶文化疗法,探讨适合学生的心理教育方式,最终得出相关结论。     

砭石热敷治疗输卵管阻塞性不孕症疗效观察

目的 观察砭石热敷联合毛冬青灌肠及频谱治疗对输卵管阻塞性不孕症的临床疗效。方法 将180例输卵管阻塞性不孕症患者随机分为观察组89例和对照组91例，观察组采用烫熨治疗砭石热敷+毛冬青灌肠+频谱治疗，每天1次，20 min/次，2周为1疗程。对照组采用毛冬青灌肠+频谱治疗，方法疗程同观察组。2组疗程均为3个月经周期，随访6个月。观察比较两组治疗后中医证候积分、临床疗效、生育力和不良反应。结果 两组患者治疗后中医证候积分较治疗前下降（P<0.05）（观察组带下异常除外），观察组在改善小腹疼痛及腰骶胀痛方面优于对照组（P<0.05）；观察组治愈率优于对照组；两组患者治疗后生育力比较，观察组临床妊娠率高于对照组（P<0.05）；观察组患者腹泻等副反应比对照组减轻。结论 烫熨治疗砭石热敷在输卵管阻塞性不孕患者中的作用较为明显，且副作用小，值得临床推广应用。     

脾虚湿蕴型荨麻疹行自血疗法与梅花针联合治疗的效果观察

目的 观察脾虚湿蕴型荨麻疹行自血疗法与梅花针联合治疗的效果。方法 随机选取本院2016年1月至2017年10月收治的脾虚湿蕴型荨麻疹患者200例，随机数字表法分为3组，66例予以自血疗法治疗者为A组，66例予以梅花针治疗者为B组，68例予以梅花针联合自血疗法治疗者为C组，对比分析3组治疗前后荨麻疹活动评分、免疫功能与复发情况。结果 治疗后，C组荨麻疹活动度评分较A组、B组低，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后，C组辅助性T细胞（CD4⁺）、细胞毒性T细胞（CD8⁺）及CD4⁺/CD8⁺值优于A组、B组，差异有统计学意义（P<0.05）；C组复发率较A组、B组低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 脾虚湿蕴型荨麻疹行自血疗法与梅花针联合治疗可有效降低荨麻疹活动度评分，改善免疫功能，并且减少复发率，值得推广。     

园艺疗法对空巢老人心理健康的干预探究

在经济发展、社会进步的今天,我国人口总体呈现老龄化发展,一些农村地区青壮年外出务工,空巢老人的数量和规模扩大。空巢老人群体长期独居家中会引发空巢综合征,子女长期在外,老人得不到关怀,会造成心理不健康。针对该类人群,园艺疗法以心理团体治疗等方式,可在一定程度上干预空巢老人的心理健康。分析了空巢老人心理健康现状,并阐释了园艺疗法的优势及其应用。     

广东梅州柑橘黄龙病和病毒病的发生调查及其黄龙病菌原噬菌体多样性

【目的】调查柑橘黄龙病（Huanglongbing,HLB）和病毒病在广东省梅州市柑橘主产区的危害情况,分析该地区柑橘黄龙病菌（CLas）的原噬菌体多样性。【方法】以16S rDNA为模板设计引物,利用实时荧光定量PCR（qPCR)检测梅州市不同抽检地在2017—2019年3年间柑橘黄龙病的发病情况;同时分别采用已报道的柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus,CTV）、柑橘裂皮病毒（Citrus exocortis viroid,CEVd）、柑橘褪绿矮缩病毒（Citrus chlorotic dwarf-associated virus,CCDaV）、柑橘碎叶病毒（Citrus tatter leaf virus,CTLV）和柑橘黄脉病毒（Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV）的特异性检测引物,提取样品的RNA,反转后以样品的cDNA为模板,通过普通PCR的方法分析梅州市抽检地区柑橘病毒病的发生情况。此外,以基于2种原噬菌体类型（SC1和SC2）对应的超变异基因区域设计的2对引物（Lap-TJ-F/Lap-TJ-R1和Lap-TJ-F/Lap-TJ-R2）,运用普通PCR方法分析该地区CLas菌株原噬菌体的遗传多样性。【结果】除2018年9月梅州大浦顺兴公司蜜柚基地的抽检样品外,梅州市其他被检地区均发现CLas。总体来说,梅州市的脐橙CLas检出率为55.3%,蜜柚为61.5%,沙田柚为61.7%。其中2017年采集自平原县大拓镇的蜜柚和沙田柚样品CLas检出率为100%,兴宁市白马镇的蜜柚为100%,沙田柚为80%;其他抽检地区的样品CLas检出率在16.7%—83.3%。虽然梅州市部分地区的检出率较高,但其病原菌的含量并不高,大部分处于柑橘黄龙病发病初、中期,属可防可控阶段;此外,梅州市柑橘病毒的总检出率不高,CTV、CTLV和CYVCV为梅州的主要病毒,CEVd和CCDaV没有检测到。CTV、CTLV和CYVCV在脐橙上的检出率依次为78.9%、7.9%和21.1%,蜜柚为15.4%、25.0%和9.6%,沙田柚为6.4%、2.1%和4.3%。基于Lap-TJ-F/Lap-TJ-R1和Lap-TJ-F/Lap-TJ-R2来研究CLas原噬菌体多样性的PCR扩增条带共有4种类型（SC1-1、SC1-2、SC2-1和SC2-2）,经过PCR电泳和测序得出,来自梅州市脐橙和沙田柚的CLas菌株以SC2-1型为主,蜜柚上以SC1-1型为主。【结论】梅州柑橘产区的柑橘黄龙病目前属于可防可控阶段,其病原菌菌株的原噬菌体在不同品种上具有其独特性;由于在抽检时发现有柑橘病毒病的存在,因此在种植过程中需加强种苗监管,同时应采取有效措施对柑橘黄龙病和柑橘木虱（Diaphorina citri）进行绿色防控。