3种接种方法对十字花科黑腐病菌Xcc8004菌株在拟南芥Col-0上致病力的影响

十字花科黑腐病菌（Xanthomonas campestris pathovar carnpestris，Xcc）是引起十字花科植物黑腐病的病原菌，也是研究寄主与病原微生物相互作用分子机理的模式菌之一。Xcc可以感染白菜、萝卜和甘蓝等十字花科农作物，也可以感染重要的模式植物拟南芥（AroJoidopsisthaliana）。由于拟南芥的全基因组测序已经完成，因此，拟南芥是研究寄主植物对Xcc浸染的防卫反应的分子机理的最理想的寄主材料。但是，到现在为止，一套完善的在拟南芥上进行xcc致病检测的实验系统还没有建立。为此，本研究比较了“叶片压渗法”、“剪叶法”和“叶片中脉穿刺法”这3种常用的病原细菌接种方法对Xcc的实验室菌株8004f以下简称Xcc8004）在哥伦比亚生态型拟南芥似．thanlianaecoype Colombia0，Col-0）上的致病力的影响。结果发现，在拟南芥Col-0叶片上用“叶片压渗法”接种Xcc8004可以引起明显致病症状，而用“剪叶法”和“叶片中脉穿刺法”接种均不能引起病症。这一结果说明，不同的接种方法的对Xcc在拟南芥上的致病力有很大的影响。因此，要在拟南芥Col-0上进行Xcc8004的致病力检测，本研究建议采用“叶片压渗法”而不用“剪叶法’和“叶片中脉穿刺法”。此外，本研究还建立了一套简易的拟南芥试验用苗的栽培方法。  

大肠杆菌转录后调控蛋白CsrA的C末端具有抑制十字花科黑腐病菌胞外蛋白酶活性的功能

CsrA（在有些细菌例如十字花科黑腐病菌中也称为RsmA，统称CsrA／RsmA）是一类在细菌中广泛分布而且氨基酸序列非常保守的RNA结合蛋白。研究表明，CsrA／RsmA作为转录后全局调控因子参与了包括细胞碳代谢、次生代谢、运动性、生物被膜形成以及动植物病原菌的致病过程等许多细胞过程的调控。CsrA／RsmA在不同的细菌中的生物学功能各有异同。在大肠杆菌中，CsrA的主要功能是控制细胞的碳代谢、运动性和生物被膜形成；而在十字花科黑腐病菌（Xanthomonas campestrispathovarcampe5tris，Xcc）中，CsrA的同源蛋白RsmA的主要功能除了控制碳代谢、运动性和生物被膜形成外，还控制致病性和胞外酶的产生。大肠杆菌的CsrA（CsrAEcoli）是否具有XccRsmA（RsmAXcc）的功能？为了回答这个问题，我们用大肠杆菌的csrA基因（csrAE.coli）互补Xcc的耶剃基因（rsmAXcc）的缺失突变体DM2506。结果显示，csrAE.coli能够互补DM2506的所有表型，说明csrA。瑚具有RsmAXcc的全部功能。更重要的是，我们发现，无论是瑚，叫枷突变体还是野生型菌株，导入表达CsrAE.coli扰的质粒后均导致其致胞外蛋白酶活性的严重下降，证明CsrAE.coli，以具有抑制Xcc胞外蛋白酶活性的作用。进一步的实验证实，CsrA E.coli的C末端第53～61位氨基酸残基具有抑制Xcc胞外蛋白酶活性的功能。