谷氨酰胺对斜带石斑鱼GF-1细胞中C-Myc蛋白的表达与神经坏死病毒复制的影响

为探讨C-Myc表达、谷氨酰胺代谢和神经坏死病毒复制三者之间的关系,本研究首先克隆了斜带石斑鱼鳍条细胞(GF-1)中的C-Myc基因(GF-1-C-Myc),结果显示GF-1-CMyc基因cDNA全长814 bp,开放阅读框(ORF)为285 bp,编码95个氨基酸(aa),有亮氨酸拉链结构域与螺旋-环-螺旋(HLH)结构域。实验表达和纯化了GF-1-C-Myc蛋白,并制备其多克隆抗体。采用实时定量PCR技术(qRT-PCR)与免疫印迹法(WB)检测了GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒的复制。结果显示,缺乏谷氨酰胺会同时抑制GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒(NNV)的复制,添加谷氨酰胺可同时促进GF-1-C-Myc的表达和NNV的复制;此外,NNV感染可上调GF-1-C-Myc基因的表达,并显著消耗GF-1细胞培养液中的谷氨酰胺。研究表明,GF-1-C-Myc基因可调控宿主谷氨酰胺代谢,从而有利于神经坏死病毒的复制。本结果为防控NNV的感染提供了参考。     

血迹搜索犬 协助侦破交通肇事逃逸案分析

正交通肇事逃逸案件是指机动车驾驶员在发生交通事故的同时,擅自逃离事故现场,使交通事故所引起的民事、刑事、行政责任无法确定,是推卸、逃脱责任的行为,根据所造成的损失后果不同,可能要承担民事责任或刑事责任的案件。交通肇事逃逸案件虽然在整个交通事故总量中所占比例不高,但事故主体逃逸所导致的受害人及其家属权益无法得到保障,案件不能及时侦破,对社会稳定及公安公信力往往造成不利影响。     

产业扶贫中乡村回流经济精英的行为逻辑探究——以“一地生四金”产业扶贫模式为例

伴随乡村经济精英回流参与产业扶贫,乡村经济与社会发展已取得初步成效。经济精英群体在产业创建、资金筹备、技术传授、市场开拓等环节给予了农村群众尤其是贫困户重要帮扶,大大提高了产业扶贫的效率。当前我国处于脱贫攻坚战的决胜时期,仍有很多"硬骨头"要啃,本文通过探究"一地生四金"产业扶贫模式下乡村回流经济精英产业扶贫的行为逻辑,总结普适性规律,以便其他地区的乡村回流经济精英学习、推广,从而助力推进脱贫攻坚,促进实现乡村振兴。     

伴有跛行症状的猪病及诊治

猪佝偻病、软骨病与骨质疏松症,这些病在临床表现上都有一个共同的症状;跛行。骨髓炎与脊柱脓肿是由病原菌(尤其是化脓隐秘杆菌)引起。骨软骨病和腿无力是导致猪跛行和种猪淘汰的主要原因。创伤与用力过度有关,可造成母猪内侧肱骨上踝和股骨大转子肌腱分离和增生性骨炎,导致猪跛行。对这类疾病需了解病因和临诊表现,采取必要的应对措施。     

基于YOLO v3与图结构模型的群养猪只头尾辨别方法

在利用视频监控技术对群养猪只进行自动行为监测时,对猪只准确定位并辨别其头尾位置对提高监测水平至关重要,基于此提出一种基于YOLO v3(You only look once v3)模型与图结构模型(Pictorial structure models)的猪只头尾辨别方法。首先,利用基于深度卷积神经网络的YOLO v3目标检测模型,训练猪只整体及其头部和尾部3类目标的检测器,从而在输入图像中获得猪只整体及头尾部所有的检测结果;然后,引入图结构模型,描述猪只的头尾结构特征,对每个猪只整体检测矩形框内的头尾部位组合计算匹配得分,选择最优的部位组合方式;对部分部位漏检的情况,采取阈值分割与前景椭圆拟合的方法,根据椭圆长轴推理出缺失部位。在实际猪场环境下,通过俯拍获得猪舍监控视频,建立了图像数据集,并进行了检测实验。实验结果表明,与直接利用YOLO v3模型相比,本文方法对头尾定位的精确率和召回率均有一定提高。本文方法对猪只头尾辨别精确率达到96.22%,与其他方法相比具有明显优势。     

罗氏沼虾细胞色素P450家族CYP302a1基因克隆及其在蜕皮周期中的表达

蜕皮是甲壳动物重要的生理活动,与其蜕皮激素的合成密切相关,细胞色素P450(CYP)302a1是甲壳动物蜕皮激素合成通路中的关键酶之一。本研究克隆了罗氏沼虾CYP302a1基因(Mr-CYP302a1),cDNA全长1859 bp,开放阅读框(ORF)为1629 bp,编码543个氨基酸(aa),分子量大小为61.09 ku,等电点为8.42。氨基酸序列分析显示CYP302a1基因的保守结构域含有5个P450基因家族特征保守区域:heme-binding、helix-K、helixC、helix-I及PERF。系统进化分析结果显示Mr-CYP302a1首先与绿虾CYP302a1聚为一支,然后与凡纳滨对虾及三疣梭子蟹等十足目甲壳动物的CYP302a1聚为一支,与甲壳动物的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测表明Mr-CYP302a1在罗氏沼虾的多个组织中均有表达,其中在Y器官中的表达量最高,性腺中次之。同时研究发现,MrCYP302a1基因在罗氏沼虾的蜕皮后期(A期和B期)表达量很低,蜕皮间期(C期)表达量开始上升,在蜕皮前期D1亚期达到峰值。对Mr-CYP302a1进行蛋白表达及多克隆抗体制备,蛋白印迹法(Western blot,WB)检测表明Mr-CYP302a1蛋白在罗氏沼虾Y器官中的表达量最高,在蜕皮过程中的蜕皮前期D1亚期达到峰值。综上所述,该基因在罗氏沼虾的蜕皮过程中扮演着十分重要的角色。     

风湿祛痛胶囊中地龙药材的鉴定

目的地龙是巨蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum (E.Perrier)、通俗环毛蚓Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛蚓Pheretima guillelmi (Michaelsen)或栉盲环毛蚓Pheretima pectinifera Michaelsen的干燥体。具有清热定惊,通络,平喘,利尿的功效。近年来,由于需求量大,出现地龙掺假的现象,于是采用分子生物学方法来鉴定地龙的真伪,同时建立一种鉴定地龙的方法。方法提取地龙粉末、地龙水提物、地龙醇提物、风湿祛痛胶囊的DNA,采用PCR方法得到PCR产物,并电泳鉴定其产物大小,鉴定地龙真伪,通过实验验证方法的稳定性。结果研究发现含有地龙的制剂的PCR产物均在260bp之间有单一条带,并摸索得出鉴定的条件为:95℃预变性5 min,35个循环(95℃变性30 s,58℃30 s,72℃30 s),72℃延伸5 min,经过验证具有稳定性。     

宝塔形桃树整形修剪技术

正内黄县地处豫北黄河故道,土层深厚,土壤肥沃,是桃树的天然适生地。全县共有桃树面积5万余亩,广大果农积累了丰富的管理经验,但是传统的整形修剪方法大多是开心形,近年来,笔者通过试验示范总结出一个新的树形,即宝塔形(图1)。这种树形的整形方法既简单易学,又可实现丰产丰收,提高了产量,增加了效益,受到当地及周边地区果农的一致欢迎。     

4种食用植物油脂三级中红外光谱鉴别研究

在4 000～600 cm~(-1)的频率范围内,采用一维及二阶导数中红外光谱技术,研究解析了豆油、花生油、玉米油和橄榄油等4种食用植物油脂的结构。实验发现,食用植物油脂同时存在着CH_3不对称伸缩振动模式(ν_(as CH3)),CH_2不对称伸缩振动模式(ν_(asCH2)),CH_3对称伸缩振动模式(ν_(sCH3)),CH_2对称伸缩振动模式(ν_(sCH2)),C=O伸缩振动模式(ν_(C=O)),CH_2弯曲振动模式(δ_(CH2)),CH_3对称弯曲振动模式(δ_(sCH3)),C-O-C伸缩振动模式(ν_(C-O-C)),CH_2平面摇摆振动模式(ρ_(CH2))等。研究发现,采用一维及二阶导数中红外光谱难以鉴别区分上述4种食用植物油脂。为此,依次研究解析了4种食用植物油脂的二维中红外光谱,包括ν_(asCH3)、ν_(asCH2)、νs_(CH3)、ν_(sCH2)、ν_(C=O)、δ_(CH2)、δ_(sCH3)、ν_(C-O-C)和ρ_(CH2)等。实验发现,以ρ_(CH2)为研究对象,在780～700 cm~(-1)的频率范围内,采用二维中红外光谱技术可以有效鉴别4种食用植物油脂。本项研究拓展了三级中红外光谱技术在食用植物油脂鉴别的应用范围。     

风湿祛痛胶囊对大鼠急性痛风性关节炎及环氧化酶(COX-2)的影响

目的:研究风湿祛痛胶囊(Fengshi Qutong Jiaonang,FQJ)对急性痛风性关节炎(Acute Gouty Arthritis,AGA)大鼠的抗炎作用及其作用机制。方法:通过尿酸钠(MUS)诱导大鼠急性痛风性关节炎动物模型以及环氧化酶-2(COX-2)抑制剂体外检测方法,考察风湿祛痛胶囊对急性痛风性关节炎大鼠的足肿胀以及大鼠血清中尿酸(UA)的含量的影响,并考察风湿祛痛胶囊体外抗炎作用。结果:风湿祛痛胶囊能明显减轻急性痛风性关节炎大鼠足肿胀度,能明显降低炎性大鼠血清中UA含量,并且能够抑制COX-2的活性。结论:风湿祛痛胶囊治疗急性痛风性关节炎有确切疗效,可能与降低UA含量,抑制COX-2的活性有关。